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实验动物的生物安全及动物福利中山大学实验动物中心郭中敏110822416@qq.cn内容一、实验动物生物安全（一)引言1.实验动物2.实验动物生物安全3.实验动物生物安全的重要性（二）实验动物生物安全的条件与保障1.国家、地方法律、法规2.合格的实验动物与设施3.严格、标准化的操作4.废弃物的正确处理5.常见的人畜共患病二、实验动物福利（一)引言实验动物：指经人工饲养、繁育，对其携带的微生物和寄生虫实行控制，遗传背景明确或者来源清楚，用于科学研究、医药、教学、生产和检测鉴定以及其他科学实验的动物。如大鼠、小鼠、裸鼠、豚鼠、家兔、比格犬、恒河猴、小型猪、沙鼠等。实验用动物包括：实验动物，野生动物，经济动物。如牛、羊、猫、未实验动物化的土种狗等。动物实验：是指以实验动物为对象和材料，在设计好的符合相应条件要求的环境下进行实验或者检测，观察、记录动物的反应情况和结果的过程。一、实验动物生物安全KM小鼠C57小鼠裸鼠SD大鼠新西兰兔Hartely豚鼠一、实验动物生物安全我国实验动物以及环境设施规模和质量不断扩大和提升，实验动物进出口越来越频繁，新品系不断引进，使得我国实验动物资源日趋丰富。实验动物在生产、使用过程中，存在感染、繁殖病原体的可能以同时也存在向环境扩散病原微生物的危险，对人和环境都有可能造成生物安全危害。一、实验动物生物安全•1941年美国发生74例实验室相关的吸入性布氏杆菌感染事故•1960’s中国相继发生三起布病实验室感染•1976年英国某医学实验室的工作人员体检时发现结核菌感染者比其他人员高5倍•2004年新加坡、中国台湾、中国CDCSARS实验室感染事故一、实验动物生物安全•1999年北京某实验室曾发生实验人员感染流行性出血热事件。事件起因就是操作人员被携带病毒的实验动物抓咬伤而受感染引起的。一、实验动物生物安全一、实验动物生物安全•2006年长春市某高校中药系实验室发生学生感染流行性出血热事件，76名学生中有10名学生受感染。整个事件起因也是由于实验操作过程中被动物抓咬伤而造成的。一、实验动物生物安全•2010年12月东北农业大学畜禽生产教育班30名学生进行“羊活体解剖学实验”后，28人感染布鲁氏菌病，症状为关节疼痛、全身乏力、流产等，严重者生活不能自理。2011年10月，黑龙江省飞鹤甘南欧美养殖有限公司，几十名工人，上千头牛陆续染感染布鲁氏杆菌传染病。一、实验动物生物安全实验动物生物安全问题已引起国、内外高度重视。2001年我国实施新版《实验动物国家标准》，其中规定：实验用大小鼠的等级提高到SPF级。取消普通级。•2004年《北京市实验动物管理条例》，修改和增加了实验动物生物安全方面内容，•2006年第二届北京实验动物科学国际论坛上，日本国立大学生物安全委员会委员长佐藤浩教授提出，生物安全已成为实验动物研究中不容忽视的重要因素。•实验动物生物安全:是对实验动物可能产生的潜在风险或现实危害进行防范和控制。•由实验动物造成的各种风险和危害包括：生产和使用实验动物中的各个环节，如实验动物的引种、保种、繁育、运输、进出口，使用实验动物(包括感染和非感染实验动物)进行动物实验、从事科研活动等过程中实验动物都有可能造成各种危害。一、实验动物生物安全一、实验动物生物安全•动物实验造成的生物危害，已引起微生物学、生物医学等相关学科工作者的极大关注。•动物性气溶胶和人兽共患病是形成动物实验生物危害的重要因素。•在制定防护生物危害的生物安全措施上应包括实验室规程的制定、实验设备的设置(一次隔离)、实验设施的规划(二次隔离)、个人防护用品的准备、感染动物的饲养和管理以及生物危害的评估等方面。