即液基细胞学检查——李保民子宫颈细胞学检查近年来,我国宫颈癌的发病率逐年上升,且呈年轻化趋势,宫颈癌已经成为威胁女性健康的“第二大杀手”。由于宫颈癌是病因明确,可以早发现、早诊断、早治疗,且可望消灭的癌症,防治的关键在于能够尽早发现和治疗宫颈癌前病变,终止其向宫颈癌的发展,因此宫颈癌的早期筛查已刻不容缓。一.宫颈癌的临床症状早期宫颈癌癌可以没有明显症状,或有白带增多、性交出血、宫颈糜烂等。部分早期和中晚期患者常见症状如下:⑴阴道不规则出血:当癌瘤侵犯宫颈血管时,开始出现阴道流血,最早表现为性交后出血,或医师进行双合诊后有少量出血,称为接触性出血。此外有绝经后出血,年轻患者可有经期延长、经量多或月经间期阴道出血,常被误认为月经不调。有时可因较大血管被侵蚀或部分癌组织脱落引起阴道大出血。⑵阴道排液:由于癌组织破溃或合并感染,表现为水样白带增多,或血性白带,或呈黄色。严重感染时可有脓样白带,有腥臭味。⑶疼痛:常为宫颈癌晚期表现,疼痛可出现在腰骶部、髂部、下腹部,也可放射至臀部及大腿部。下腹疼痛可能是宫颈癌瘤或宫旁合并感染,或因癌瘤堵塞宫颈管引起宫腔引流不畅造成宫腔积液、积脓,导致子宫收缩所致。当癌瘤压迫输尿管引起肾盂积液时可引起肾区、腰骶部疼痛。癌瘤压迫盆骶部神经时可有臀部、骶部疼痛,甚至放射、传导至下肢。⑷其他症状:如膀胱受侵犯可引起尿痛、尿血、尿的次数增多。如直肠受侵犯可出现排便困难、便血、直肠阴道瘘等。晚期可出现消瘦、发热。⑸晚期出现继发感染、贫血及恶病质,如有肺部转移可出现胸痛、咳嗽、咯血,骨转移可引起相应部位的持续疼痛。二.宫颈癌的早期筛查根据病史(症状)、妇科检查和子宫颈细胞学检查,加上活体组织病理学检查,对大部分早期和中晚期癌即可诊断清楚。目前国内外开展的宫颈癌初筛普查就是用这个方法,发现了许多早期病人,取得很好效果。对一些早期宫颈癌(包括原位癌)、癌前病变还须依靠辅助诊断,最后靠病理学确诊。在宫颈癌诊断中,常用的筛查方法有以下几种:⑴阴道脱落细胞学检查:尽管医学和生物学技术日新月异,但迄今为止,病理诊断仍然是所有医学诊断中准确性最高的诊断。传统的巴氏涂片检查方法(即宫颈刮片),在过去50年中起了很大的作用,使得宫颈癌在许多发达国家的发病率和死亡率稳步下降。目前市面上的筛查产品大体分为两类,传统手工巴氏抹片及液基细胞学检测系统。前者技术相对落后,人为因素强等,不利于诊断,易出现假阴性及假阳性贻误治疗。随着科学的进步,近年发展起来的液基薄层细胞学诊断技术克服了传统宫颈刮片技术上的不利因素,而且取样简单易行、安全,无损伤,无痛苦,易于接受。诊断迅速,准确性高,标本可重复制片,保证了制片细胞的均匀性,方便阅读,有利于检测者做出准确的诊断。有病原体时利于针对性治疗。(2)阴道镜检查:阴道镜可放大20到40倍,可观察子宫颈上皮及血管的细微形态变化,而判断有无病变,提示可疑病变的部位,提高活体组织检查的检出率。(3)宫颈管内膜刮取术:在细胞学检查发现癌细胞或可疑癌细胞,但阴道镜检查不能发现其部位者应作这种检查。有助于明确宫颈管内有无癌灶存在。⑷宫颈锥形切除术:适用于细胞涂片结果与阴道镜下活体组织检查或宫颈管刮取术检查的结果不一致者;明确原位癌有无早期浸润及其病变范围;作为部分宫颈上皮内瘤变患者的治疗方法。近来也有人以阴道镜下活检加宫颈管刮取代替椎切术,病理结果与子宫颈椎切标本检查结果均相同。液基细胞学检查不仅能提高细胞学的诊断,还能从微生物学角度做出诊断,其主要用于发现宫颈异常细胞的识别,亦可识别炎症细胞以及滴虫、念珠菌,还能识别疱疹病毒及乳头状瘤病毒等感染,且采用TBS报告系统,比传统法更全面、更具有临床应用价值。众所周知,HPV感染与子宫颈癌及癌前期病变的发生密切相关。目前国内外尖锐湿疣的发生率很高,液基细胞学检查更具有广泛的社会意义。但是,单纯的液基细胞学检查或阴道镜检查均存在一定的局限性,因为细胞学检查阳性并不能确定宫颈具体的病变部位,而阴道镜检查也只能观察宫颈的表面,对宫颈管的病变则无法了解。