实验二家畜睾丸和卵巢的组织学观察

实验二、家畜睾丸和卵巢的组织学观察（睾丸、卵巢组织学及精子发生、卵泡发育过程的观察）一、目的和要求通过家畜睾丸、卵巢组织切片观察，了解家畜睾丸、卵巢的组织结构及其形态。了解精子的发生和卵子的发生、卵泡的发育过程及其形态。二、材料和方法（一）材料、仪器1、睾丸、卵巢组织切片。2．显微镜、幻灯机或投影仪。（二）方法先结合投影或挂图进行讲解，对睾丸、卵巢组织学结构及精子发生、卵泡发育过程有了初步的了解。然后再用显微镜进行睾丸、卵巢组织切片的观察。三、内容、观察步骤（一）公畜睾丸的组织学观察1．低倍镜观察（1）被膜（2）睾丸纵隔和中隔（3）睾丸小叶：2．高倍镜观察：（1）睾丸小叶的结构（2）间质细胞（3）曲精细管的结构（4）足细胞（5）生精细胞（生殖细胞）3．精子发生过程（spermatogenesis）可分为两个明显的时期。第一时期：精细胞生成：精原细胞经一系列分裂形成精子细胞。第二时期：精子形成（spermiogenesis）：精子细胞变形成为精子。（二）母畜卵巢的组织学观察1．低倍镜观察在低倍镜下找出卵巢表面上皮和白膜，区分卵巢的皮质部和髓质部。（1）表面上皮（2）白膜（3）皮质部（4）髓质部2．高倍镜观察（1）卵泡发育的观察每个卵泡都由位于中央的卵母细胞和围绕在卵母细胞周围的卵泡细胞所组成。有的卵泡在发育过程中可能退化而形成闭锁卵泡。卵泡可根据发育程度不同而分成下列各期。1）原始卵泡2）初级卵泡3）次级卵泡4）三级卵泡5）成熟卵泡6）闭锁卵泡（2）黄体是排卵后的卵泡转变成的富于血管的内分泌器官。牛、羊、猪的黄体位于卵巢皮质浅层突出于表面。马的黄体则完全埋藏在卵巢深部。根据黄体发育阶段而分成下列各期。1）血体期2）血管增生期3）成熟期4）白体期四、作业：1．绘出并注明睾丸曲精细管及其所含细胞的构造图。2．绘出并注明卵巢组织结构及卵泡发育各阶段示意图。认真观察的内容：（一）雄性动物睾丸的组织学观察：1、低倍镜观察：（1）被膜：由浆膜和白膜构成。外层膜为一层较薄的固有鞘膜，内层白膜为较厚的致密结缔组织构成。（2）纵隔和中隔：纵隔为由睾丸的一端伸向睾丸实质的结缔组织索，并向四周发出许多放射状的结缔组织小梁直达白膜，形成中隔。（3）小叶：由中隔将睾丸实质分成许多基部向外，顶端向内的锥形小叶，每个小叶由2-3条盘曲的精细管组成。精细管之间有疏松的结缔组织，内含有血管和间质细胞。（4）附睾：由精细管汇合成的直精细管，穿入睾丸纵隔的结缔组织，形成弯曲的睾丸网，睾丸网又分出10-20条睾丸输出管形成附睾，附睾头也由结缔组织分成若干附睾小叶，各附睾小叶的管子汇成附睾管，经附睾体，附睾尾最后过渡为输精管。2、高倍镜观察：从睾丸小叶中仔细观察精细管及间质细胞的结构和形态。精细管的管壁的外向由结缔组织、基膜和复层的生殖上皮构成。生殖上皮又由生精细胞和支持细胞组成。仔细观察精子发生周期中主要阶段和支持细胞形态：（1）支持细胞：又称足细胞和塞托利氏细胞。为高柱状或锥状细胞。从基膜一直伸达精细管的管腔，该细胞高低不等，界限不清，细胞核较大位于细胞基部，着色浅，核仁明显。支持细胞的游离端常嵌含有许多精子，其侧面嵌含各个发育阶段的生精细胞，并对生精细胞起支持、营养、保护、促使其发育的作用。（2）精原细胞：是精子形成过程的干细胞，位于基膜，细胞为多边形或圆形，核大而圆，染色较深。