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实验室风险评估1实验室风险评估报告（EvaluatingRecordforBiohazardofLaboratory）评估日期（Date）：一、参加成员：成员姓名（Name）签名（Signature）成员姓名（Name）签名（Signature）成员姓名（Name）签名（Signature）文跃琴李仕平邓晓华为明确本医学实验室的生物安全防护等级，建立相应的防护机制，配备适当的防护用品，采取相应的防护措施，实验室生物安全委员现对实验室活动情况进行风险评估：二、评估内容依据2006年1月11日中华人民共和国卫生部颁布的《人间传染的病原微生物名录》，对本实验室可能接触的生物因子进行评估：细菌部分：1.炭疽芽孢杆菌1.1生物学特性：炭疽杆菌菌体粗大，两端平截或凹陷，是致病菌中最大的细菌。排列似竹节状，无鞭毛，无动力，革兰氏染色阳性，本菌在氧气充足，温度适宜（25～30℃）的条件下易形成芽胞；1.2分类：第二类；1.3来源：来自患者标本脓液、渗出物，吸入性炭疽的咯痰；1.4传染性及传播途径：人类主要通过工农业生产而感染，本菌由体表破损处进入体内、吸入、食入引起感染；1.5易感性：机体抵抗力降低时，接触污染物品可发生感染引起疾病；1.6潜伏期：数小时至几十天；1.7变异性：不详；实验室风险评估21.8对环境敏感性：繁殖体抵抗力不强，易被一般消毒剂杀灭，而芽胞抵抗力强，在干燥的室温环境中可存活20年以上，在皮毛中可存活数年。牧场一旦被污染，芽胞可存活20～30年。经直接日光曝晒100小时、煮沸40分钟、l40℃干热3小时、110℃高压蒸汽60分钟、以及浸泡于10%甲醛溶液15分钟、新配苯酚溶液(5%)和20%含氯石灰溶液数日以上，才能将芽胞杀灭。炭疽芽胞对碘特别敏感，对青霉素、先锋霉素、链霉素、卡那霉素等高度敏感。1.9与其他它生物的交互作用：无；1.10流行病学资料：炭疽杆菌属于需氧芽孢杆菌属，能引起牛、羊、马等动物及人类的炭疽病，炭疽杆菌曾被帝国主义作为致死战剂之一，平时牧民、农民、皮毛和屠宰工作者易受感染，皮肤炭疽在我国各地还有散在的发生；1.11致病性：1.11.1皮肤炭疽最常见，多发生于屠宰、制革或毛刷工人及饲养员。本菌由体表破损处进入体内，开始在入侵处形成水疖、水疱、脓疱、中央部呈黑色坏死，周围有浸润水肿、如不及时治疗，细菌可进一步侵入局部淋巴结或侵入血流，引起败血症死亡；1.11.2纵隔障炭疽少见，由吸入病菌芽胞所致，多发生于皮毛工人，病死率高。病初似感冒，进而出现严重的支气管肺炎，可在2～3天内死于中毒性休克；1.11.3肠炭疽由食入病兽肉制品所致，以全身中毒症状为主，并有胃肠道溃疡、出血及毒血症，发病后2～3日内死亡；1.11.4上述疾病若引起败血症时，可继发“炭疽性脑膜炎”。炭疽杆菌的致病性取决于荚膜和毒素的协同作用；1.12预防及治疗：青霉素是首选的抗生素。根据不同的感染类型，治疗也不同。皮肤炭疽每日注射青霉素总量为100～200万单位。同时可加用四环素、链霉素、氯霉素或新霉素。对于肺炭疽及肠炭疽，每日青霉素总量应在600万单位以上；对于炭疽性脑膜炎及败血症，每日青霉素总量要超过1，000单位。除了上述抗生素外，其他的抗菌药物，比如磺胺、呋喃唑酮等，对其也有较强的作用。2.结核分枝杆菌2.1生物学特性：结核分枝杆菌为细长略带弯曲的杆菌，大小1～4X0.4μm，细胞壁外有一层荚膜；2.2分类：第二类；2.3来源：来自患者标本的痰、支气管灌洗液、尿、粪、脑脊液或胸、腹水；实验室风险评估32.4传染性及传播途径：结核分枝杆菌可通过呼吸道、消化道或皮肤损伤侵入易感机体，引起多种组织器官的结核病，其中以通过呼吸道引起肺结核为最多；2.5易感性：与感染菌的毒力、数量、机体的免疫状态相关；2.6潜伏期：不详；2.7变异性：结核分枝杆菌可发生形态、菌落、毒力、免疫原性和耐药性等变异。