所以,当细胞学阳性后,阴道镜检查时会更仔细观察宫颈病变的情况,尤其是当宫颈阴道部位未发现明显病灶时,还可指导临床医师进一步进行宫颈管诊刮,积极寻找病灶,使得阳性检出率进一步提高。因此,使用液基细胞学检查配合阴道镜,以及镜下活检可以提高宫颈癌前病变及早期宫颈癌的准确诊断率,从而提高存活率,治疗宫颈癌前病变,排除宫颈癌发病的相关高危因素,阻碍进一步癌变。•即在临床表现的基础上,应遵循细胞学、阴道镜及组织学的步骤来进行,就是被称为三阶梯式诊断程序,以免减少误诊。三、什么是液基薄层细胞学诊断技术?3种类型:制片、阅片全自动(DNA倍体数)自动制片、人工阅片手工制片、人工阅片细胞是组成人体的基本结构和功能单位。通过观察人体各个组织的细胞的变化和异常现象,就可以知道人体是否有病变。例如医生提取一点阴道分泌物,制成玻璃涂片,经过染色,在高倍显微镜下仔细观察便可以诊断是否患有宫颈癌等疾病。该法称为巴氏宫颈抹片法,一直被世界所公认,至今仍然被广泛沿用,但会出现2%-50%的假阴性率。随着科学的进步,近年发展起来的液基薄层细胞学诊断技术克服了传统宫颈刮片技术上存在的材料太厚,细胞重叠,背景模糊和染色不佳等问题,而且同一份标本可重复制片,保证了制片细胞的均匀性,方便阅读,有利于检测者做出准确的诊断。液基薄层细胞学诊断技术:医生将提取的样品经过稀释,降低粘稠度,然后在专用的制片机上用双层分子筛过滤。去除干扰物,留下我们有用的所有成分,机器自动制成十分均匀的,单层的细胞薄膜涂片。这种涂片判读时非常轻松,大大提高了诊断水平,大幅度提高了准确率和阳性率。降低了假阴性的比例。有资料报道此法对异常细胞诊断率提高了13%,对低度鳞状上皮以上病变的检出率提高了65%。这项诊断技术就是液基薄层细胞学诊断技术。这项技术在1996年获得美国FDA批准用于临床,简称TCT(Thinprepcytologictest)。四.液基细胞与传统涂片相比的优点一)、可收集全部细胞,多次制片,阳性率高。传统涂片仅能收集约20%细胞,细胞少发现癌变细胞机率小。二)、可以去除粘液、红细胞等杂质,制成优质薄片,涂片内细胞分布均匀,图像清晰,检测者容易发现癌变细胞。传统涂片厚,细胞重叠,视野不清难于发现癌变细胞。三)、诊断迅速,准确率高,有资料统计约在60%-70%以上。传统涂片假阴性高。四)、诊断上采用世界通用的TBS诊断系统,该诊断系统是目前宫颈细胞学最新分类和最权威的诊断标准。准确地反映了宫颈癌和癌前期病变的最新认识,诊断明确,内容全面,贴近临床诊断。传统巴氏诊断分级中的核异质细胞、可疑癌细胞的概念令临床医师费解,和临床诊断不能统一,不利于沟通。五)、液基细胞制片机给病理细胞学制片技术带来新的突破,机器制片代替人工制片,质量和数量上更有保障。五、液基宫颈细胞学1、液基宫颈细胞学检查意义:宫颈癌是女性常见的恶性肿瘤之一,发病率在女性恶性肿瘤中居第二位,是威胁妇女健康的主要疾病。近年来,由于生物、社会因素影响,包括HPV,单纯疱疹病毒Ⅱ等病毒感染,性生活过早,多个性伴侣,口服避孕药,宫颈糜烂,吸烟等理化生物刺激增加宫颈上皮变异机会,宫颈癌发病率有上升趋势,且发病年龄年轻化。然而,宫颈癌及其癌前病变是可以早期发现而治愈的。宫颈癌的生成是非常缓慢,一般的宫颈癌前病变发展成为宫颈癌大约需要10年的时间,这期间的任何一次检查都可以把宫颈癌扼杀在初期.由于解剖位置的关系,子宫颈的癌前变化可能不易被医生及时发现,必须要辅以先进的技术进行检查,通过定期地进行液基宫颈细胞学筛查,就能准确敏感地发现早期宫颈癌及癌前病变、随访术后患者,积极治疗早期病变,可以阻断疾病进程,防止宫颈癌特别是浸润癌的发生。2、液基宫颈细胞学检查方法:用特制的细胞刷、刷取宫颈细胞,全部收集在保存瓶内。把保存液离心、弃除杂质后,把细胞转移在特制玻片上。因重力作用、细胞沉降和均匀地粘附在玻片上(细胞的离散、转印、制片全由机器自动完成),染色后制成优质的涂片。