夏枯草对临床前期自身免疫性甲状腺炎患者辅助性T细胞免疫机制的影响

1夏枯草对临床前期自身免疫性甲状腺炎患者辅助性T细胞免疫机制的影响一、研究前景分析1、国内外同类项目研究现状自身免疫性甲状腺炎（AIT）是一组临床表现迥异，却有着相似遗传背景和免疫异常的异质性疾病[1]，包括自身免疫性甲状腺炎(AIT)、萎缩性甲状腺炎(AT)、无痛性甲状腺炎和产后甲状腺炎(PPT)，统称为自身免疫性甲状腺炎(AIT)。AIT是甲状腺疾病中的常见病，患病率占人群的1％-2％,大多数患者处在临床前期（即甲状腺功能正常期）,部分进展到甲状腺功能减退期引起机体一系列的代谢紊乱。即使是临床前期AIT患者有存在很多的危害，包括伴发其他自身免疫性疾病（Addison病、风湿性关节炎等）、增加肿瘤风险[2]、对女性生殖健康的影响[3]等疾病。目前对于临床前期AIT患者的干预手段如甲状腺激素、糖皮质激素、硒、手术等，由于作用不持久或副作用大等原因而不适宜运用到临床前期患者,所以寻找一种更为有效、安全、方便的药物非常必要。夏枯草为唇形目唇形科植物，味苦，辛，性寒，入肝、胆经。具有清泄肝火、散结消肿、清热解毒、祛痰止咳、凉血止血的功效，《神农本草经》首载“主寒热、瘰疬、鼠瘘、头疮，破症，散瘿结气，脚肿湿痹”。《滇南本草》则录有“祛肝风，行经络，治口眼歪斜。行肝气，开肝郁，止筋骨疼痛、目珠痛，散瘰窃、周身结核”之效。现在，夏枯草临床配合他药应用极其广泛。近年诸多学者从现代药理入手研究夏枯草的有效成分，明确了夏枯草具有抗病毒、免疫抑制活性、抗氧化和清除自由基、抗肿瘤等药理作用。有学者报道[4]夏枯草的免疫抑制和抗炎作用可能与其活性成分迷迭香酸和熊果酸等有关。王文佳等[5]发现复方白毛夏枯草对实验小鼠部分免疫功能具有不同程度的促进作用。Han等[6]发现夏枯草水提取物可通过调节核因子（NF）-kB和丝裂原激活蛋白（MAP）激酶活性来刺激巨噬细胞活性，明显上调模型小鼠外周血单个核细胞（PBMC）中γ-干扰素(IFN)、IL-12和颗粒裂解肽（GLS）mRNA表达，下调IL-10mRNA表达，证明其可增强耐多药肺结核（MDR-TB）感染小鼠的细胞免疫功能。杨坤等[7]发现联用夏枯草口服液较单用抗甲状腺药组治疗后甲状腺均有不同程度缩小，甲状腺上动脉管径变小、血流速度及血流量逐渐下降。刘婧茹等[8]发现夏枯草胶囊联合优甲乐可使桥本甲状腺炎甲状腺功能减低患者的TPO-Ab、TG-Ab和Thl7细胞水平降低，并改善患者自身体内的免疫状态。但是目前尚无单用夏枯草对AIT患者辅助性T细胞免疫功能影响的研究报道。本课题设计的目的是观察单药夏枯草对辅助T细胞因子的影响，来揭示其免疫调节的可能机制。目前有关AIT的早期危害尚未引起临床医师的足够重视，国内外普遍认为对于AIT甲状腺功能正常期即使甲状腺轻度肿大的患者也无需治疗[9]，根据流行病学调查发现临床前期的AIT患者却以年2-4%的比率进展到明显甲状腺功能减退[10]，基于这个现状笔者近年来通过临床应用夏枯草口服液对部分临床前期2AIT患者进行早期干预，发现该药有明显降低该类患者TPO-Ab及TG-Ab水平的作用,随访2年未见甲状腺功能异常，基于夏枯草单味中药的这种独特疗效,本课题拟从AIT患者免疫紊乱发病机制入手，观察临床前期AIT患者外周血IL-4,INF-γ,IL-17水平的变化情况以及应用中药夏枯草后对上述细胞因子和甲状腺相关抗体的影响，初步分析并探讨其对该类患者辅助性T细胞免疫调节作用的可能机制。AIT的发病机制主要是自身免疫，表现为Thl/Th2平衡向Th1发生了漂移，Thl类细胞因子占据优势[12]。Th细胞分化为Th1和Th2[11]，Th1参与细胞免疫及迟发型超敏性炎症反应，主要表达和分泌IL-2、INF-γ和白三烯（LT）等，Th2细胞可辅助B细胞分化为抗体分泌细胞，与体液免疫应答有关，主要表达和分泌IL-4、IL-5、IL-6和IL-13等。