；2.8对环境敏感性：因结核杆菌体内含有大量类脂质，占结核菌干重的40%，细胞壁内含量最多，因其富脂外壁的疏水性之故，一般的消毒剂难以渗入，对外界条件有异常大的抵抗力，使通常的灭菌方法易失败，15%硫酸或15%氢氧化钠溶液处理30分钟，可杀死一般的病原菌，但不能杀死结核杆菌。在阴暗潮湿的地方可生存数月，在阳光暴晒下能生存数小时，在-7℃以下可生存4~5年。但在沸水中（100℃）数分钟可死亡，煮沸消毒是最有效、最经济的方法。醇脂性溶剂——酒精能渗入其酯层而发挥奇效，用75%酒精2分钟便可将它杀死；2.9与其他它生物的交互作用：感染了HIV的结核分枝杆菌携带者，由于病毒破坏了机体的免疫功能，发展为活动性结核病的可能性比未感染HIV者高30～50倍，且结核的病程发展更快；2.10流行病学资料：结核分枝杆菌，俗称结核杆菌，是引起结核病的病原菌。可侵犯全身个器官，但以肺结核为最多见。结核病至今仍为重要的传染病。估计世界人口中1/3感染结核分枝杆菌。据WHO报道，每年约有800万新病例发生，至少有300万人死于该病。我国建国前死亡率达到200-300人/10万，居各种疾病死亡原因之首，建国后人民生活水平提高，卫生状态改善，特别是开展了群防群治，儿童普遍接种卡介苗，结核病的发病率和死亡率大为降低。但是世界上有些地区因艾滋病、吸毒、免疫抑制剂的应用、酗酒和贫困等原因，大病率又有上升趋势；2.11致病性：结核分枝杆菌可通过呼吸道、消化道或皮肤损伤侵入易感机体，引起多种组织器官的结核病，其中以通过呼吸道引起肺结核为最多。因肠道中有大量正常菌群寄居，结核分枝杆菌必须通过竞争才能生存并和易感细胞粘附。肺泡中无正常菌群，结核分枝杆菌可通过飞沫微滴或含菌尘埃的吸入，故肺结核较为多见；2.11.1.肺部感染，由于感染菌的毒力、数量、机体的免疫状态不同，肺结核可有以下两类表现：（1）原发感染：多发生于儿童。肺泡中有大量巨噬细胞，少数活的结核分枝杆菌进入肺泡即被巨噬细胞吞噬。由于该菌有大量脂质，可抵抗溶菌酶而继续繁殖，使巨噬细胞遭受破坏，释放出的大量菌在肺泡内引起炎症，称为原发灶。初次感染的机体因缺乏特异性免疫，结核分枝杆菌常经淋巴管到达肺门淋巴结，引起肺门淋巴结肿大，称原发综合征。此时，可有少量结核分枝杆菌进入血液，实验室风险评估4向全身扩散，但不一定有明显症状（称隐性菌血症）；与此同时灶内巨噬细胞将特异性抗原递呈给周围淋巴细胞。感染3～6周，机体产生特异性细胞免疫，同时也出现超敏反应。病灶中结核分枝杆菌细胞壁磷脂，一方面刺激巨噬细胞转化为上皮样细胞，后者相互融合或经核分裂形成多核巨细胞（即朗罕巨细胞），另一方面抑制蛋白酶对组织的溶解，使病灶组织溶解不完全，产生干酪样坏死，周围包着上皮样细胞，外有淋巴细胞、巨噬细胞和成纤维细胞，形成结核结节（即结核肉芽肿）是结核的典型病理特征。感染后约5%可发展为活动性肺结核，其中少数患者因免疫低下，可经血和淋巴系统，播散至骨、关节、肾、脑膜及其他部位引起相应的结核病。90%以上的原发感染形成纤维化或钙化，不治而愈，但病灶内常仍有一定量的结核分枝杆菌长期潜伏，不但能刺激机体产生免疫也可成为日后内源性感染的渊源；（2）原发后感染：病灶亦以肺部为多见。病菌可以是外来的（外源性感染）或原来潜伏在病灶内（内源性感染）。由于机体已有特异性细胞免疫，因此原发后感染的特点是病灶多局限，一般不累及邻近的淋巴结，被纤维素包围的干酪样坏死灶可钙化而痊愈。若干酪样结节破溃，排入邻近支气管，则可形成空洞并释放大量结核分枝杆菌至痰中；2.11.2．肺外感染：部分患者结核分枝杆菌可进入血液循环引起肺内、外播散，如脑、肾结核，痰菌被咽入消化道也可引起肠结核、结核性腹膜炎等；2.12预防及治疗：近20年国际组织提出控制结核病主要方法有：①发现和治疗痰菌阳性者;②新生儿接种卡介苗。约80%获得保护力。利福平、异烟肼、乙胺丁醇、链霉素为第一线药物。利福平与异烟肼合用可以减少耐药性的产生。对严重感染，可以吡嗪酰胺与利福平及异烟肼合用。1g干酪灶或空洞约含结核分枝杆菌106～10。