尿液分析不应忽视显微镜检查

尿液分析不应忽视显微镜检查834700新疆塔城市人民医院曹耀茂新疆塔城地区人民医院张丽娟尿液分析仪是测定尿中某些化学成分的自动化仪器，它是医学实验室尿液自动化检查的重要工具，此种仪器具有操作简单、快速等优点。但是尿液分析仪使用不当和许多中间环节及影响因素都直接影响自动化分析结果的准确性，不仅会引起实验结果的误差，甚至延误诊断因此要求操作者对自动化仪器的原理、性能、注意事项及影响因素等方面的知识在有充分的了解，正确地使用自动化仪器，这样才能使尿液分析仪得出的结果更可靠、准确。尿分析仪检测白细胞和潜血与尿沉渣镜检中的白细胞和红细胞数量经常出现不一致的现象，为此，提出以下几点看法。1尿分析仪用试纸条检测白细胞原理试纸模块中含有吲哚化合物、重氮盐及其它物质，中性粒细胞含酯酶能水解吲哚化合物，其产物与重氮盐反应生成紫色物质，其颜色与酯酶活性成正比，借此估计尿中白细胞的数量。2敏感性由于各厂家的试纸条灵敏度不一样，试纸条结果会出现一定差异。3尿分析仪检测白细胞的影响因素3.1检测需用新鲜尿，及时送检，标本检测前要混匀，不然白细胞放置过久会沉淀，就造成与镜检法不符。3.2试纸条浸入尿中的时间，应严格遵守说明书上的规定；在尿中浸时间过短，反应不能充分进行，过长试剂在尿中扩散，影响结果准确性。3.3试纸条与尿仪不配套的替代品、保存不当或过期变质，均影响结果。3.4由于试纸块只与中性粒细胞的酯酶反应，不与单核细胞、淋巴细胞反应(不含酯酶)，因此在器官移植手术后，结核性肾炎等病时尿中单核细胞、淋巴细胞为主时，也产生假阴性。3.5当尿蛋白含量在3g/L以上，大量葡萄糖、高比重、药物等会使反应敏感性降低或产生假阴性。3.6试纸法检测出白细胞超过镜检的原因多数认为是试纸法检测是中性粒细胞酯酶，当粒细胞破坏、崩解时都能检出，而镜检不能检出。但临床仍以镜检的白细胞数为诊断标准，而目前尚无法证实是酯酶还是其它物质存在干扰。3.7任何引起尿异常颜色的物质、福尔马林等会产生假阳性。4.建议尿10项是半定量检查法，且尿10项检查法敏感性高。临床医生在判定结果的临床意义上应有正确的认识，对一些微量报告应持慎重态度，尤其女性患者，应结合临床症状进一步复查。尿液干化学分析是由“浸渍条”进行的，不同厂家提供许多种类“浸渍条”供选择。这些“浸渍条”或试纸条为一塑料条，上有一个或多个富含化学物质的反应块，尿与试剂块接触后产生显色反应。较常用的试剂条包括下列项目:pH值、亚硝酸盐、比重、白蛋白、葡萄糖、白细胞酯酶、白/血红蛋白、胆红素、尿胆原。对试纸条的要求应与分析仪以及校正带（液）组成标准的检测系统，理应是配套的。因为各仪器组成的检测系统中方法不一定相同，试带量的标准也有不同。如要选用其他厂家生产的代用试带，应先了解其方法是否与仪器配套试带一致。同时要做对比试验，认为无显著差异才能选用。尿液化学分析推荐使用的尿标本为混合均匀的第一次晨尿（浓缩8h）不离心，保存于15～25℃，应在采集后2h内检测。如标本不能立即运送和检测，采集后应置冰箱（2～8℃），尿的组分如胆红素和尿胆原不稳定，细菌可分解葡萄糖，如尿放置不用，其pH会改变。尿液潜血检查是尿液检验中一必不可少的项目，常用的检验方法有尿液分析仪潜血反应和尿液显微镜检查红细胞（镜检RBC）两种。由于显微镜检查对鉴别肾小球性与非肾小球血尿有重要的临床价值，故有学者提出显微镜检查是尿液红细胞检验的“金标准”，是尿液分析仪无法替代的。但是，近年来随着尿液分析仪的迅速普及，测量参数向着快速、简便、准确的方向发展，为临床提供了好的诊断依据；显微镜检查耗时费力，许多人不愿意做尿液沉渣检查。因而在一些医院尿液显微镜检查有逐渐被尿液分析仪替代的趋势。