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试卷第1页，总6页微生物的实验室培养班级姓名1．下列有关微生物实验室培养的叙述,正确的是（）A．在熔化琼脂时,需要控制火力并不断搅拌,以免发生焦糊B．灼烧、高压蒸汽灭菌、紫外线照射等都属于无菌技术C．样品中活菌数量统计时,接种方法应采用划线法D．用平板培养基培养微生物时,应将平板倒过来放置2．一位同学要探究土壤微生物能否分解农药，并尽快得出实验结论，用“敌草隆”（一种除草剂）进行实验：取等量砂土分装于相同的两个容器中，a组高压灭菌，b组不灭菌。下列有关事项的叙述中正确的是（）A．向a、b中喷入等量的“敌草隆”，再置于同一恒温箱中培养相同时间B．检测“敌草隆”的消失情况，预计a的“敌草隆”全部消失，b的基本不变C．只用砂土实验效果比用几种典型土壤混合后的好D．再增加c组作为对照，不喷入“敌草隆”，其他处理与a、b组相同3．做“微生物的分离与培养”实验时,下列叙述正确的是（）A．高压灭菌加热结束时,立即开启锅盖，拿出培养基和工具待用B．倒平板时,应将打开的皿盖放到一边,以免培养基溅到皿盖上C．为了防止污染,接种环经火焰灭菌后应趁热快速挑取菌落D．用记号笔标记培养皿中菌落时,应标记在皿底上4．甲、乙、丙是三种微生物，下表I、Ⅱ、Ⅲ是用来培养微生物的三种培养基。甲、乙、丙都能在Ⅲ中正常生长繁殖；甲能在I中正常生长繁殖，而乙和丙都不能；乙能在Ⅱ中正常生长繁殖，甲、丙都不能。下列说法正确的是（）粉状硫10gK2HPO44gFeS040．5g蔗糖10g（NH4）2SO0．4gH20100mlMgS049．25gCaCl20．5gI++++-+++Ⅱ+++-++++Ⅲ++++++++A．甲、乙、丙都是异养微生物B．甲、乙都是自养微生物、丙是异养微生物C．甲是异养微生物、乙是固氮微生物、丙是自养微生物D．甲是固氮微生物、乙是自养微生物、丙是异养微生物5．培养基、培养皿、接种环、实验操作者的双手、空气、牛奶所采用的灭菌、消毒方试卷第2页，总6页法依次是（）①化学消毒②灼烧灭菌③干热灭菌④紫外线灭菌⑤高压蒸汽灭菌⑥巴氏消毒法A．⑤③②①④⑥B．①②③④⑤⑥C．⑥②③④①⑤D．③④②①⑥⑤6．细菌培养基的配制过程中，下列操作不正确的是()A．在培养基分装完毕后把pH调节到5.4～6.0为宜B．培养基中的牛肉膏可以为细菌提供碳源、氮源、磷酸盐和维生素C．培养基配置的步骤是计算、称量、溶化、灭菌、倒平板D．琼脂是一种从红藻中提取的多糖，常作为凝固剂7．MS培养基和培养微生物所配制的培养基的主要区别为（）A．MS培养基一般含植物激素，微生物培养基不含植物激素B．MS培养基不需要氨基酸，微生物培养基含各种氨基酸C．MS培养基不需要碳源，微生物培养基含碳源D．MS培养基含维生素B1和维生素B6，微生物培养基不含有8．不同微生物对营养物质的需要各不相同。下列有关一种以CO2为唯一碳源的自养微生物营养的描述中不正确的是（）A．氮源物质为该微生物提供必要的氮素B．该碳源物质也是该微生物的能源物质C．无机盐是该微生物不可缺少的营养物质D．水是该微生物的营养要素之一9．下列有关平板划线接种法的操作错误的是（）A．将接种环放在火焰上灼烧B．将已冷却的接种环伸入菌液中蘸取一环液C．蘸取菌液和划线要在火焰旁进行D．划线时要将最后一区的划线与第一区的划线相连10．稀释涂布平板法是微生物培养中的一种常用的接种方法。下列相关叙述错误的是A．操作中需要将菌液进行一系列的浓度梯度稀释B．需将不同稀释浓度的菌液分别涂布到固体培养基表面C．不同浓度的菌液均可在培养基表面形成单个的菌落D．操作过程中对培养基和涂布器等均需进行严格灭菌处理试卷第3页，总6页11．用平板划线法或稀释涂布平板法纯化大肠杆菌时①都需要用固体培养基②都需要使用接种针进行接种③都需要在火焰旁进行接种④都可以用菌落数来计数活菌A．①②B．①③C．②④D．③④12．培养甲型H1N1病毒时，应选用A．