微生物复习重点1、正常菌群:指人类体表及与外界相通空腔粘膜上寄居,对宿主无害甚至有益的微生物,和人构成共生关系。2、致病菌:是指已引起病变的细菌。3、条件致病菌:通常是自由生活的或作为宿主正常菌群的成员的微生物在条件/环境改变的情况下成为致病菌。比如:大肠埃希菌(免疫力低下/进入泌尿道寄居部位改变免疫功能低下内源性感染菌群失调与失调症)4、菌群失调:正常菌群内部各菌之间发生数量及寄生地发生明显变化,及为菌群失调。5、二重感染:菌群失调状态进一步发展,出现了系列临床症状和体征,称之为菌群失调症/又称二重感染。原因为广谱抗生素长期使用。6、内毒素:为脂多糖,外毒素:可溶性蛋白质7、菌血症:病原菌入侵血流但不在血中繁殖,仅通过血流播散,只是短暂地经血到体内有关部位再进行繁殖而致病。如伤寒早期。8、败血症:是致病菌或条件病原菌侵入血循环中生长繁殖,产生毒素和其他代谢产物所引起的急性全身性感染,临床上以寒战、高热、皮疹、关节痛及肝肿大为特征,部分可有感染性休克和迁徙性病灶。9、脓毒血症:感染导致全身的SIRS。10、敏感:即表示测试菌株可被测试药物常规剂量给药后在感染部位达到的药物浓度所抑制中介:表示测试菌株MIC接近通常可达到的血液或体液药物浓度,治疗反应率低于敏感株,在药物的生理浓集区或提高给药剂量可能有疗效。耐药:测试菌株不能被在体内感染部位可能达到的抗菌药物浓度所抑制。临床治疗无效和/或测试菌株有特殊耐药机制,临床治疗效果不明显。11、医院感染:在医院获得的一切感染。即病人入院时不存在,也不处于潜伏期,而是入院后引起的感染,包括在医院内获得而出院后发病的感染。12、医院感染监测:长期系统、连续地观察、收集和分析在一定人群中医院感染的发生、分布及其影响因素,并进行反馈,为医院感染的预防控制和管理提供依据。指控菌株:ATCC25923(金黄色葡萄球菌)ATCC25922(大肠埃希菌)ATCC27853(铜绿假单胞菌)ATCC29212(粪肠球菌)触酶实验阳性的有:葡萄球菌和微球菌触酶实验阴性的有:链球菌凝固酶试验阳性的有:金黄色葡萄球菌、中间型葡萄球菌和家畜葡萄球菌用于金葡与其他葡萄球菌的鉴别。耐热酶实验:大多数金黄色葡萄球菌、施氏葡萄球菌、中间葡萄球菌、猪葡萄球菌能产生耐热核酸酶。表皮葡萄球菌、模仿葡萄球菌、肉葡萄球菌含微弱耐热核酸酶。磷酸酶试验:大多数的表皮葡萄球菌和金黄色葡萄球菌、施氏葡萄球菌、中间葡萄球菌和猪葡萄球菌为阳性。PYR(吡咯烷酮芳基酰胺酶实验):溶血葡萄球菌、里昂葡萄球菌、施氏葡萄球菌和中间葡萄球菌为阳性。13、葡萄球菌的生物学特性:直径0.5-1.5μm革兰阳性球菌,呈单个、成双、短链或成簇排列呈葡萄串样,无鞭毛和芽孢,某些菌株能形成荚膜。在金黄色葡萄球菌的细胞壁有葡萄球菌A蛋白,具有抗原性。缩写SPA大多数为兼性厌氧菌,对营养要求不高,最适生长条件35~37℃,PH7.4~7.6。普通培养基上形成直径2~3mm不透明的圆形凸起菌落。