IFN-γ是Thl细胞的代表性因子,可以通过增强甲状腺上皮细胞组织相容性抗原-Ⅱ类抗原的表达，激活免疫细胞，诱导细胞毒T细胞和B细胞的增殖、分化、成熟，促进自身抗体的产生,损伤甲状腺滤泡细胞。IL-4作为Th2类细胞因子，可诱导B细胞增殖、分化和成熟，促使其产生IgE和IgG等抗体，并抑制Thl型自身反应性T细胞分化激活和介导的免疫反应，从而使Thl/Th2细胞因子的平衡向Th2型细胞因子优势发展。Thl7细胞作为独立效应的CD4+T细胞亚群是近年来研究的热点，IL-17是其主要表达和分泌的细胞因子。现已证明Th17细胞及其细胞因子参与了多种自身免疫性疾病的发生过程。吴汉妮等[12]发现是IL-23、IL-17在HT患者甲状腺组织中的协同过表达，提示IL-23/IL-17可能参与了AIT的免疫病理过程。宋进展等[13]发现AIT患者Th17的百分率与TPO-Ab、TG-Ab水平之间呈显著正相关。Takashi等[14]研究发现Thl/Th2比值高低可能与AIT的严重性相关，Thl7和Thl细胞制约平衡可能协同诱导AIT的发生发展。同时我们拟通过本课题揭示常规超声征象、弹性评分与自身抗体、Th相关细胞因子的关系。国内贾建伟等[15]研究认为，AIT的声像图表现与其病理形态变化相一致。弹性成像是近年来发展的一项新技术，能反映被测组织的弹性方面的信息，弹性图分级主要通过观察甲状腺实质颜色的不同来判断组织硬度的变化。该技术可以更好地反映组织的软硬度，指导AIT的临床分期。同时本课题可以评价夏枯草对不同弹性分级AIT患者的干预效果。AIT起病隐匿，病程较长，发病早期患者常会疏于治疗。本课题从“已病防传”的治未病的理论基础出发，早期诊断和早期干预，预防该病的发生、发展及延缓其向甲状腺功能减退症演变，防止其向甲状腺结节、甲状腺癌发展。2、市场需求情况AIT是甲状腺疾病中的常见病，很大部分患者处在甲状腺功能正常期，如能给予合理干预，将减少进展到甲状腺功能异常和各种并发症的发生。本研究有助于AIT患者的临床转归，并且探讨中药夏枯草的现代免疫调节功能的作用靶点，为便在临床前期AIT患者中推广使用。33、研究开发意义随着现代科技的飞速发展和医学检测手段的不断更新，AIT的检出人群越来越多，有关AIT临床前期对患者的心理危害及潜伏性的损伤必定会引起医患双方的高度关注。中医学一贯注重对疾病的预防，早在《内经》时代就明确提出“治未病”学术思想。防病未然、防微杜渐、早期干预是中医“治未病”思想的精髓。当今医学的发展正在由“病”向“人”为中心转变，以预防为主的医疗策略和服务模式众望所归，有着几千年发展历史的中医学蕴含着丰富的预防医学思想和行之有效的防病治病手段。试想，如果能从单味中药中研究开发出就AIT患者临床前期状态针对其主要发病机制对辅助性T细胞能发挥有效免疫调节作用、减少免疫损伤、防止病情进展、改善患者预后、减轻患者心理及生理病理负担的天然药品，不乏有重要的研发意义和实用价值。不仅如此，本课题研究的可能成功对于挖掘祖国医药宝藏、创新民族文化、改善AIT患者健康状况、减轻国家社会及个人经济负担等方面亦有裨益。4、主要参考文献[1]李玉姝,单忠艳.自身免疫性甲状腺疾病的诊断和治疗.国际内分泌代谢杂志,2012,32(3):155-158.[2]AhmedR,A1-ShaikhS,AkhtarM.Hashimotothyroiditis：acenturylater.AdvAnatPatho1.2012.19:181.186．[3]VandenBoogaardE,VissenbergR,LandJA,eta1.Significanceof(sub)clinicalthyroiddysfunctionandthyroidautoimmunitybeforeconceptionandinearlypregnancy:asystematicreview．HumReprodUpdate,2011,17:605-619．[4]HuangN，HauckC，YumMY．