无菌的牛肉汤B．含多种无机盐的培养液C．固体培养基D．适宜温度和湿度条件下的活鸡胚13．如图是微生物平板划线示意图。划线的顺序为12345。下列操作方法正确的是（）A．操作前要将接种环放在火焰边灼烧灭菌B．划线操作应在火焰上进行C．在5区域中才可以得到所需菌落D．在12345区域中划线前后都要对接种环灭菌14．关于制备牛肉膏蛋白胨固体培养基的叙述错误的是（）A．操作顺序为计算、称量、溶化、倒平板、灭菌B．将称好的牛肉膏连同称量纸一同放入烧杯C．等培养基冷却至50℃左右时进行倒平板D．待平板冷却凝固5～10min后将平板倒过来放置15．由于酵母菌直接利用淀粉的能力很弱，有人将地衣芽孢杆菌的α-淀粉酶基因转入酵母菌中经筛选得到了可高效利用淀粉的工程酵母菌菌种（过程如图甲所示）。试卷第4页，总6页（1）图甲中，过程①需要的酶有___________。为达到筛选目的，平板内的固体培养基应以__________作为唯一碳源。②、③过程需要重复几次，目的是_______。（2）某同学尝试过程③的操作，其中一个平板经培养后的菌落分布如图乙所示。该同学的接种方法是_____；推测该同学接种时可能的操作失误是________。该操作过程中需要对哪些实验器材进行灭菌（）A、玻璃刮铲B、接种针C、培养基D、工程酵母菌种E、酒精灯（3）对于实验结果分析正确的是：（）A．在培养基中添加碘液进行染色，菌落周围会出现透明圈，颜色较浅。B．可挑选透明圈较大的工程菌进行培养。C．在密闭和不密闭的情况下培养，酵母菌出现的透明圈大小不同。D．在实验条件适宜时，酵母菌进行孢子生殖，繁殖迅速。（4）以淀粉为原料，用工程酵母菌在适宜条件下密闭发酵，隔一段时间需要进行排气，其原因是_______。16．请回答下列有关微生物培养和分离的问题。（1）筛选石油分解菌一般要经过如下的步骤：海水取样→______→梯度稀释→将样品涂布到培养基上→挑选菌落，其中第二步的目的是______。（2）培养微生物时，获得纯洁培养物的关键是_________。为避免周围环境中微生物的污染，实验操作应在_________附近进行。采用固体平板培养细菌时，为防止冷凝水影响细菌的生长，需将培养皿____培养。（3）在菌种保藏时，对于我们频繁使用的菌种一般采用临时保藏的方法，但这种方法有两个缺点：__________________；_________________。（4）做完实验将培养基倒掉之前，一定要进行______处理。（5）现有5种酵母菌的营养缺陷型菌株1、2、3、4、5，它们不能合成生长所必需的物质G，已知A、B、C、D、E都是合成G物质的必需中间产物，但不知这些物质合成的顺序，于是在培养基中分别加入这几种物质并分析了这几种物质对各种营养缺陷型菌株生长的影响结果如下表所示。试卷第5页，总6页根据以上结果，推测这几种物质的合成顺序应是________________。17．生物柴油是一种可再生的清洁能源，其应用在一定程度上能够减缓人类对化石燃料的消耗，科学家发现，在微生物M产生的脂肪酶作用下，植物油与甲醇反应能够合成生物柴油（如下图）（1）用于生产生物柴油的植物油不易挥发，宜选用_______、_______方法从油料作物中提取。（2）筛选产脂肪酶的微生物M时，选择培养基中添加的植物油为微生物生长提供______，培养基灭菌采用的最适方法是________法。（3）测定培养液中微生物数量，可选用________法直接计数；从微生物M分离提取的脂肪酶通常需要检测________，以确定其应用价值；为降低生物柴油生产成本，可利用______技术使脂肪酶能够重复使用。（4）若需克隆脂肪酶基因，可应用耐热DNA聚合酶催化的__________技术。18．（10分）从自然菌样中筛选较理想生产菌种的一般步骤是：采集菌样→富集培养→纯种分离→性能测定。请回答筛选过程中的问题。（1）不同微生物的生存环境不同，获得理想微生物的第一步是从合适的环境采集菌样，然后再按一定的方法分离、纯化。