产生金黄色、白色、柠檬色等非水溶性色素附着在菌落上。金黄色葡萄球菌血琼脂平板上菌落周围有透明溶血环。能在含10%~15%NACL琼脂中生长。该菌抵抗力比其他无芽孢细菌强,耐干燥。生化反应活泼能分解多种糖类和蛋白质,触酶阳性。14、链球菌生物学特性:直径小于2μm的球形或卵圆形革兰阳性球菌,呈链状排列,链的长短和细菌的种类及生长环境有关。肺炎链球菌呈毛尖状,宽端相对尖端向外,成双排列,无芽孢、无动力,但能形成荚膜和粘液层。生化特性:发酵葡萄糖和多种糖,不产气,乳酸为代谢终末产物,触酶阴性。分离培养:用羊血琼脂平板培养有助于识别溶血特性和进一步鉴定:菌落周围呈现透明溶血环的为β溶血性链球菌。草绿色溶血环的为α溶血性链球菌。肺炎链球菌:革兰阳性球菌链状呈毛尖状,能形成荚膜和粘液层荚膜多糖使菌落呈粘液状,产生自溶酶,培养48小时后出现“脐窝”菌落可做荚膜肿胀实验鉴别用羊血琼脂平板培养有助于识别溶血特征和进一步鉴定——不用普通培养基抗链球菌溶素O抗体检测:链球菌侵入体内产生SLOOptochin敏感试验敏感β溶血性链球菌(化脓性链球菌)鉴定PYR试验:化脓性链球菌产生的吡咯烷酮芳基酰胺酶水解吡咯烷酮β-萘基酰胺,加入N,N-二甲基肉桂醛试剂后产生桃红色。杆菌肽敏感试验:化脓性链球菌为阳性,有别于其他PYR阳性的β溶血性细菌和A群小菌落β溶血性链球菌。VP试验:挑取平板上孵育过夜菌落置于2mlVP肉汤中,孵育6h后加入vp试剂,摇匀30秒,出现桃红色者为阳性。该试验可鉴别A.C.G群β溶血的大、小两种不同菌落。CAMP试验:无乳链球菌能产生CAMP因子,它可促进金黄色葡萄球菌溶血能力,使其产生显著的协同溶血作用。本法可作为无乳链球菌的初步鉴定试验15、非β溶血链球菌鉴定菌种Optochin敏感试验胆汁溶菌试验胆汁七叶苷试验肺炎链球菌S+-草绿色链球菌R--牛链球菌R-+16奈瑟菌属:革兰阴性双球菌,无鞭毛,无芽孢,有菌毛,部分有荚膜,需氧,氧化酶和触酶(+)培养特性:巧克力培养基、血培养基、卵黄双抗培养基,转性需氧菌,5%二氧化碳促进生长。37℃,7.4~7.6圆形、扁平、光滑、不溶血。分解葡萄糖和麦芽糖,产酸不产气,氧化酶触酶阳性。氧化酶试验:细菌在与试剂接触10秒内呈深紫色,为阳性。应用:主要用于肠杆菌科细菌(-)与假单胞菌(+)的鉴别奈瑟菌属、莫拉菌属细菌也呈阳性反应。17、BAP:血平皿SS:沙门志贺选择平皿EMB伊红亚甲兰平皿肠杆菌科的共有特征:形态特征均为革兰阴性杆菌、无芽孢、有菌毛、多数有鞭毛少数有荚膜。培养特性:需氧、兼性厌氧,营养要求不高,光滑型菌落,氧化酶阴性、触酶阳性。硝酸盐还原试验+发酵葡萄糖IMVC试验++--典型的大肠杆菌。