学习目标:可以运用相关技术解决生产生活中有关微生物分离、微生物培养与计数等实际问题。一、微生物的分离(课本15-16页)1.找出微生物分离的原理?2.根据我们所学的培养基种类,你认为分离的时候一般使用的是什么培养基?3.对微生物进行分类、鉴定的重要依据?4.常用的分离方法?人为提供有利于目的菌株生长的条件(包括营养、温度、PH等),同时抑制或阻止其他微生物生长。固体培养基、选择培养基菌落的形态特征还可以利用电子显微镜观察细菌和支原体等的结构特征平板分离法二.微生物的培养在菌落计数时,每隔24h统计一次菌落数目。选取菌落数目稳定时的记录作为结果,以防止因培养时间不足而导致遗漏菌落的数目。培养不同微生物往往需要不同培养温度。细菌:30~37℃培养1~2d放线菌:25~28℃培养5~7d霉菌:25~28℃的温度下培养3~4d。实例:分离土壤中能分解尿素的微生物1、在该配方中,为微生物生长提供碳源和氮源的是什么物质?2、绝大多数的微生物都能利用葡萄糖,但是,只有能合成脲酶的微生物才能分解尿素,请分析该培养基是否对微生物有选择作用?如果有,是如何进行选择的?葡萄糖、尿素读课本17页表1-2:思考以下问题:培养基的氮源为尿素,只有能合成脲酶的微生物才能分解尿素,以尿素作为氮源。缺乏脲酶的微生物由于不能分解尿素,缺乏氮源而不能生长发育繁殖,而受到抑制,所以用此培养基就能够选择出分解尿素的微生物。三、微生物的计数课本18页1.微生物计数的常用方法?2.平板计数为何计算的是菌落,这样计算的数值和实际比起来是偏大还是偏小,为什么?稀释涂布平板法、显微镜直接计数法,还可以用过滤膜法稀释涂布平板法(也叫活菌计数法)原理:当样品的稀释度足够高时,培养基面生长的一个菌落,来源于样品稀释液中的一个活菌,通过统计平板上的菌落数,就能推测出样品中大约含有多少活菌。统计的菌落往往比活菌的实际数目低。注意事项①为了保证结果准确,一般选择菌落数在30——300的平板上进行计数。②为使结果接近真实值可将同一稀释度加到三个或三个以上的平皿中,经涂布,培养计算出菌落平均数。③统计的菌落往往比活菌的实际数目低。④涂布平板法所选择的稀释度很重要,一般以三个稀释度中的第二个稀释度所出现的平均菌落数在50个左右为最好。1.使用选择培养基的目的是()A.培养细菌B.培养真菌C.使需要的微生物大量繁殖D.表现某微生物的特定性状与其他微生物加以区别2.能合成脲酶的微生物所需要的碳源和氮源分别是()A.CO2和N2B.葡萄糖和NH3C.CO2和尿素D.葡萄糖和尿素当堂训练CD