培养噬盐菌的菌样应从的环境采集，培养厌氧菌的菌样应从的环境采集。（2）富集培养是指创设仅适应该条件的微生物旺盛生长的特定的环境条件，使待分离微生物在群落中的数量大大增加，从而实现从自然界中分离出所需的特定微生物的培养方法。对固氮菌富集培养的培养基应是培养基；对耐高温淀粉酶菌的富集培养应选择的培养基，并在条件下培养。（3）实验室最常用的灭菌方法是利用高温处理达到杀菌的效果。高温灭菌的原理是高试卷第6页，总6页温使微生物的等物质发生。在微生物研究和教学中应用最广、效果最好的湿热灭菌法是灭菌法。（4）下图中A、B是采用纯化微生物培养、用两种接种方法接种产生的效果图解，请分析接种的具体方法：AB获得图A效果的接种方法是；获得图B效果的接种方法是。本卷由系统自动生成，请仔细校对后使用，答案仅供参考。答案第1页，总7页参考答案1．ABD【解析】试题分析：琼脂属于多糖，在熔化琼脂时要控制火力并不断搅拌,以免发生焦糊，A项正确；灭菌和消毒都属于无菌技术，常用的灭菌方法主要有灼烧灭菌、干热灭菌和高压蒸汽灭菌，实验室可以用紫外线照射或化学药物进行消毒，B项正确；样品中活菌数量统计时,应用稀释涂布平板法进行接种,而不是用划线法，C项错误；用平板培养基培养微生物时,为防止冷凝水滴在培养基造成污染，需要将平板倒过来放置，D项正确。考点：本题考查微生物实验室培养的相关知识，意在考查学生能理解所学知识的要点，把握知识间的内在联系，形成知识网络结构的能力。2．A【解析】本实验的自变量的有无土壤微生物，而敌草隆的使用量和培养条件是无关变量，无关变量应保持一致且适宜，所以应向a、b中喷入等量敌草隆，再置于同一温箱中培养相同时间，A正确；B、a组土壤经过高压灭菌，不含微生物，不能将“敌草隆”分解，预计a的“敌草隆”基本不变，b组不灭菌，存在土壤微生物，可能将“敌草隆”分解，预计b的“敌草隆”含量减少，但不会全部消失，B错误；不同的土壤微生物的种类和数量不同，只用砂土实验效果不如几种典型土壤混合后的好，C错误；本实验是验证土壤中的微生物能对农药“敌草隆”具有分解作用，若不喷入“敌草隆”，则不能证明土壤中的微生物的此种作用，D错误。【考点定位】培养基对微生物的选择作用【名师点睛】解题思路：1、生物实验中的变量：实验过程中可以变化的因素称为变量；自变量：想研究且可人为改变的变量称为自变量；因变量：随着自变量的变化而变化的变量称为因变量；无关变量：在实验中，除了自变量外，实验过程中存在一些可变因素，能对实验结果造成影响，这些变量称为无关变量。2、分析题干可知，本题是通过实验探究土壤微生物能否分解农药，a组高压灭菌，没有微生物，b组不灭菌，存在土壤微生物，所以a组为实验组，b组为对照组。3．D【解析】高压灭菌加热结束，等待压力表指针回到零后，才能开启锅盖，不能打开放气阀使压力表指针回到零，A错误；倒平板过程中不能打开培养皿的皿盖，本卷由系统自动生成，请仔细校对后使用，答案仅供参考。答案第2页，总7页B错误；接种环火焰上灼烧后，待冷却后才可以快速挑取菌落，C错误；用记号笔标记培养皿中菌落时，应标记在皿底上，D正确。【考点定位】微生物的分离和培养【名师点睛】1、无菌操作，包括灭菌和消毒两种方式，消毒的方法有巴氏消毒法、酒精消毒、煮沸消毒法；灭菌的方法有干热灭菌、灼烧灭菌和高压蒸汽灭菌。2、微生物的接种：微生物接种的方法很多，最常用的是平板划线法和稀释涂布平板法，常用来统计样品活菌数目的方法是稀释涂布平板法。3、平板划线法：通过接种环在琼脂固体培养基表面连续划线的操作，将聚集的菌种逐步稀释分散到培养基表面。4．D【解析】从表中所列的三种培养基成分着手，培养基I中缺少氮源，培养基Ⅱ中缺少有机碳，培养基Ⅲ中营养成分最全．由题意中所给的情况分析，只有甲能在培养基I中生长，而乙、丙不能说明甲能自行固氮；乙能在Ⅱ中生长，说明乙可自行合成有机碳，是一种自养微生物；而丙只能在Ⅲ中生长，说明它既不能固氮也不能自行合成有机物．由此可知甲是固氮微生物、乙是自养微生物、丙是异养微生物。答案