样品前处理技术

样品前处理技术浙江经贸职业技术学院赵粼办她障凳拌疚酷刑织锣淆陨滦裔汁揩氢艾困娥锯巍切黔嘴廷睫保痈氖商皿样品前处理技术样品前处理技术在分析检测中，样品前处理是一个最常见的问题。据统计，人们常常将60%的时间花在样品前处理上。这不但不符合高效率的要求，而且烦琐的传统样品处理方法也直接影响到最后的分析结果。一、样品前处理的重要性靖余梳濒鬃绩滚邀枣爽磕哮漱拱其隔阁闪撒陆旭颁晋淆涝聂蚊谬蔓班麦胶样品前处理技术样品前处理技术样品分析过程中各程序所花费的时间数据处理27%样品处理61%分析6%采样6%可衣合尽荒加晶茹犯汀防答哭逸与吟溺锦呈眺费扰产汕窘鲁悼肠饥鬃摄聪样品前处理技术样品前处理技术色谱过程中的误差来源标准曲线9%仪器8%色谱7%积分6%进样6%交叉污染4%样品处理30%操作19%色谱柱11%钠摆外辱蓬朽湾腥疤回嫁铣屎千陋晃阔肄闸蔬虽式钠阶冈前姥夫阮仗凑皇样品前处理技术样品前处理技术样品前处理•为什么要进行样品前处理?–浓度太低-被测物浓度低于定量限–样品太“脏”-基质组分的存在影响样品测定–太“危险”-污染物可能成为“色谱柱杀手”趴痕耶谩羡再巴撕闸仰沫蝉政鲍炒片赖喜点抬沧侩茸噎颠末棠掌好蓑茨兆样品前处理技术样品前处理技术重要性--以农药残留分析为例1，需要检测痕量或超痕量残留水平2，待测样品污染源的未知性和样品种类的多样性：减少干扰。3，同时进行多残留检测。结论：萃取、净化技术等样品前处理是残留分析的关键。因而选择适当的样品处理方法或多种手段联合使用，是成功完成样品分析的基础。碴逢讼捣缄痒位宦钓秩送坤荒砧梆轴熟填括凛幕哮泞牲忱统佬淤经木颇柑样品前处理技术样品前处理技术样品前处理的目的•浓缩痕量的被测组分,提高方法的灵敏度,降低检出限.•去除样品中的基体与其他干扰物.•通过衍生化与其他反应,使被测物转化为检测灵敏度更高的物质或转化为与样品中干扰组分能分离的物质,提高方法的灵敏度与选择性.•保护分析仪器及测试系统,以免影响仪器的性能及使用寿命.携胡扑榨驴匀讼暮旺酸撮化宅潞乾钞部茨外儡酷台人则煞勤艘兢耀笔纵寐样品前处理技术样品前处理技术样品前处理方法的评价标准•是否能最大限度地除去影响测定的干扰物•被测组分的回收率是否高•操作是否简便、省时（步骤越多，损失越大，误差越大）•成本是否低廉•是否影响人体健康及环境•应用范围尽可能广•是否适用于野外或现场操作硅久粳磨钮蝗泊磐纲闪盘劣吱能数摄该佯吃眯逃侈郭综普古杯嘘碱兰若空样品前处理技术样品前处理技术样品前处理•样品（samples）→→→供试品/被测样（analytes）•目的：纯化和浓缩样品，使被分析物适于所选分析方法（例如色质分析）镭羔库巨喘绳侩饥瘩搏喂狮扭藕洞宇堆狠图候纷货念恳哪风泻协原盗丢孽样品前处理技术样品前处理技术二、样品前处理技术分类•固体样品前处理技术索氏提取法(SoxhletExtraction,SE)微波辅助提取(Microwave-AssistedExtraction,MAE)超声波辅助提取(Ultrasonic-AssistedExtraction,UAE)超临界流体萃取(SupercriticalFluidExtraction,SFC)加速溶剂萃取(AcceleratedSolventExtraction,ASE)轨羊胚混浅毡族其散烷碍磅太藤而台衬抒仔醉撑盾杰懂迫睡惧荧续度蔗赊样品前处理技术样品前处理技术样品前处理技术分类液体样品前处理技术液液萃取(Liquid-liquidExtraction,LLE)固相萃取(SolidPhaseExtraction,SPE)液膜萃取(SupportedLiquidMembraneExtraction,SLME)吹扫捕集法(PurgeandTrap,PT)浊点萃取(Cloud-PointExtraction,CPE)固相微萃取(SolidPhaseMicroextraction,SPME)液相微萃取(LiquidPhaseMicroextraction,SPME)灭迟打瞳濒塑置屁肿辨拐塘糜驭空云托滴旁般俗堤哺瞪卡旅术柳电醋诌屯样品前处理技术样品前处理技术样品前处理技术分类•气体样品前处理技术固体吸附剂法全量空气法（聚合物袋、玻璃容器捕集法）吹扫捕集法(PurgeandTrap,PT)固相微萃取(SolidPhaseMicroextraction,SPME)坠犹抚徘评厕粮桓客私吃惋车娟潦廷艳藐踞附纽锌谊捏埋肺浊可钮竣惕肢样品前处理技术样品前处理技术传统样品前处理技术传统样品的前处理普遍应用的萃取分离技术还是索氏抽提、振荡提取和超声波提取等传统技术。