（二）实验动物生物安全的条件与保障•国家、地方法律、法规•合格的实验动物与和符合标准的设施•生产和实验中严格进行标准化的操作•废弃物的正确处理•常见人畜共患病•实验动物生物安全应急预案一、实验动物生物安全国家或地方实验动物主要法规、标准1、国家《实验动物管理条例》（1988）2、《实验动物质量管理办法》（修订版）（2001）3、《实验动物许可证管理办法（试行）》（国家：2001、广东省：2002）4、《实验动物种子中心管理办法》5、《省级实验动物质量检测机构技术审查准则》6、国家GB14925—2010(2011.10.01)国家和地方实验动物主要法规、标准•7.《广东省实验动物管理条例》2010年6月2号通过；2010年10月1号执行•第四章：生物安全与实验动物福利•第二十二条实验动物发生传染性疾病时，从事实验动物生产、使用的单位和个人应当及时采取隔离、预防控制措施，防止动物疫情扩散，同时报告当地畜牧兽医主管部门、动物防疫监督机构；当发生人畜共患病时，还应当立即报告当地疾病预防控制机构。国家或地方实验动物主要法规、标准1《实验动物微生物等级及监测》2《实验动物寄生虫等级及监测》3《实验动物环境及设施》4《哺乳类实验动物的遗传质量控制》5《实验动物配合饲料通用质量标准》6《实验动物配合饲料卫生标准》国家或地方实验动物主要法规、标准实验动物生产许可证实验动物使用许可证国家或地方实验动物主要法规、标准国家或地方实验动物主要法规、标准实验动物分为四级：一级为普通级（cv）；二级为清洁级（cl）；三级为无特定病原体（SPF）级；四级为无菌级（包括悉生动物）。目前比格犬、恒河猴、小型猪等大动物多为普通级，大、小鼠均为清洁级以上，豚鼠、家兔等有普通级、清洁级、SPF级。国际上将实验动物分为三个级别；SPF级以上动物种群来源于剖腹产动物，微生物、寄生虫是按国标严格控制。实验动物设施分为三级：一是普通环境（洁净度8级、10万）；二为屏障环境（洁净度7级、万级）；三为隔离环境（洁净度5级、百级）。实验动物及其设施的等级•隔离系统(Insulationsystem)是以隔离器(Isolator)为主体及其附属装置组成的饲养系统。用作饲养无菌动物和已知菌动物。分正、负压隔离器。•屏障系统(Barriersystem)这是清洁级、SPF级动物生产或实验的设施。人、实验动物、饲料、饮水、垫料、空气及其它物品均需进行严格的微生物控制。人流、物流及动物流要分开。•开放系统(Opensystem)只能进行普通级实验动物的生产与实验。实验动物及其设施的等级隔离环境•以隔离器(Isolator)为主体及其附属装置组成的饲养系统。用作饲养无菌动物和已知菌动物。洁净度达到5或7级。实验动物及其设施的等级•隔离环境动物设施主要指标•洁净度：5或7级（空气三级过滤后，加隔离器）•温度：20-26℃;日温差：≤4℃•相对湿度：40-70%;静压差：≥50Pa•换气次数：≥20次/h；气流速度：≤0.2m/s•落下菌数：≤0个/皿;氨浓度：≤14mg/m3•工作照度：≥200/lx;噪音：≤60dB(A)实验动物及其设施的等级屏障环境主要用于进行SPF级、清洁级的大鼠、小鼠等小动物实验（配备饲养室及操作室）。洁净走廊SPF动物实验室实验动物及其设施的等级•屏障环境（正压）动物设施主要指标•洁净度：7级（空气经过初、中、高效三级过滤）•温度:20-26℃；日温差：≤4℃•相对湿度：40-70%；静压差：≥10Pa•换气次数：≥15次/h；气流速度：≤0.2m/s•落下菌数：≤3个/皿;氨浓度：≤14mg/m3•工作照度：≥200/lx;噪音：≤60dB(A)实验动物及其设施的等级屏障环境动物实验设施设备实验动物及其设施的等级屏障环境动物实验设施设备实验动物及其设施的等级动物生物安全实验室和生物安全实验室一样，主要根据所研究病原微生物的危害评估结果和危害程度分类将动物生物安全实验室划分为四级：动物生物安全实验室一级(ABSL-1)动物生物安全实验室二级(ABSL-2)动物生物安全实验室三级(ABSL-3)动物生物安全实验室四级(ABSL-4)涉及传染性、中毒性、放射性、致癌性、致突致畸及致死性实验等应在有特殊要求的生物安全实验室（负压）中进行，根据生物安全防护要求进行建筑，按照有关规定执行。