本人就尿液分析仪潜血反应和尿液显微镜检查红细胞探讨几点看法。1.尿分析仪用试纸条检测红细胞原理尿液分析仪使用的是干化学试纸法，是根据多联试带上各模块与尿液成分发生化学反应后颜色变化的深浅来检测尿液中的某化学物质，如直接检测红细胞、白细胞的胞质内涵物，间接推断细胞的有无。尿液分析仪潜血反应原理是：血红蛋白（Hb）中亚铁血红素的过氧化物酶样活性可使过氧化物分解释放出新生态［O］，后者氧化底物邻甲苯胺变成邻联甲苯胺发生由黄色→草绿色→深蓝色的颜色变化。尿液显微镜检查则是通过显微镜的放大作用直接将细胞等有形成分直观真实地呈现在镜下，是对底物的真实反映。2.尿分析仪检测红细胞的影响因素2.1假阳性即尿液分析仪潜血反应阳性，镜检阴性，其常见原因有：（1）血红蛋白（Hb）尿液分析仪潜血反应既能与完整的RBC发生阳性反应，也可与RBC溶解释放的Hb发生阳性反应，而显微镜只能检出尿中未溶解的RBC。健康人尿中Hb含量极微，定性为阴性。疾病时，尿中Hb有两个来源：一是发生血管内溶血，血浆Hb超过了结合珠蛋白的结合能力，游离Hb从尿中排出。另一个是尿路（尤其是上尿路）出血，RBC在高渗或（和）低渗时破坏Hb逸出。此时，尿液分析仪潜血反应阳性，但尿沉渣镜检不见RBC或仅见RBC碎片。（2）肌红蛋白（Mb）分子中也含有血红素基团，具有过氧化物酶活性。Mb主要存在于心肌和骨骼肌组织中，正常人尿中含量甚微，不能检出。当心肌或骨骼肌发生严重损伤时，血浆Mb增高，经肾脏排泄，使尿液Mb含量增高，故潜血反应呈阳性，镜检RBC为阴性。（3）某些患者尿液中含有对热不稳定酶，也可使试剂块发生颜色改变，出现潜血反应阳性，镜检为阴性。（4）某些氧化性污染物，例如次氯酸盐会导致潜血反应假阳性。（5）菌尿尿液是细菌良好的培养基，菌尿时有些细菌会产生氧化性物质，使得试剂块发生颜色变化，导致潜血反应阳性，镜检RBC为阴性。此外，微生物过氧化酶的侵入也可引起假阳性。（6）长时间存放及高温实验证明，标本不新鲜，存放时间长或高温存放，使潜血反应的阳性率相对增高，而RBC镜检相应减少，测试结果极有可能出现假阳性。因此，建议尿液标本存放时间不得超过4h。（7）尿试纸条的超期使用或被污染以及不妥善保存和操作方法的不正确，均可造成测试结果假阳性。（8）尿液分析仪灵敏度过高（0.2mg/dl出现++），“级差”范围太大（0.8～50mg/dl级为+++），常会遇到仪器测试为++，而镜检测试红细胞为阴性，临床上又找不到任何导致血红蛋白尿原因的情况。2.2假阴性即镜检阳性，尿液分析仪潜血反应阴性，其常见原因有：（1）食物或药物的影响：由于饮食或药物使尿液呈碱性时，RBC溶解破裂，形成褐色颗粒，潜血反应呈阳性，而镜检呈阴性。（2）VitC尿液中大量存在时，能竞争性夺取反应产生的氧，引起假阴性反应。（3）高比重、高蛋白尿样降低了试剂块潜血反应的灵敏度，使潜血反应出现假阴性。（4）尿液中黏液成分增多，使RBC被包裹起来，试剂接触不到Hb，而使潜血反应呈现假阴性。2.3离心对结果的影响离心时，如速度过快，可使有形成分破坏；但速度过慢，当每毫升尿液中的RBC在5000以下时，沉渣中可能找不到RBC，以至把隐匿型肾小球肾炎漏掉，因而在对检验结果有怀疑时，可用潜血反应证实。3.建议尿液分析仪法检测尿中红细胞异常敏感，有时可与镜检结果存在差异，要充分考虑影响测定结果因素，并结合临床进行全面分析，原则上尿液分析仪潜血反应阳性结果都应以显微镜法复检，这是做好尿液检验质量保证的重要环节和关键所在。对于尿液分析仪法测定的阴性结果与镜检不一致的也应复查，以确保测定结果的准确可靠。迄今为止，没有一台仪器的检测结果能完全替代显微镜，尿沉渣镜检以其独特的临床价值仍是尿液分析中不可缺少的检查手段。