每105～6菌可有1种耐药突变产生，对2种耐药需菌1011，故以2药联合应用为宜。3.霍乱弧菌3.1生物学特性：新从病人分离出古典型霍乱弧菌和ELtor弧菌比较典型，为革兰氏阴性菌，菌体弯曲呈弧状或逗点状，菌体一端有单根鞭毛和菌毛，无荚膜与芽胞；3.2分类：第二类；3.3来源：病人“米泔水样”大便或呕吐物；3.4传染性及传播途径：传播途径主要是通过污染的水源或未煮熟的食物如海产品、蔬菜经口摄入；3.5易感性：在正常胃酸条件下，如以水为载体，需饮入大于1010个细菌方能引起感染；如以食物实验室风险评估5作为载体，由于食物高强度的缓冲能力，感染剂量可减少到102～104个细菌。任何能降低胃中酸度的药物或其他原因，都可使人对霍乱弧菌感染的敏感性增加；3.6潜伏期：仅有1-5日，甚至只有几个小时；3.7变异性：不详；3.8对环境敏感性：霍乱弧菌古典生物型对外环境抵抗力较弱，EL-Tor生物型抵抗力较强，在河水、井水、海水中可存活1～3周，在鲜鱼，贝壳类食物上存活1～2周。霍乱弧菌对热，干燥，日光，化学消毒剂和酸均很敏感，耐低温，耐碱。湿热55℃，15分钟，100℃，1～2分钟，水中加0.5ppm氯15分钟可被杀死。0.1%高锰酸钾浸泡蔬菜、水果可达到消毒目的。在正常胃酸中仅生存4分钟；3.9与其他它生物的交互作用：无；3.10流行病学资料：霍乱弧菌是人类霍乱的病原体，霍乱是一种古老且流行的烈性传染病之一。曾在世界上引起多次大流行，主要表现为剧烈的呕吐，腹泻，失水，死亡率甚高。属于国际检疫传染病；3.11致病性：3.11.1病菌到达小肠后，粘附于肠粘膜表面并迅速繁殖，不侵入肠上皮细胞和肠腺，细菌在繁殖过程中产生肠毒素而致病。O1群霍乱弧菌感染可从无症状或轻型腹泻到严重的致死性腹泻。在古典生物型霍乱弧菌感染中，无症状者可达60%；在ElTor生物型感染中，无症状者可达75%。霍乱弧菌古典生物型所致疾病较ElTor生物型严重。典型病例一般在吞食细菌后2～3天突然出现剧烈腹泻和呕吐，多无腹痛，每天大便数次或数十次。在疾病最严重时，每小时失水量可高达1升，排出由粘膜、上皮细胞和大量弧菌构成的如米泔水样的腹泻物。由于大量水分和电解质丧失而导致失水，代谢性酸中毒，低碱血症和低容量性休克及心力不齐和肾衰竭，如未经治疗处理，病人可在12～24小时内死亡，死亡率高达25%～60%，但若及时给病人补充液体及电解质，死亡率可小于1%。O139群霍乱弧菌感染比O1群严重，表现为严重脱水和高死亡率，且成人病例所占比例较高，大于70%，而O1群霍乱弧菌流行高峰期，儿童病例约占60%；3.11.2病愈后一些患者可短期带菌，一般不超过3～4周，真正的慢性带菌者罕见。病菌主要存在于胆囊中；3.12预防及治疗：人群的菌苗预防接种，可获良好效果，现用加热或化学药品杀死的古典型霍乱菌苗皮下接种，能降低发病率。治疗主要为及时补充液体和电解质及应用抗菌药物如链霉素、氯霉素、强力霉素、复方SMZ-TMP等。实验室风险评估64.大肠埃希菌4.1生物学特性：大肠杆菌是人和许多动物肠道中最主要且数量最多的一种细菌，周身鞭毛，能运动，无芽孢；4.2分类：第三类；4.3来源：病人肠道外感染取中段尿、血液、脓液、脑脊液等，腹泻者取粪便；4.4传染性及传播途径：传播途径主要是通过食物、水、密切接触传播；4.5易感性：大肠杆菌是人和许多动物肠道中最主要且数量最多的一种细菌，主要寄生在大肠内。它侵入人体一些部位时，可引起感染，如腹膜炎、胆囊炎、膀胱炎及腹泻等。人在感染大肠杆菌后的症状为胃痛、呕吐、腹泻和发热。感染可能是致命性的，尤其是对孩子及老人；4.6潜伏期：通常为3至4日，但亦会长达9日；4.7变异性：易产生耐药性；4.8对环境敏感性：在自然界水中可以存活数周至数月，在较低温的粪便中存活更久；4.9与其他它生物的交互作用：无；4.10流行病学资料：肠埃希氏菌通常称为大肠杆菌，是Escherich在1885年发现的，在相当长的一段时间内，一直被当做正常肠道菌群的组成部分