实验动物及其设施的等级实验动物及其动物实验的操作实验动物使用的生物安全：动物及饲养要求:1、引进动物进行实验必须具备实验动物质量合格证,隔离检疫一周，无异常时方进行实验。2、坚持卫生消毒制度：定期对动物房舍和饲养用具进行消毒（消毒方法及消毒剂交替使用）。3、饲养管理人员要定期做健康检查。实验操作要求：动物实验人员实验操作过程中做好防护，穿戴好工作衣、帽、口罩、手套;严格按标准操作规程进行。实验动物及其动物实验的操作•SPF级动物实验室的管理责任•SPF级动物实验室工作人员职责•SPF级动物实验室工作人员职责•SPF级动物实验室人员进出的标准操作规程•SPF级动物实验室物品进出的标准操作规程•SPF级动物实验室动物进出的标准操作规程•使用SPF级动物实验室的标准操作规程屏障环境标准操作规程实验动物及其动物实验的操作•SPF级实验动物购买的标准操作规程•SPF级实验动物接收和检疫的标准操作规程•SPF级动物实验室实验动物饲料、饮水、垫料管理的标准操作规程•SPF级实验动物抓取和保定的标准操作规程•SPF级实验动物逃脱处理的标准操作规程•SPF级实验动物死亡和伤病处理的标准操作规程•高压蒸汽灭菌器使用与维护的标准操作规程•传递窗使用与维护的标准操作规程•渡槽使用与维护的标准操作规程屏障环境标准操作规程实验动物及其动物实验的操作•不同品种、不同等级和互有干扰的动物实验，不得在同一实验间进行饲养，同一来源、相同品种、品系而用于不同实验目的动物实验饲养，也不得在同一实验间进行。•不得将普通级动物带进屏障环境中进行实验，如将实验动物带离屏障环境进行实验，不得再带回屏障环境中进行饲养、实验。实验动物及其动物实验的操作在进行实验时，为了不损伤动物的健康，不影响观察指标，并防止被动物咬伤，首先要限制动物的活动，使动物处于安静状态，抓取动物前，必须对各种动物的一般习性有所了解。操作时要小心仔细、大胆敏捷、熟练准确、工作人员必须掌握合理的抓取固定方法。实验动物及其动物实验的操作实验小鼠的抓取•实验动物及其动物实验的操作实验兔的抓取与给药•实验动物及其动物实验的操作豚鼠的抓取实验动物及其动物实验的操作实验狗的抓取与固定•实验动物及其动物实验的操作实验动物误伤的处理•实验动物咬伤救治在伤口上方扎止血带，然后用消毒液冲洗伤口。•如被实验犬咬伤，首先要把脏血挤出，否则容易引起感染；伤口若比较大或自己不好处理，以最快的速度去医院处理。同时24小时内到防疫站注射相关疫苗。实验动物及其动物实验的操作标本处理：动物血液以及组织标本应立即按实验要求进行分离、冻存或固定处理后，分类存放。动物实验标本及废弃物的处理废弃物处理•国务院《医疗废物管理条例》•卫生部令《医疗卫生机构医疗废物管理办法》•卫生部文件《医疗废物分类目录》•病原体的培养基、标本和菌种、毒种保存液等高危险废弃物，在交医疗废物集中处置前应就地高压消毒。动物实验标本及废弃物的处理动物实验标本及废弃物的处理•实验动物使用的各种废弃物可按《医疗废物分类目录》进行相应分类，并严格按照《医疗废物管理条例》的规定进行处理。•根据实验动物使用的废弃物的特征可分为•感染性废弃物：如被动物血液、体液污染的物品•病理性废弃物：实验动物尸体等废弃物•损伤性废弃物：废弃的锐器。•药物性废弃物：变质或者被污染的废弃的药品•化学性废弃物：具有毒性、腐蚀性、易燃易爆性的废弃的化学物品动物实验标本及废弃物的处理实验动物使用的废弃物收集●将实验动物使用废弃物分别置于动物废弃物专用包装袋或者容器内。●感染性废弃物、病理性废弃物、损伤性废弃物、药物性废弃物及化学性废弃物不能混合收集。●盛装实验动物使用废弃物的每个包装袋、容器外表面应当有警示标识，注明：单位、日期、类别等。●废弃物经包装、密封后存放于暂时贮存设施，不得露天存放；暂时贮存的时间不得超过２天，由爱卫办或防疫部门统一运输、处理。动物实验标本及废弃物的处理对实验动物废弃物暂时贮存设施、设备要求：●远离人员活动区和生活垃圾存放场所，方便实验动物使用废弃物运