RosmarinicacidinPrunellavulgarisethanolextractinhibitsLPSinducedprostaglandinE2andnitricoxideinRAW264.7mousemacrophages，etal.AgricFoodChem,2009,57(22):10579-10589．[5]王文佳,李海峰,欧江琴,等．复方白毛夏枯草免疫调节作用的实验研究.时珍国医国药,2010,21(1):107-108．[6]HanEH,ChoiJH,HwangYP,eta1.ImmunostimulatoryactivityofaqueousextractisolatedfromPrunellavulgaris.FoodChemToxicol,2009,47:62-69．[7]杨坤,郭昆全,吴海燕,等。夏枯草口服液在甲状腺功能亢进症患者中的应用。中国中药杂志.2007,32:1706-1708.[8]刘婧茹,王清.夏枯草胶囊对自身免疫性甲状腺炎患者自身抗体及Thl7细胞的影响.中国老年学杂志.2012,32:5413-5415.[9]陈灏珠,林果为.实用内科学.北京:人民卫生出版社,2011:1283-1285.[10]汪毅,刘纯.CD4+T细胞家族与自身免疫性甲状腺疾病.重庆医学,2011,404（29）：2999-3001.[11]何维.医学免疫学.北京:人民卫生出版社,2010:181-190.[12]吴汉妮，余玲，屈新才，等．IL-23和IL-l7在桥本氏甲状腺炎患者甲状腺组织中的表达．细胞与分子免疫学杂志,2008,24(12):1l82-l184．[13]宋进展,吴汉妮,钱伟.慢性淋巴细胞性甲状腺炎患者外周血Thl7的检测及意义.细胞与分子免疫学杂志,2009,25(10):927—931．[14]TakashiN,MikioW,NaoyaI,eta1.InceasesoftheTh1／Th2cellratioinsevereHashimoto,sdiseaseandintheproportionofThl7cellsinintractableGraves’disease.Thyroid,2009,19(5):495-501．[15]贾建伟,温凤萍.115例自身免疫性甲状腺炎的超声诊断分析.中国当代医药,2010,17(7)：75-76．二、研究内容1、研究内容自身免疫性甲状腺炎主要的免疫机制是辅助性T细胞Th1、Th2、Th17细胞及相关细胞因子表达和分泌异常。夏枯草具有免疫调节、抗肿瘤等药理作用，近年来笔者通过临床应用夏枯草口服液对部分临床前期AIT患者的观察，发现有明显降低该类患者自身抗体水平的效果。本课题拟以夏枯草为研究对象,从治未病的角度出发,由免疫机制入手,探讨夏枯草影响该类患者辅助性T细胞免疫调节功能的可能机制。(1)收集符合纳入标准的临床前期AIT患者80例，检测指标：采用化学发光法检测TPO-Ab,TG-Ab,FT3、FT4、TSH；采用酶联免疫法检测IL-4,INF-γ,IL-17；甲状腺常规超声和弹性成像评分变化以及血常规、肝肾功能。(2)采用临床顺序随机方法将80例临床前期AIT患者分为对照组和干预组。对照组未给予药物，干预组给予夏枯草口服液10mlbidpo；干预时间为12周，2组患者治疗前后分别检测上述指标。（3）统计学分析夏枯草对临床前期AIT患者辅助性T细胞因子及自身抗体的影响结果。2、拟解决的关键问题（1）观察临床前期AIT患者超声征像、弹性分级与Th细胞因子和自身抗体的相关性。（2）观察夏枯草干预前后临床前期AIT患者Th细胞因子和自身抗体的变化规律。（3）评估夏枯草是否达到临床治未病的要求以及临床使用安全性。3、预期研究目标（1）预期可获得夏枯草对临床前期AIT患者Th细胞因子和自身抗体的影响结果。（2）预期可获得临床前期AIT患者甲状腺超声表现与Th细胞因子和自身抗体的关系。5（3）发表高质量学术论文1篇。4、主要创新点（1）本项目