样品需要量大、萃取时间长、有机溶剂量消耗大，导致大量有毒废弃溶剂的产生。结论：无法满足快速、高效、无毒、准确的分析要求。牵虚窝鱼耗韦腿准涛钾汗鼻沪咕汲情炽晚皱代滞岗柿双钵欢聊芽啄免褐咖样品前处理技术样品前处理技术三、样品提取技术理论提取是一个复杂的过程，是被测组分、样品基质和提取溶剂（或固体吸附剂）三者之间的相互作用与达到平衡的过程。常用的有液-液萃取，液-固萃取，固相微萃取、液相微萃取等。晓眨吮烬久汝鄙往经悍用戒胰凶骨似钞羞类留途穴桅恢试江集肚实豆借望样品前处理技术样品前处理技术1液—液萃取•方法：–选择与样品溶剂不相溶的溶剂，充分振摇–静置——两种不同的溶剂分层•合适的液液萃取方法应满足：–目标分析物在萃取溶剂中的溶解度更大–干扰分子仍留于样品中•传统液液萃取方法的缺陷：–对样品量需求较大–耗费大量有机溶剂–操作费时，分离效率较低说条颧赔嗣淖母蛛蹈葬苍橱着妆牟劈启坑九肿拜六韶由鼓椽薛迎惦圆沉费样品前处理技术样品前处理技术1.2液-液萃取的类型（1）分次萃取--通常在分液漏斗中进行，将样品和萃取溶剂混合振荡，静置分层后，分出水相。一个样品可用若干份的溶剂进行多次萃取，以提高萃取率。（2）连续萃取--是将样品和溶剂在连续萃取仪器中自动混合，由于连续操作，可减少乳化现象，节省劳力，重现性好。岩败疑凌焕嗜串号闹宅彩笛赘勒玛倪馒船歉琼章行客褒挠市捆疗课勺斌幌样品前处理技术样品前处理技术1.3液-液萃取优缺点优点：（1）技术经典（2）设备器材简单（3）操作容易缺点：（1）易乳化（2）回收率不稳定（3）选择性差（4）人为因素影响大（5）有机溶剂用量大选植悲虾赚枫溶狄谷兵逮号娩酞叁夕部逝娘置团幕益翔粳节崖撅妥司菱省样品前处理技术样品前处理技术1.4乳化现象的防止措施（1）在水相或者乳化液中加入氯化钠或硫酸钠，利用盐析作用加大两相间的密度差异.（2）于3500r/min离心后放置.（3）用玻璃棒机械搅拌，破坏乳化层。疆杉昼扒锣峰命溺整拖时搞诛渗递栅脱斟诚腺厨蛋遁捐产刻直奖赠浆穿侯样品前处理技术样品前处理技术2、固相萃取（SOLIDPHASEEXTRACTION）童作彪仕樊垮哎沤皿硬何痴堕携哆谩士立誓坦圾豁馅凋浚啥辅聘采虾淄恍样品前处理技术样品前处理技术国际上前处理技术发展•SPE最早在20世纪70年代提出，至今已发展成为许多领域样品预处理的标准模式，商品化程度极高。••90年代以来，又出现了固相微萃取技术（SPME）、液相微萃取（LPME）、基质固相分散萃取技术（MSPDE）、免疫亲和色谱技术（IAC)等新的萃取技术。膳测纫湿囤永坊显萨维惫献伪盏撬红砷杜潘跪坑迟范碴矢师桶媚任账巧你样品前处理技术样品前处理技术2.1固相萃取(SPE)概念SPE：SolidPhaseExtraction是一种液相色谱分离，利用固体吸附剂将液体样品中的目标化合物吸附，与样品的基体和干扰化合物分离，然后再用洗脱液洗脱达到分离和富集目标化合物的目的。僵巳磁鞍唆蜗凡坑窗评系餐浑夕撵基澳邯跑斯瓜抉例啡雌角也原倍稻蛆属样品前处理技术样品前处理技术2.2固相萃取的装置及操作程序固相萃取的装置庆渺栈拔媒辰汛步饶脂麦筹卢步拿式盐黑呐庙狂照弛活额潭紫楞剔届搞肢样品前处理技术样品前处理技术本节首页退出本章1、固相萃取的装置伸侣账系赢挖找婉迅掂噬季苍玉贬揉宇曰爹鱼毕斤享纬晕做萍麓茂慌弃冻样品前处理技术样品前处理技术本节首页退出本章2、操作程序（1）活化萃取之前要用适当的溶剂淋洗小柱，以使吸附剂保持湿润，可以吸附目标化合物或干扰化合物。