微生物名词解释:1.专业需氧菌:进行有氧呼吸的细菌称为需氧菌,该类菌具有完整的呼吸酶系统,需要分子氧作为最后的受氢体,以完成呼吸作用,在无游离氧的环境中不能生长。2.兼性厌氧菌:在有氧或无氧环境中均能生长繁殖的微生物。在有氧(O2)或缺氧条件下,可通过不同的氧化方式获得能量。3.选择培养基:在基础培养基中加入抑菌剂,抑制非目的菌生长,选择性的促进目的就生长的培养基。4.鉴别培养基:在基础培养基中加入某些特定物质,用于测定细菌的生物反应,以鉴别和鉴定细菌的培养基。5.增菌培养基:适用于病原菌含量少的标本,培养基中一般含有抑制作用,提高标本含量较少的目的菌的检出率,多为液体培养基。6.复合培养基:又称半合成培养基,由部分天然产物和部分已知成分的化合物组成。7.“L”型细菌:细菌在青霉素.免疫血清.补体,胆汁或溶菌酶等因素作用下,细胞壁肽聚糖合成受阻,细胞壁缺损或完全丧失细胞壁缺陷型细菌,称之L型细菌。8.葡糖糖氧化/发酵实验:取2支葡糖糖培养管,置沸水中以驱逐培养基中的氧气,冷却后,均接种待检菌,一个开放管,暴露于空气,以检测氧化特征:另一管为封闭管,用灭菌的石蜡覆盖以隔绝空气,以检测发酵特性。若两管均不变色,则为产碱型。两管均产酸变为黄色为发酵型;封闭管不产酸,颜色不变,开放管产酸变黄为氧化型。9.间接凝集试验:将可溶性抗原先吸附于一种与免疫无关,一定大小的不溶性颗粒的表面,然后与相应的抗原(抗体)作用,在有电解质存在的适宜条件下,所发生的特异性凝集反应。10.协同凝集试验:该试验中的载体是一种金黄色葡萄球菌,此菌的细胞壁上含有葡萄球菌A蛋白(SPA),SPA能与人和大多数哺乳动物血清中IGG分子的FC片段结合,并将IGG分子Fab段暴露于葡萄球菌的表面,并保持器活性。当结合于葡萄球菌表面的抗体与相应抗原结合时,形成肉眼可见的小凝集块。11.最低抑菌浓度(MIC):稀释法所测得的某抗菌药物抑制待测菌肉眼可见生长的最低浓度。12.K—B试验:将含有一定量抗菌药物的纸片贴在已接种待测菌的琼脂平板表面纸片中的药物吸收琼脂的水分溶解后,不断向纸片周围琼脂中扩散,形成递减的浓度梯度。在纸片周围抑菌浓度范围内待测菌的生长被抑制,形成透明的抑菌圈。根据抑菌圈的大小可判断待测菌对被测定药物的敏感程度。13.α.β.γ溶血:即细菌在血平板上生长繁殖后,菌落周围有1—2mm宽的草绿色溶血环为α或甲型溶血,若菌周围有2-4mm邝的透明溶血环,称为β或乙型溶血:若周围无溶血环,则为γ或丙型溶血。14.ETEC(肠霉素型大肠埃希菌):在发展中国家引起儿童腹泻和旅行者腹泻,导致恶心,腹痛,低热以及急性发作的类似霍乱氧的大量腹泻,该菌产生耐热肠毒素和不耐热肠毒素。15.EHEC(肠出血型大肠埃希菌):又称产vero毒素大肠埃希菌,多为水源性或食源性感染,多由加热不充分的牛肉引起,牛肉在屠宰场因接触牛粪而受到污染。EHEC的致病因子主要是菌毛和vero毒素。16.肥大试验:用已知伤寒沙门菌O抗原和H抗原以及甲,乙和丙型副伤寒沙门菌H抗原与受检血清做试管或微孔定量凝集试验,以凝集的最高血清稀释度效价,测定受检血清中有无相应抗体及其效价的试验。17.OL群霍乱弧菌:凡能与OL群抗血清发生凝集的弧菌,称为OL群霍乱弧菌。18.神奈川现象试验:先将新制备的血琼脂平板放入温箱中烘干表面,以防细菌蔓延生长,用接种环取少量菌落在平板中央涂成1cm直径的涂面,35℃培养24-48h后观察,菌台周围出现无色透明溶血环者为阳性。19.细胞病变效应(CPE):多数病毒在细胞内增值,可引起细胞形态学改变,称为细胞病变效应。20.抗体结合试验:特异性病毒抗原和相适应的抗体结合形成免疫复合物后才能结合抗体。试验时先将已知的可溶性抗原(病毒)和待测的未知血清按要求混合后,若有相应的抗体存在,可形成抗原抗体复合物,加入抗体,抗体就与复合物结合。无游离抗体存在,然后再加入指示系统无溶血现象为阳性;反之,若待测标本中无特异性抗体存在,不能形成复合物,那么再加入指示系统后,抗体与指标系统结合,出现溶血现象为阴性。