最后由检测者在显微镜下筛查。3、液基宫颈细胞学检查优点:取样简单易行、安全。无损伤,无痛苦,易于接受。诊断迅速,准确性高,可以多次复查。与传统宫颈涂片相比,TCT在制片技术上有重大突破,制成的涂片薄、细胞分布均匀、图象清晰,使检测者容易发现异常细胞,因而准确度高。4、液基宫颈细胞学检查范围:适用于大规模人群或个人的宫颈防癌筛查和宫颈癌高危人群的随访、观察。5、液基宫颈细胞学检查在诊断方面:采用TBS分类法,使诊断报告更明确,内容更全面。还可以准确、敏感地明确宫颈癌及癌前病变的不同病变程度,再予相应的治疗,能有效地降低宫颈癌的发病率和死亡率。六.取样:妇科医生是否取到了病变细胞,检测者是否能识别病变细胞,这两方面都非常重要。一)宫颈癌高危人群:宫颈癌跟早婚、早育、多产、卫生习惯不良及人乳头瘤病毒感染、疱疹病毒感染等因素有关,凡有性生活史的女性,尤早婚早育、有流产史、性病史、拥有多名性伴侣的女性,是宫颈癌的高发人群,每年均应做至少一次妇科检查和宫颈细胞学筛查。对于细胞学筛查阳性及HPV感染或有宫颈中、重度糜烂,接触性出血,宫颈息肉及宫颈湿疣等患者,均应视为高危人群,对高危人群应严密监管,3—6个月复查细胞学,最大限度地降低宫颈癌对妇女生殖健康的威胁。二)、进行子宫颈细胞检验的适当时机1、避开月经期(由于解读血细胞混杂的涂片可能会困难,所以应避免在月经期间进行子宫颈细胞检查)。2、如果发现局部子宫颈病变或者不正常的阴道出血,即使出血也应该进行细胞检查。3、如果有受感染或萎缩的迹象,应该治疗后检查。若妇女在复诊方面有困难,在首次来访时便应进行检查。4、若有临床证据显示已停经的女性出现子宫颈阴道萎缩,可给予1疗程的局部雌激素治疗,停用2-7天后,才进行子宫颈细胞检查。三).妇女预约时须注意的事项1、在接受检验前的24个小时应该避免灌洗阴道、性交和使用阴道塞药,因为这样可能冲走或隐藏不正常的细胞。2、提醒妇女接受子宫颈细胞检查的最佳时间。四)、询问资料1、询问有否性行为、怀孕次数和最近的来经日期。2、有否避孕及采用之避孕方法/雌激素。3、上一次接受细胞检查的资料和结果/以往子宫颈癌或癌前病变的记录。4、子宫切除/全子宫切除/电环切除手术或锥形活组织切片检查的记录。5、化学疗法和放射性疗法的现行记录。6、目前的妇科病征∶不正常的阴道分泌、性交后出血、月经之间出血和停经后出血。完成妇女健康检查表。五).液基细胞学申请表∶除了个人资料外,亦应该包括临床资料在内,因为这样有助细胞学者检测涂片。细节应包括妇女的年龄、最后的月经日期(记录来经第一天的日期,便于雌激素水平判断)、妇女是否怀孕、刚生育、已停经、正使用雌激素或子宫环(IUD)。任何风险因素,例如曾患子宫颈上皮内瘤(CIN)或接受治疗、子宫颈外观不正常、不正常的阴道分泌、性交后出血、月经之间出血和停经后出血都应该写在申请单上。六)、宫颈细胞取样1、取材尽可能避开经期,取材前24小时不上药,不冲洗、不过性生活。2.一般在变异区取样,因为大多数的癌症和癌前病变均在这里出现(变异区即宫颈外口,为子宫颈管的柱状上皮与子宫颈阴道部的鳞状上皮交界处)。3.找寻子宫颈内任何明显的异常情况。如果有感染的迹象,可把取样延迟到感染治疗后。4.在进行细胞取样之前,应该用干的棉花球或棉棒移去阻塞子宫颈外口过多的粘液。5、取材应在直接观察下进行,保证宫颈刷对所取部位有一定的压力,宫颈刷的尖端放入颈管的外口,以取得足够的细胞成分。操作步骤1操作步骤2操作步骤3操作步骤4操作步骤56、在一般情况下尽量避免短期内(小于三小时)重复取材,以免出现假阴性结果。7.对于已停经或鳞状及变异区缩进子宫颈内的女性,除了刮棒/子宫颈刷之外亦应该使用内子宫颈刷子。但这种工具不适用于怀孕的女性,因为有可能使胎膜破裂和造成感染。8、申请单填写应尽量完全,字迹工整,尽可能提供相关的临床信息。七).影响宫颈细胞检查敏感度的因素1、取样时间∶在适当时间取样,更容易取得与临床相符的标本。2