仔细观察A、B、中间型三类。（3）初级精母细胞：由精原细胞分裂而成，位于精原细胞内侧，排列成几层，细胞呈圆形，体积较大，着色深，经第一次成熟分裂形成二个次级精母细胞。（4）次级精母细胞：由初级精母细胞分裂而成，位于初级精母细胞内侧，细胞体积较小，呈圆形，细胞核为球形，染色质呈细粒状，不见核仁，由于其存在时间很短，很快经过第二次成熟分裂成为二个精子细胞，因而在切片上很难找到。（5）精子细胞：由次级精母细胞分裂而成，位于精母细胞内侧，靠近细管的管腔，排成数层，细胞呈圆形，体积更小，核小呈球状，染色深，核仁清晰。精子细胞不再分裂，在支持细胞顶部经过变态过程成为精子。（6）精子：由精子细胞变态形成，位于精细管的管腔内，刚形成的精子头部常深入支持细胞游离端，尾部朝管腔，随着精子发育成熟，便脱离支持细胞，游离在管腔内，精子分头、颈、尾三部分，形似蝌蚪，头部多呈扁卵圆形，染色深。（7）附睾管：管壁由环形平滑肌纤维和假复层柱状纤毛细胞和基底细胞组成，柱状细胞有分泌作用，基底细胞紧贴基膜，外形为圆形或卵圆形，染色较浅，核呈球形，精子在附睾管内借助分泌液，纤毛运动和管壁蠕动来运行。（二）雌性动物卵巢的组织学观察：卵巢的组织由被膜、皮质和髓质组成。1、低倍镜观察：（1）被膜：卵巢表面由特殊的生殖上皮被覆，生殖上皮多为单层立方形细胞组成。生殖上皮下面有一层致密结缔组织形成的白膜。（2）皮质：位于卵巢的外周，占大部分，与髓质无明显界限，由许多不同发育期的卵泡和少量黄体等组成。（3）髓质：位于卵巢的中央（马属动物例外），由富有弹性纤维的疏松结缔组织构成。内有大量的血管、淋巴管和少量平滑肌纤维。2、高倍镜观察：主要观察卵巢皮质部不同发育阶段的卵泡，每个卵泡都由位于中央的卵母细胞和围绕在卵母细胞周围的卵泡细胞组成。（1）原始卵泡：位于生殖上皮层内，中间为一卵原细胞，周围由一层扁平卵泡细胞所围绕。（2）初级卵泡：卵泡呈球形，卵原细胞位于卵泡中央，周围包有一层立方或柱状的卵泡细胞。卵原细胞的体积较大，中央有个圆形的泡状核，核内染色质较少，着色较浅，核仁明显。（3）次级卵泡：其主要变化是卵原细胞体积增大，卵母细胞和颗粒细胞共同分泌出粘多糖，聚集在颗粒细胞与卵黄膜之间形成透明带。（4）三级卵泡：出现小的卵泡腔，随着卵泡的生长，许多小腔合并为一个大的卵泡腔；卵母细胞被挤向一边，并包裹在一团颗粒细胞中，形成半岛突出在卵泡腔内，称卵丘；在颗粒层外周形成两层卵泡膜；卵的透明带周围的柱状上皮细胞呈放射状排列，称为放射冠，放射冠细胞有微绒毛，并伸入透明带内。（5）成熟卵泡：三级卵泡继续生长，卵泡液增多，卵泡腔增大，卵泡扩展到整个皮质部而突出卵巢表面。（6）黄体：是排卵后的卵泡转变成的富于血管的内分泌器官，牛、羊、猪的黄体位于卵巢皮质，突出于卵巢表面，马的黄体则完全埋藏在卵巢基质内。黄体由颗粒黄体细胞和泡膜黄体细胞组成，颗粒黄体细胞占多数，大部分位于黄体中间，细胞呈多面体，着色浅，排列紧密，含有球形细胞核；泡膜黄体细胞则小，大部分位于黄体外周，包在颗粒黄体细胞外周或位于其之间，核占胞体的大部分，核与胞质染色较深。（7）闭锁卵泡：卵巢内在各个发育阶段逐渐退化的卵泡叫闭锁卵泡，即退化的卵母细胞存在于未破裂的卵泡中，可观察到萎缩的卵母细胞和膨胀塌陷的透明带。