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常见标本的采集海恩法则：德国飞机涡轮机的发明者德国人帕布斯-海恩提出一个在航空世界关于飞行的安全法则：每一起严重事故的背后，必然有29次轻微事故和300起未遂先兆以及1000起事故隐患。法则强调两点：一、事故的发生是量的积累的结果.二、再好的技术、再完美的规章在实际操作层面也无法取代人自身的素质和责任心.标本采集是病原学检测的第一步也是最关键的一步•无菌标本:区别污染细菌非无菌标本:区别定植细菌非无菌标本无菌标本痰血液咽拭子脑脊液尿液关节腔积液粪便胸腹水其他类别其他类别是指采集患者少许血液、排泄物、分泌物、呕吐物、体液和脱落细胞以及组织细胞等样本，通过物理、化学或实验室技术和方法进行检验，作为判断患者有无异常存在的依据。标本在一定程度上可反映机体正常的功能状态或病理变化。协助疾病明确诊断推测病程进展制定治疗措施观察病情采集前—遵照医嘱—充分准备:物品准备，病人准备，护士自身准备采集中—严格查对正确采集，:采集方法、量、时间准确、操作规范采集后—再次查对，及时送检血液标本采集尿标本采集大便标本采集痰标本采集咽拭子标本采集是临床最常用的检验项目之一毛细血管标本采集静脉血标本采集动脉血标本采集全血标本：血沉、血常规、凝血功能、血型、交叉合血、测定血液中某些物质含量血清标本：血清酶、脂类、电解质、肝功、两对半及某些免疫检查血培养标本：血液中的致病菌先采生化、凝血标本，再采血培养标本。———关于各种血液标本的采集顺序当使用多种试管时的采集顺序：1.血培养瓶2.不含添加剂的试管3.凝血管4.含添加剂的其他试管血培养→红头管→浅蓝头管→金黄头管→黑色→绿头管→紫头管→灰头管等。颜色临床用途采血量红色血清生化、相关免疫检查3-5ml绿色血浆生化、血流变、特殊检查2-3ml紫色血常规、全血试验、血流变2-3ml浅蓝凝血试验、、凝血因子试验2-3ml黑色手工、全自动血沉试验2-3ml空腹采血，提前告知病人禁食，特殊类采血应告知病人注意事项。生化指标禁食8-12小时后空腹采血，血脂禁食12-14小时后采血，血沉在早上10点前采血。根据目的选择标本容器，并计算所需采血量，填写患者相关信息全血标本试管加有抗凝剂，轻、慢、上下颠倒混匀6—8次肘部采血不能拍打患者前臂，结扎止血带时间少于1分钟血培养标本防止污染严禁在输液、输血肢体上抽取血标本，乳腺切除术后患者应在手术对侧手臂采血及时送检，送检途中禁忌过分震荡血培养概念:采集患者的血液或无菌体液标本,送至微生物实验室培养检测.检测原本无菌的血液及体液中是否有细菌存在.如有细菌,则极有可能为致病的细菌.进一步进行鉴定/药敏试验.血培养存在的主要问题：采血时机不合适采血套数不够采血量不足只做需氧培养，不同时做厌氧培养采血前或采血时正在使用抗生素治疗•如果皮肤定植的细菌没有被杀死，这些细菌将通过针头被吸入血培养瓶并在瓶中生长•这些细菌(主要为凝固酶阴性葡萄球菌)引起导管相关性败血症(住院患者血培养第一位)•医生不能将真的凝固酶葡萄球菌感染和皮肤定植菌“污染”相区分，因此他们用万古霉素治疗患者皮肤凝固酶阴性葡萄球菌定植于输液管“只有在发热时，才需要进行血培养。”————关于血培养指征想采就采血培养的指征当怀疑血流感染或脓毒症时，应常规行血培养怀疑患者有血流感染的症状有：不明原因的发烧(＞38℃)或体温过低(＜36℃)白细胞增多（＞10,000/L），粒细胞减少（＜1,000/L）休克，寒颤，僵直严重的局部感染(脑膜炎，心内膜炎，肺炎，肾盂肾炎，腹部术后感染，…)心率异常加快、低血压或高血压“何时采血进行血培养，有无特殊时间要求。”