21.病毒血凝作用;有些病毒表面有血凝素,能和脊椎动物的红细胞融合,称为血凝现象。22.包涵体:有些病毒感染的细胞,在普通显微镜下可以观察胞质或胞核内出现大小,数目不等的嗜酸性或嗜碱性的,圆形,椭圆形或不规则形状的团块结构。23.抗体的效价:指抗体的物理状态及其在体内的滞留时间,亿其与抗原反应的多少来表示免疫效果称为抗体效价。24.微生物检验员:应用微生物学的理论,方法和技术,对医学,食品或药品领域进行质量检测和安全性评价的技术人员1.简述一种生化实验原理:1、葡萄糖的氧化发酵试验:根据细菌在分解葡萄糖的代谢过程中对氧分子需求的不同,可将待检菌分为两类:需要分子氧的氧化型和进行无氧酵解的发酵型。发酵型细菌无论在有氧或无氧环境中都能分解葡萄糖。2、β-半乳糖苷酶实验:有的细菌可产生β-半乳糖苷酶,能分解邻硝基酚B-半乳糖苷而释放黄色的邻硝基酚。3、甲基红试验:细菌分解葡萄糖形成丙酮酸,丙酮酸进一步分解形成甲酸、乙酸、乳酸等混合酸,使培养基PH下降至4.4一下,加入一下,加入甲基红指示剂变为红色。若产酸量少或进一步分解为醇、酮、醛等,使培养基PH在5.4以上,MR试验则呈橘黄色。4、乙酰甲基甲醇试验:有些细菌能使丙酮酸脱羧生成乙酰甲基甲醇,进而在碱性溶液中被空气中氧气氧化成双乙酰,双乙酰在α-奈酚和肌酸的催化下生成红色化合物为VP试验阳性。5、吲哚试验:有些细菌含有色氨酸酶,能分解培养基中的色氨酸产生吲哚,吲哚与对二甲基氨基苯甲醛作用,形成玫瑰吲哚而呈红色。6、硫化氢试验:有些细菌分解含硫氨基酸,生成硫化氢,硫化氢遇培养基中的酯酸或硫酸亚铁可形成黑色的硫化铅或硫化亚铁沉淀。7、尿素霉试验:某些细菌能产生尿素酶,分解尿素产氨,氨在溶液中形成碳酸铵,使培养基PH增高,与酚红指示剂显红色。8、苯丙氨酸脱氨酶试验:有些细菌能产生苯丙氨酸脱氨酶,是苯丙氨酸脱氨形成苯丙酮酸,后者遇10%氧化铁产生绿色化合物。9、过氧化氢酶试验:某些细胞分泌过氧化氢酶,使过氧化氢生成水和初生态氧,继而形成氧分子出现气泡。10、胆汁溶菌试验:胆盐、去氧胆酸钠和牛黄胆酸钠能选择性的溶解肺炎链球菌,其他链球菌则能耐受这些试剂。2.简述大肠杆菌、志贺菌、伤寒沙门菌初步鉴定指标及结果?答:(1)大肠杆菌:在肠道选择鉴别培养基上挑取疑为大肠杆菌的菌落,包括EMB上呈扁平、粉红色、有光泽;MAC上呈粉红色或红色;SS上为粉红色或中央粉红色,周围无色的菌落;XLD上呈不透明黄色菌落。常用KIA(A/A+-),MIV(++-),IMVIC(++--)来初步鉴定。(2)志贺菌:取EMB上呈无色或不透明的琥珀色;MAC上呈无色不透明;SS上呈不透明或透明;XLD呈红色菌落。常用:KIA(K/A--),MIV(-+/--),IMVIC(+/-,+,-,-)。CIT阴性,VRE阴性,MOT阴性,VP阴性作为初步鉴定。(3)沙门氏菌:取可疑菌落涂片染色,若为革兰阴性杆菌、触酶阴性、氧化酶阴性KIA(K/A,+/-,+),MIV(+--),IMVIC(-+-+)3.棋盘稀释法的判定方法,原理及特性。1原理:先测定两芍单药时各自的MIC值,再将各种稀释度的两芍混合,测定两药联合时各药的MIC值,比较两药联合时MIC值与其单独用药的MIC值,计算部分抑菌浓度指数(FIC);作为协同,相加,无关和拮抗的判断。2判定方法:FIC=甲药联合时MIC/甲药单独时MIC+乙药联合式MIC/乙药单独时MIC3特性:稀释时一般选择6个或6个以上稀释度,其中最高药物浓度是MIC的两倍。然后根据目的依次对各稀释为MIC的1/2,1/4,1/8,1/16等。FIC<0.5为协同作用,FIC在0.5-1为相加作用,1<FIC<2为无关作用;FIM>2为拮抗作用。4.简述金黄色葡萄球菌鉴定方法有哪些?答:先将可疑菌涂片,革兰染色后镜检,如为革兰阳性菌呈葡萄状排列,可初步判断为葡萄球菌。