实验维生素C的定量测定

实验维生素C的定量测定一、目的要求1.学习并掌握定量测定维生素C的原理和方法。2.了解蔬菜、水果中维生素C含量情况。二、实验原理维生素C是具有L系糖型的不饱和多羟基物，属于水溶性维生素。它分布很广，植物的绿色部分及许多水果（如橘子、苹果、草莓、山楂等）、蔬菜（黄瓜、洋白菜、西红柿等）中的含量更为丰富。维生素C具有很强的还原性。还原型抗坏血酸能还原染料2,6-二氯酚靛酚（DCPIP），本身则氧化为脱氢型。在酸性溶液中，2,6-二氯酚靛酚呈红色，还原后变为无色。因此，当用此染料滴定含有维生素C的酸性溶液时，维生素C尚未全部被氧化前，则滴下的染料立即被还原成无色。一旦溶液中的维生素C已全部被氧化时，则滴下的染料立即使溶液变成粉红色。所以，当溶液从无色变成微红色时即表示溶液中的维生素C刚刚全部被氧化，此时即为滴定终点。如无其它杂质干扰，样品提取液所还原的标准染料量与样品中所含还原型抗坏血酸量成正比。三．材料、器材及试剂1．材料：新鲜青菜2．器材：电子天平，酸式滴定管，移液管，容量瓶，量筒，锥形瓶，研钵。3.试剂（1）2%草酸溶液：草酸1g溶于100ml蒸馏水中。（2）2,6-二氯酚靛酚溶液:250mg2,6-二氯酚靛酚溶于150ml含有52mgNaHCO3的热水中，冷却后加水稀释至250ml，贮于棕色瓶中冷藏（4℃）约可保存一周。每次临用时，以标准抗坏血酸溶液标定。（3）标准抗坏血酸溶液（0.2mg/ml）:准确称取20mg纯抗坏血酸（应为洁白色，如变为黄色则不能用）溶于2%草酸溶液中，并稀释至100ml，贮于棕色瓶中，冷藏，最好临用前配制。四．操作步骤1．样品的处理和提取（1）取材：称取4.0g样品洗净、切碎。（2）研磨：样品置研钵中，加少量2%草酸溶液研磨成汁液，用2%草酸溶液冲洗转移至50ml离心管，3000r/min离心15min，上清转移到50ml容量瓶中，2%草酸溶液定容至50ml。2.空白测定取2%草酸10ml，放入50ml三角瓶中，用2,6-二氯酚靛酚钠溶液滴定至三角瓶内溶液呈粉红色，15秒内不褪色为终点，记录所用滴定液体积，重复三次取平均值。3.标定2,6-二氯酚靛酚钠溶液取2ml标准抗坏血酸溶液加8ml2%草酸溶液，置于50ml三角瓶内，用2,6-二氯酚靛酚钠溶液滴定至终点，记录所消耗2,6-二氯酚靛酚钠溶液的量，重复三次取平均值。4．样品的测定取样品液10ml，放入50ml三角瓶，立即用2,6-二氯酚靛酚钠溶液滴定至出现明显的粉红色并保持15秒内不褪色，记录所消耗滴定液的体积，重复三次取平均值。五．实验结果及分析X=（V1-V2）*K*V*100/(W*V3)K=0.2*2/(V0-V2)其中X—100克样品所含维生素C毫克数（mg/100g）W—称取样品重（g）V0—标定染料时滴定标准维生素C所消耗的染料毫升数V1—滴定样品所用染料毫升数V2—滴定空白所用样品液毫升数V3—样品测定时所用样品液毫升数V—样品提取液稀释之总体积K—1毫升染料液所能氧化维生素C之毫克数六、思考题本实验方法的优缺点有哪些？