———关于采血时机尽可能在出现畏冷、寒战时立即采血尽可能在使用抗生素前，先立即采血“为减轻患者痛苦，只从一个穿刺部位采一份血液标本即可。”———关于采血套数及部位基本概念成人“一套”血培养应该包括需氧瓶和厌氧瓶各一个，也叫“一份”注意：一次穿刺采血，算“一套”，采集第二套应从另一个穿刺点获得。儿童一般只做需氧培养，但仍需从多个部位采集多次。特殊患者才考虑厌氧培养。研究表明，当每套血培养采血20ml时一套检出率：73.2%二套检出率：93.9%三套检出率：96.9%目前指南推荐采集2~3套血培养采集两套血培养(CLSI)从两个独立的皮肤位点采血，每瓶采集10ml，最好在5分钟内采集。“患者静脉中插有导管，可直接从导管采血。”———关于采血部位推荐从外周静脉采集血液标本。不推荐动脉血，因其诊断价值没有比静脉血更大。不推荐静脉留置导管，因其常伴有高污染率。如果必须从留置导管内采血，也应同时从外周静脉采集另外一个血培养标本以帮助阳性结果的判断。“每瓶采集多少血液有无特殊要求。”———关于采血量关于采集血液量采血量是影响最佳灵敏度最关键因素成人一份标本2个培养瓶（需氧＋厌氧），每瓶8－10ml，共20ml；要求至少采两份标本，即40ml。儿童一般只需采集需氧瓶，在保证采集血量＜1％总血量下，一般为1－3ml。采血量不足时应优先保证需氧瓶，因临床90％以上的感染为需氧菌或兼性需氧菌感染。———关于皮肤及培养瓶消毒皮肤消毒程序：•推荐使用碘酊、洗必泰或碘伏作为皮肤消毒剂。•碘酊作用1min•碘伏作用1.5-2min•洗必泰作用时间与碘酊一样（但不能用于少于2个月婴儿皮肤消毒）培养瓶的消毒程序：1.去掉培养瓶口的塑料瓶盖。2.75%酒精消毒血培养瓶橡皮塞子60秒。3.自然待干。4.将标本注入培养瓶内。5.颠倒混匀标本与肉汤，以避免血液凝集。“培养瓶未使用时，需要冷藏或冷冻。”———关于培养瓶的储存温度不需冷藏，更不能冷冻。保存在15－25℃的室温即可，温度过低会导致对温度敏感的耐瑟氏菌等死亡。关于未用培养瓶储存温度采集后的血培养瓶应在1小时之内送往实验室。血培养瓶在采血接种后在室温不超过4小时。目的：常用于血液气体分析部位：桡动脉穿刺点位于前臂掌侧腕关节上2cm，动脉搏动明显处股动脉腹股沟动脉搏动最明显处注意事项：1、采血前了解病人诊断，经血传染的传染病患者操作人员做好隔离防护措施。2、采血前做好解释工作，活动后喘气明显者应休息15-30分，避免紧张、恐惧、活动时采血，否则影响检验结果的准确性。3、吸痰后20分钟方可采集血气标本。4、严格无菌技术操作，以防感染。尿标本采集一般原则1.应采集晨起第一次尿。2.原则上应选在抗菌药物应用之前。3.连续多次送检可提高阳性检出率及确诊率。4.注意避免消毒剂污染标本5.30分钟内不能立即送检者，可暂存4℃冰箱，但保存不超过8h。6.女性在月经期不宜留取尿标本。分类目的尿常规标本检查尿液的色泽、透明度、比重、尿量、蛋白质、尿糖定性、细胞和管型尿培养标本做细菌培养及计数12或24小时尿标本检查一日尿量及尿液生化检查或浓缩检查结核杆菌分类操作要点尿常规标本清晨首次尿为好，留取1/3或1/2杯，月经期间不能留取尿标本尿培养标本留取中段尿30ml至无菌管送检12或24小时尿标本7pm排空膀胱后至次日7am，请病人将尿液排入便盆内，再置于2000-3000ml清洁带盖的广口瓶内，瓶内添加相应防腐剂尿培养标本清洁中段尿导尿管导尿经耻骨上皮肤穿刺采集膀胱内尿液清洁中段尿液弃去前段尿液，以冲刷尿道口的细菌，留取中段尿约10～20ml直接排入专用的无菌容器中，立即送检。