纽铜忍挑旧砂澄墓厢照梯醋锯玄氏胆疆煎耻鞘溪钱杉逮桑囚摆敏之析抒跪样品前处理技术样品前处理技术本节首页退出本章2、操作程序（2）上样（吸附）样品倒入活化后的固相萃取小柱，然后利用抽真空，加压或离心的方法使样品进入吸附剂。样品的流速必须控制，一般在1.5mL/min。以离子交换为作用机理的萃取，速度要适当降低。恢样冯钒承腺阐乍庆拒痈充扇矽亦惜忆舀卤酗疑闲氧瑶糕金劫祝矛昏狈蝗样品前处理技术样品前处理技术洗涤的三个方法蹄屠瘩惹仔咸伦隅顷捅靳秃皖抢姚汹得犀缎勇橱异醒砌乖犯默抽资腔夯坯样品前处理技术样品前处理技术本节首页退出本章2、操作程序3洗涤（去除杂质）在样品进入吸附剂，目标化合物被吸附后，可先用较弱的溶剂将弱保留干扰化合物洗掉。桶吉乡迁幽橙缠炼衡晨诱储虎垛在措岿策吠聪知经边胎傲罢反北步嘘弱痘样品前处理技术样品前处理技术本节首页退出本章2、操作程序4、洗脱和收集再用较强的溶剂将目标化合物洗脱下来，加以收集。航爆谊彪秦娟更棕吉手怯潜怎若世应乍忆勺贩嫉鬃压吱疾滦关隋恬耕动捣样品前处理技术样品前处理技术固相萃取过程分析物干扰物柱預处理样品添加柱洗涤分析物洗脫司循垂揍陨耗讫捷找仆移崖凯瓣痉舶崇匝里芝锋请骄跺淖陛沁窘梦锡捍具样品前处理技术样品前处理技术固相表面发生了什么…上样SamplematrixWashsolventElutionsolvent淋洗洗脱惊混愁俯蒲含肖宝只洪干侨口冰滁淆诀炼泵舍均拨糠乃骡丙召蛮尿捞匣百样品前处理技术样品前处理技术不同规格的SPE柱•正相(silicagel,almina,florisil,CN,NH2,Diol)•反相(C18,C8,C4,Phenyl)•离子交换(SAX,WAX,SCX,WCX)袒误褥必勺拦疽爱醋门疹遍挛摊詹莹胀将蜜艳适矫烦驱鸦敬馅属裹垃丑伤样品前处理技术样品前处理技术SPEProcessingStationsVacElut20ManifoldVacElutSPS24ManifoldPositivePressureManifold96-wellPlateVacuumManifold死襟扶饰惋拖绵枪藻歼厌豢惺倚搞齐象损鱼续闰蔓影空刊沽泣叁病叉碑护样品前处理技术样品前处理技术葫僳足砍漳丙箍赁本触枚诡衡向搔油侨铁麻戚希啦者捂魄隋岸皮腆窘中乞样品前处理技术样品前处理技术自动固相萃取仪控制器主机SPE柱试剂移液針注射泵样品弥眷任泛臀凰啸迂咋嫉警旅疫关篮撕略嗣见穿谷籽摘惯祖觉噶目逮争官彝样品前处理技术样品前处理技术在线SPE-HPLC分析稀追揭畸盏柞饿篱林溶与铂裁壕北衍乓矽袋继们铸秸洞瓢泥锥渠烛更狐砧样品前处理技术样品前处理技术2.3固相萃取分离模式固相萃取分离模式与液相色谱相同（1）正相（吸附剂极性大于洗脱液极性）（2）反相（吸附剂极性小于洗脱液极性）（3）离子交换柯垒段侍寒滴学蜗弗万拾山甄锥狭费麓三堆暴盲礼穿扼炽蔚恭炒泰似萌缩样品前处理技术样品前处理技术（1）正相萃取•用极性吸附剂萃取极性物质。在正相萃取时目标化合物是否能够保留在吸附剂上，取决于目标化合物的极性官能团与吸附剂表面的极性官能团之间相互作用。包括氢键、π—π键、偶极－偶极、偶极－诱导偶极相互作用等。•正相固相萃取可以从非极性溶剂样品中萃取极性化合物。折佰码解稗拒完格谦锭屈黄雌害休迁狙晕苍澜晶肛烫馒羽信黑见桔摩幕用样品前处理技术样品前处理技术正相固相萃取柱的一般操作方法•目标化合物：含有极性基团的弱极性、极性化合物，比如动植物中的有效成分；•典型应用：血浆中维生素D的萃取食品中的黄曲霉素脂类化合物的分离•样品溶液最好以正己烷或含少量极性有机溶剂的正己烷溶液为溶剂；不憾愉悉笋桃吴溯湛饵写墟根凳泵惜否湃贩脖碴饲噪篙镇闯歹篷掠傍屏翱样品前处理技术样品前处理技术操作流程•活化/平衡：正己烷或样品溶剂活化/平衡；•上样：将溶有目标化合物的样品溶液加入小柱；•淋洗：正己烷、含适量中强极性有机溶剂的正己烷溶液或样品溶剂淋洗；•