经小鼠初步毒理学实验确定致死量LD,得出LD0=1000mg/kg,LD100=10000mg/kg。在整个实验期间,雌、雄性小鼠分笼饲喂,定时饲喂标准全营养复合饲料,饲养室温度控制在15-30℃,相对湿度为60-85%,小鼠可自由采食并饮水自由。将40只小鼠雌雄分类随机分为5组。利用改良寇氏法[26,27]设计4组剂量组,剂量的设置依据预实验得出的100%致死量LD100为最高值,按照组距等比递增计算得出(见表1)。表1实验分组给药及检测血样情况分组小鼠个数(只)性别检测血样数给药肌注剂量(mg/kg)剂量组分类110雄性51000最低剂量组210雄性52137低剂量组35雌性54570高剂量组45雌性59772最高剂量组510雌性50空白对照组随机选取10只小鼠,雌雄各半,提取其血液样本。其血液的白细胞数目(WBC)、红细胞数目(RBC)、血红蛋白(HGB)、血小板数目(PLT)项目,相关数据如表1所示。本项研究的小鼠HGB、RBC、WBC及PLT项目检测数据正常值参考范围分别为110-143(g/L)、6.36-9.42(1012/L)、0.8-6.8(109/L)、450-1593(109/L)。将表2数据与其相对比可知,实验前各小鼠血液指标均为正常值,且其外在活动也均表现正常。表2饲药前雌雄两组10份小鼠血液样本WBC、RBC、HGB、PLT检测结果序号WBCRBCHGBPLT14.107.70129.00816.0024.507.53125.00898.0035.507.68137.00702.0045.408.42140.00833.0053.207.28136.00825.0064.606.80136.00788.0074.706.55128.00653.0085.307.65139.00850.0096.507.51118.00753.00105.406.82127.00825.00表3是根据实验分组给药的检测血样结果,其中第2组只抽检到4份血样。表3饲药后5组24份小鼠血液样本WBC、RBC、HGB、PLT检测结果编组序号WBCRBCHGBPLT114.207.58115.00404.00124.304.7864.00489.00137.607.84115.00261.00147.2010.59161.001169.001511.709.21130.00852.002612.109.85141.00833.00274.906.3295.00155.002813.709.54141.00960.002a99.607.44110.00662.003107.869.84138.001302.003118.808.71133.001361.003125.808.90138.001040.003137.809.23138.00931.003147.9010.05141.001218.0041517.608.60125.001129.004166.406.58103.00831.0041710.808.92128.001414.0041825.308.72124.00595.0041911.608.50117.001189.005207.808.59124.001001.005219.7010.52165.001620.0052215.7010.38158.001173.005237.0010.08149.001083.005246.809.52136.001317.00一、单因素分析用SPSSStatistics23对5个实验组进行单因素分析,看给药剂量对四个指标是否有显著性影响。操作步骤:1、导入数据2、工具栏,分析-比较平均值-单因素ANOVA检验3、选择自变量和因变量4、点击事后比较,设置如下5、点击继续返回,点击选项,设置如下6、点击继续,点击确定,得出输出结果。输出结果分析由标准差可见,4个指标的组间离散情况是PLTHGBWBCRBC。只有HGB的显著性小于0.05,方差不齐性,其他的显著性均大于0.05,说明方差齐性。样本组间自由度为4,组内自由度为19,查F值界值表可知F表=3.564个指标只有PLT的F值F表,且sig0.05,说明PLT与剂量大小存在显著性差异。二、回归分析将对剂量有显著性差异的PLT做回归分析操作步骤:1、导入数据2、工具栏点击分析-回归-曲线估算,设置如下,进行线性、二次和三次回归分析探索比较分析。3、点击确定,得到输出结果,对比发现三次回归的R方最大,残差最小,故建议采用三次方拟合曲线做回归分析,回归方程为PLT=-1.598E-8*剂量³-0.708*剂量+1209.882。