疑为尿道炎时，可收集最初的3～4ml尿。详细告知病人以下操作步骤：女性病人收集标本前用清洗液冲洗干净，从前向后仔细擦洗尿道区域分开阴唇，开始排尿排出几毫升后，不停止尿流，采集中段尿。男性病人回缩包皮并清洗龟头排出几毫升后，不停止尿流，采集中段尿。导尿管尿液集尿袋内的尿液不能用作培养；导尿管末端的尿液也不能用于培养，因为很难避免没有尿道菌群污染。留置导管尿液标本常通过专门的采样端口采集，不能把导尿管与尿袋拔开后收集尿液。采样端口用酒精消毒；必要时，可先夹住导尿管但不能超过30分钟；将注射器针头插入采样端口，抽吸出尿液；注入无菌杯或试管中耻骨上穿刺吸取尿液常用于患儿、泌尿道厌氧菌感染或脊柱损伤病人等。可避免尿道或会阴细菌的污染，但对膀胱内少量尿液的小儿难以实施。方法：消毒自脐以下至尿道之间区域的皮肤，局麻穿刺点部位；在耻骨联合与脐连线上，高于耻骨联合2cm处进针刺入膀胱；取20ml尿液；置于无菌容器中并送往实验室。可用于厌氧菌检测三、大便标本采集1.采集时间：腹泻患者应在用药前、急性期采集；沙门菌感染、肠热症应在2周内采集；厌氧菌出现症状立即采集。2.采集方法：①直肠拭子法：用无菌拭子蘸生理盐水湿润，由肛门插入约6～7cm，轻轻在直肠内旋动取出大便少许，放入无菌便盒中，加盖封口送检。②自然排便者可用小木棒挑取有脓血和黏液的部位的粪便2-3克，如液状粪便取絮状物盛于无菌的、密封的、不吸水的、容器内或直接盛于增菌液或保存液中。3.注意事项：虽然粪便标本本身含很多细菌但也要用无菌容器，不可混入尿液，采集时挑取粘液或脓血部分。在患者病情许可的条件下应在用药前采集标本。厌氧细菌（难辩梭菌）培养的标本应尽量减少与空气接触。做便隐血实验：检查前三天禁食肉类、肝类、血类及大量绿叶素的食物，禁服铁剂，如已食用应三天后留取标本送检。检查阿米巴原虫应在采集前将容器加温、便后立即送检。检查绕虫卵应取透明薄膜纸于夜晚12时左右或清晨，排便前由肛门口周围拭取，并立即送检。四、痰标本采集唾液中口咽部定植菌的浓度可达108-109/ml。研究显示，国内常规痰标本中约半数存在唾液严重污染现象。咳痰途经口咽部不可避免地受到污染我国痰细菌培养现状标本送检率低苛养菌检出率极低结果重复性差报告速度慢感染菌与污染菌不易区分药敏结果与治疗反应存在差距医师或护士直视下采集标本自然采集法患者清晨起床后，用清水充分漱口后，用力自气管深部咳出第一口痰，不可混入唾液、漱口液，鼻涕等。雾化采集法对于无痰或少痰患者，可雾化吸入45℃的10%NaCl水溶液。支气管镜采集法培养结果可靠痰标本采集24h痰标本采集晨起漱口后第一口痰至次晨漱口后第一口痰止临床上约半数咳痰标本不合格！痰标本采集采集痰标本注意事项在抗生素使用前采集痰标本;标本采集后1～2h内必须立即进行实验室处理咳痰标本应用最早且广泛，但也是最受争议的标本取标本前应摘去牙托，清洁口腔如刷牙和漱口深咳，采集标本过程中要有专业的医务人员指导无痰可用10％NaCl5ml雾吸约5min导痰也可用物理疗法、体位引流、鼻导管抽吸等法取痰痰培养的运送和保存尽快（2h）送至实验室。如不能及时送达，应将标本暂存于4℃冰箱，但放置时间不可超过24h。厌氧培养标本的最佳运送时间取决于标本量。被口咽部菌群污染的标本如咳痰等不可用于厌氧菌培养。谢谢