生化反应:克氏双糖琼脂(KIA):乳糖:葡萄糖=10:1三糖铁琼脂(TSI):蔗糖/乳糖:葡萄糖=10:1不发酵糖:斜面、底:碱,红色-KK仅发酵葡萄糖:斜面:红,底:黄(气)KA都利用:斜面、底:酸,黄色-AA产生:H2S黑色克氏铁琼脂(KIA):斜面A—乳酸;底层A-葡萄糖;产气+;H2S(AA+-)动力-吲哚-脲酶培养基(MIU):动力+;吲哚+;脲酶-(++-)大肠埃希菌生物学特性革兰阴性直短杆状,多数有鞭毛,能运动,某些菌株尤其是引起肠外感染的菌株有荚膜和周身菌毛。培养特性:兼性厌氧,营养要求不高,在普通营养琼脂上生长良好,形成较大的圆形、光滑、湿润、灰白色的菌落,在血琼脂上某些菌株可产生β溶血,在肠道选择培养基上可发酵乳糖,形成有色菌落。本菌能发酵多种糖产酸产气,吲哚,甲基红、V-P、枸橼酸盐(IMVC)试验的结果为++--,在克氏铁琼脂(KIA)上斜面和底层均产酸、产气,H2S阴性(+-),在动力、吲哚、脲酶培养基上的反应结果为++—触酶阳性氧化酶阴性硝酸盐还原阳性18、葡萄糖氧化发酵试验(O/F试验)细菌分解在葡萄糖的代谢过程中根据对氧分子参加的需要分成两种类型:需氧分子参与的称为氧化型,能进行无氧酵解的称为发酵型。发酵型的细菌无论在有氧和无氧环境中都能分解葡萄糖。意义:用于鉴定革兰染色阴性杆菌,特别对肠道杆菌意义较大。肠杆菌科的细菌为发酵型,其次大多数肠道菌为非发酵型,也可鉴别葡萄球菌和微球菌,前者为发酵型,后者为氧化型。19、志贺菌属微生物学特性:革兰阴性,短小;无荚膜;无鞭毛;有菌毛;对理化因素的抵抗力较其他肠杆菌科低;兼性厌氧;37℃,PH7.2~7.4;营养要求不高肠道鉴别培养基上形成乳糖不发酵、中等大小、无色半透明的菌落宋内志贺菌形成粗糙型菌落生化反应:分解葡萄糖产酸不产气;除D宋内外不发酵乳糖;除A痢疾外都发酵甘露醇;除D宋内外无鸟氨酸脱羧酶KIA:KA--IMVC:-+--不分解乳糖,发酵葡萄糖产酸不产气,不产生H2S;不产生脲酶,动力阴性;最终鉴定须作全面生化反应。分离培养:取培养或肛拭标本,挑取粪便中有脓血和粘液的部分进行培养MACSSXLD初步鉴定:可疑菌落;EMB-无色或不透明琥珀色;MAC-无色不透明;SS-不透明或透明;XLD-红色菌落20、沙门菌属生化反应:不发酵乳糖或蔗糖;大多数产生H2S;对葡萄糖、麦芽糖和甘露醇发酵伤寒沙门菌产酸不产气外,其他沙门菌均产酸产气;OX-TSI:KA-+(斜面产碱(蔗糖乳糖)、底部产酸(葡萄糖)、不产气、硫化氢+)其他沙门产气IMVIC:-+-+/-;MIU:+--培养特性:兼性厌氧,35~37℃,PH6.8~7.8;对营养的要求不高在肠道选择性培养基上菌落小至中等;透明或半透明,乳糖不发酵;有些能产生硫化氢菌株,在SS琼脂上形成中心黑色的菌落。21、曲霉菌分生孢子头结构要点:分生孢梗茎、顶囊、瓶梗、梗基、和分生孢子链。22、弧菌科菌体短小、弯曲成弧形或短杆状的革兰阴性细菌,直径0.5~0.8μm长度1.2~2.4μm兼性厌氧,发酵葡萄糖,一般不产气,许多菌株生长需要2%~3%氯化钠,钠盐对其生长有促进作用。大部分致病性弧菌具有运动性,主要依靠于位于菌体一端的单根鞘状鞭毛。