1:在血平板上金黄色葡萄球菌在菌周围有透明溶血环。2:血浆凝固酶试验阳性,金黄色葡萄球菌能产生结合型血浆凝固酶,玻片法会立即出现血浆凝固,还能产生游离型血浆凝固酶,试管法以37度水浴3-4小时后凝固。3:金黄色葡萄球菌能发酵甘露醇,所以在高盐甘露醇上能生长。4:耐热核酸酶试验:因金黄色葡萄球菌能产生耐热核酸酶,所以在过夜培养肉汤沸水浴后,将菌滴加到含有核酸额琼脂孔内,3h后环绕孔周落色琼脂变为粉红色既有此菌。5:SPA的检测:SPA能与免抗羊红细胞血清中的IgG的FC段结合,使洋红细胞发生凝集,A蛋白的存在是金黄色葡萄球菌的特征。5:A群链球菌的溶血素的种类及各自特性?答:根据对氧气的稳定性,分为链球菌溶血素O(SLO)和链球菌溶血素S(SLS)两种。1:SLO是一种含-SH基的蛋白质,对氧气敏感,-SH基可被氧化为-S-S-而失去溶血活性。对心肌有毒性作用,SLO抗原性强,测定SLO抗体的含量,可作为链球菌新近感染的指标之一或风湿热的辅助诊断。2:SLS对氧气稳定,链球菌在血平板上菌溶周围的溶血环是由SLS所致。SLS是一种小分子糖肽,无抗原性。对白细胞及多种组织有毒性作用。6.简述霍乱弧菌(血清型/生物型分型原理)的鉴别要点。答:①初步鉴定:取可疑菌落做氧化酶试验,若为阳性,可用O1群多价抗血清和O139群抗血清做玻片凝集试验,若为阴性,用结合菌体形态及动力特征,可初步判断为霍乱弧菌。②生化鉴定:常用于霍乱弧菌鉴定的生化试验有氧化酶试验、吲哚试验、霍乱红试验及黏丝试验,若为阳性,则为霍乱弧菌。③血清学分类:根据菌株是否含有A、B、C因子进行分类,用玻片凝集试验,若含有AB因子为小川型,AC因子为稻叶型,含ABC因子为彦岛型。④生物型分类:根据生物学上的差异,分为古典生物型和El—Tor生物型。鉴别试验有:溶解羊红细胞试验、鸡红细胞凝集试验、VP试验等。古典生物型试验结果均为阴性,而El—Tor生物型均为阳性。7.简述流感病毒微生物检验流程。答:①收集急性期或发病早期的临床标本,加抗生素,接种,将病毒接种到小鼠适当部位,培育2—14天,观察小鼠是否发病或死亡,若有则说明有病毒存在,进行进一步鉴定,鉴定试验有:抗体结合试验(CF)、血凝抑制反应(HI)、中和试验(NT)。②将处理后标本接种到鸡胚中,孵育6—8天,收获尿囊液与羊膜腔液体进行红细胞血凝试验,若为β阴性再传代,若为阳性,则进一步鉴定,CF、HI、NF试验,进一步确认病毒种类。③将处理后的标本进行细胞培养,1—14天,检查细胞感染症状,是否出现细胞病变。若有应进一步鉴定,NT、HI试验;红细胞吸附试验,若为阳性,则再进行NT、HI试验;是否出现空斑,若有再进行NT试验;观察细胞是否含有包涵体,若有进行NT、染色进一步观察;进行形态学观察,电镜或免疫电镜观察。8.科赫病原体确定的四个要点?答:⑴在每一病例中都出现相同的微生物,且在健康者体内不存在;⑵要从寄主分离出这样的微生物并在培养基中得到纯培养;⑶用这种微生物的纯培养接种健康而敏感的寄主,同样的疾病会重复发生;⑷从试验发病的寄主中能再度分离,培养出这种微生物来。如果进行上述4个步骤,并得到确定的证明,就可以确认该微生物即为该病害的病原体。菌论述题:1.论述肺炎链球菌的检验鉴定程序和那结果判定。(1)直接镜检:出血液外,痰,脓液,脑脊液等均可作直接涂片,革兰氏镜检。如发现革兰氏阳性矛头状双球菌,周围有较宽的透明区,经荚膜染色确认后可初步判断疑为肺炎链球菌。(2)荚膜肿胀试验:作为肺炎链球菌的快速诊断,当直接镜检后疑似肺炎球菌时,可取痰液,脓液或脑脊液标本置业玻片上,加少量未稀释的肺炎球菌多价抗血清混合。再加少量亚甲蓝然液混合,油镜检差,如遇同型免疫血清。则肺炎球菌荚膜出现肿胀,菌体周围有一无色二宽的环状物,菌被染成蓝色,则判定为肺炎链球菌存在。(3)分离培养:血液,脑脊液需增菌培养,经葡糖糖硫酸镁肉汤增菌后,呈均匀浑浊生长,且有绿色荧光,痰液,脓液可直接接种于血平板上,置5