急性肾功能衰竭及药物的影响Effectofdrugsonacuterenalfailuremodel(acuterenalfailure,ARF)(acuterenalinsufficiency,ARI)1.皮下注射氯化汞(HgCl2),复制兔急性中毒性肾功能衰竭模型。2.观测肾衰时,兔一般状态、尿常规、肾功能的指标及肾脏形态的变化,分析急性肾衰的发病机制。3.通过药物对尿量的影响,观察对急性肾衰兔的治疗效果,分析其可能的作用机制。【实验目的】——各种原因在短时间内(几小时至几周)引起肾脏泌尿功能急剧降低,以致机体内环境发生严重紊乱的综合症。表现:少尿,无尿,高钾血症,水中毒,代谢性酸中毒,氮质血症(肌酐、尿素、尿酸)广义的ARF包括肾前、肾性和肾后性三类;狭义ARF指急性肾小管坏死(acutetubularnecrosis,ATN)一.概念:急性肾功能衰竭(ARF)急性肾中毒血红蛋白肌红蛋白对肾小管的阻塞持续肾缺血肾性(器质性)急性肾衰竭肾实质病变肾小管坏死临床特点:少尿或无尿,尿钠浓度↑,血液尿素氮和血浆肌肝进行性升高,尿肌酐/血肌酐比10~15:1HgCL2损伤肾小管→ATN,肾小管上皮脱落堵塞肾小管,而导致的少尿或无尿;细胞碎片、细胞自溶、脱落,在尿中形成管型。RBC、WBC、蛋白尿。尿常规检查、血/尿肌酐、PSP排泄率、血尿素氮等评价肾功能。肌酐经肾小球滤过后不被肾小管重吸收,所以能反映肾小球的滤过率(GFR)。【实验原理】1.造模,提前24hr,给兔皮下注射0.3-0.4%HgCL21ml/kg,造成ARF模型。2.称重、麻醉、膀胱插管(插管前,先取膀胱尿液2ml,供尿常规、肌酐测定用)。3.尿常规检查(1)镜检细胞和管型(2)尿蛋白测定:取少量尿液于载玻片,加4%磺柳酸一滴,观察溶液浑浊程度。4.颈动脉插管,采血3ml,离心,分离血清。【实验方法和步骤】5.尿液、血液肌酐浓度测定取实验前留存的尿液上清液0.1ml和血清0.1ml,按肌酐试剂盒测定吸光值(A)6.实验治疗对尿量的影响(1)记录尿量。(2)快速iv注射NS20ml(3)缓慢iv20%葡萄糖5ml(4)iv多巴胺20μg/Kg(5)iv速尿5mg/kg7.肾形态学观察耳静脉注射10ml空气处死家兔,取出肾脏称重,计算肾/体重比。观察肾脏外形,色泽。纵向剖开,观察皮髓质条纹,色泽。称重、麻醉膀胱插管颈动脉插管留膀胱尿液取血约1ml生理盐水肌酐测定记录尿量治疗葡萄糖多巴胺速尿7.管型尿肾上皮细胞管型(renalepithelialcast):典型的上皮细胞呈瓦片状排列,充满管型,细胞大小不等,核形模糊,有时呈浅黄色。颗粒管型(granularcast)典型的上皮细胞呈瓦片状排列,充满管型,细胞大小不等,核形模糊,有时呈浅黄色。红细胞管型(redcellcast)管型中以红细胞为主体,外观略带黄褐色,可见到完整清晰、形态正常或异常的红细胞个体,易于识别白细胞管型(whitecellcast)管型内容物以白细胞为主,有时含有退化变性坏死的白细胞(或脓细胞),一般多为中性粒细胞。透明管型(hyalinecast)由T-H蛋白和少量清蛋白共同构成,也是各种管型的基本结构。血肌酐尿肌酐尿蛋白尿镜检肾/体重比μmol/L(mg/dl)RBCWBC管型尿急性肾功能衰竭各项指标的变化正常ARF急性肾衰实验性对尿量的影响治疗前NS20ml20%葡萄糖多巴胺速尿正常ARF思考题(1)HgCl2引起急性肾衰的机制?(2)肾功能的各指标有哪些?(3)判断ARF的主要指标是什么?(4)实验治疗项目的作用机制及意义?