除了麦奇尼科夫菌以外,大部分致病性弧菌均产生细胞色素氧化酶,还原硝酸盐。大多数氧化酶阳性具有一端单一鞭毛、运动迅速水中多见霍乱弧菌包括:O1群霍乱弧菌;O139群霍乱弧菌;非O1群霍乱弧菌多数能在血平板或普通琼脂平板上生长,在血平板上可呈现α、β或不溶血菌落。氧化酶均阳性(麦氏弧菌除外)O1群产生肠毒素O139群也能产生肠毒素非O1群一般不产生肠毒素生物学特性:革兰色阴性弧形或逗点状在患者米泔样便中,可呈头尾相接的鱼群样排列菌体一端有鞭毛,悬滴观察时呈穿梭样运动有普通菌毛和性菌毛O139群有荚膜。培养特性:营养要求不高,在普通琼脂上生长良好。兼性厌氧。16~44℃可生长,以37℃为宜具耐碱性,在PH6.8~10.2范围内均可生长生化反应:氧化酶阳性发酵蔗糖,动力阳性可以在无盐培养基上生长赖氨酸、鸟氨酸脱酸酶阳性,精氨酸双水解酶阴性检验程序标本直接涂片直接荧光抗体染色碱性蛋白胨水增菌6-8h动力和制动试验凝集试验选择性平板分离(TCBS、庆大霉素平板)可疑菌落、血清凝集初步报告可疑菌落生化鉴定、分型确认报告标本直接检查:涂片染色镜检;动力和制动试验;快速诊断;霍乱毒素的测定分离、培养与鉴定1、将标本直接接种于碱性胨水,或将运送培养基的表层接种于碱性胨水中35℃6~8h后,转种TCBS琼脂平板、4号琼脂平板或庆大霉素琼脂平板,35℃12~18h观察菌落形态2、在TCBS上形成黄色,4号琼脂平板或庆大霉素琼脂平板上呈灰褐色中心的菌落,均为可疑菌落3、用O1群和O139群霍乱菌多价和单价抗血清进行凝集4、结合菌落特征和菌体形态,做出初步报告23、副溶血性弧菌神奈川现象阳性:从腹泻患者中分离到95%以上在wagatsuma琼脂上产生β溶血现象称为….24、弯曲菌属革兰阴性,菌体弯曲呈逗点、弧形、S型、螺旋型或典型的海鸥展翅形。陈旧培养物可呈球形或长丝状。无芽孢。微需氧菌。25、幽门螺杆菌氧化酶触酶脲酶+++26、结核分支杆菌诊断方法(直接检查,培养,免疫学检测)直接检测:抗酸染色和结核菌素试验培养:用罗氏培养基免疫学:结核杆菌抗体检测27、铜绿假单胞菌形态与染色:菌体细长的革兰阴性杆菌,长短不一,成球杆状或长丝状,成双或短链排列。单端1~3根鞭毛,运动活泼。临床分离菌株有菌毛,无芽孢。菌体外可有粘液层培养特性:转性需氧。在普通培养基上生长良好。生长温度范围为20~40℃,最适生长温度为35℃,能在41℃生长,这是与其他假单胞菌的鉴别要点之一。菌落大小不一,多数直径2~3μm,边缘不齐,扁平,湿润,常互相融合。菌落有光滑型、粗糙型和粘液型3种。粘液型菌落较大,边缘透明,中央稍浊。周围琼脂被水溶性色素染成蓝色或黄绿色。在血琼脂平板上产生透明溶血环。在肠道鉴别培养基上生长,24h后形成微小,无光泽、半透明菌落,48h后菌落中心常呈棕绿色。在三糖铁培养基中,不发酵糖类,故不变色。生化特性:氧化酶阳性氧化分解葡萄糖、木糖,产酸不产气,液化明胶。还原硝酸盐并产生氮气。吲哚阴性,利用枸橼酸钠,精氨酸双水解