山东省单县鸡大肠杆菌病病原的分离与鉴定及药敏试验

本科毕业论文（设计）题目山东省单县鸡大肠杆菌病病原的分离-与鉴定及药敏试验系部动物医学系专业动物医学年级2007级学号222007602033167姓名王亚指导教师唐建华（副教授）成绩2011年5月23日目录任务书.............................................................................................................1文献综述.............................................................................................................2开题报告.............................................................................................................6正文.............................................................................................................8摘要.............................................................................................................8引言......................................................................................................8材料......................................................................................................9方法....................................................................................................10结果....................................................................................................11讨论与分析............................................................................................14参考文献................................................................................................16致谢..................................................................................................17指导教师评阅表.....................................................................................18交叉评阅表.................................................................................................19答辩记录表................................................................................................201西南大学本科毕业论文（设计）任务书论文（设计）题目山东省单县鸡大肠杆菌病病原的分离与鉴定及药敏试验系别、专业动物医学系动物医学学生姓名王亚学号222007602033167指导教师姓名唐建华开题日期2010年11月10日论文（设计）的主要内容（技术指标）与要求：鸡大肠杆菌感染是危害养鸡业的主要细菌性传染病，无菌采取单县各大鸡场中疑似大肠杆病死雏鸡肝、脾、肺等脏器病料，通过结合流行病学、临床学、病理学、生物化学和传染病学，进行分离与鉴定，最终确诊为鸡大肠杆茵病。从部分养鸡场分离出的细菌进行药敏试验，通过药敏试验筛选出敏感药物，为治疗与预防提供理论依据和实际应用参数。独立完成课题研究和论文撰写，要深入实地调查了解并收集相关数据资料进度安排2010.10—2010.11查阅资料，选题；2010.11开题；2010.12—2011.03调查研究，实验诊断，完成论文初稿2011.03—2011.04补充数据材料，完成论文；2011.05论文答辩；系意见：注：1、任务书由指导老师填写。2、任务书必须在第七学期13周前下达给学生。2文献综述我国鸡大肠杆菌病病原的分离与鉴定及药敏试验王亚西南大学荣昌校区动物医学系，重庆荣昌402460摘要：大肠杆菌病是在世界范围内影响养殖业发展的主要细菌病之一,常招致巨大的经济损失，有效防治大肠杆菌病一直是养殖业的一项重要课题。近几年随着我国养殖业迅速发展和集约化程度的大大提高,大肠杆菌病流行势头愈加迅速。无菌采取病死雏鸡肝、脾、肺等脏器病料，进行大肠杆菌病原的分离培养与鉴定。本综述主要从大肠杆菌病的概念与临床症状入手，梳理总结了当前有关专家学者对鸡大肠杆菌病相关内容的研究，拟从中发现研究空白，为论文的写作提供依据，以便于进一步对山东省单县鸡大肠杆菌病病原的分离与鉴定奠定基础。关键词：大肠杆菌分离与鉴定药敏试验综述大肠杆菌病是家禽中最常见的病原菌之一。由于该病在一些养殖场中严重发生，兽医临床上抗菌药物不得不大量地被应用，导致大肠杆菌耐药菌株不断出现，耐药谱不断扩大，形成恶性循环；同时加剧了抗菌药物在畜禽体内的残留，给养禽业的持续发展和人类的身体健康带来潜在危害。目前，国内有关专家学者对大肠杆菌病做了大量的研究，涉及到的研究成果也颇为丰富，为我国鸡大肠杆菌病的研究提供了重要的理论参考。1.大肠杆菌病的概念与临床表现大肠杆菌病是由某些血清型的致病性大肠埃希氏菌(Escherichiacoli，E．coli)引起的禽类肠道传染性疾病的总称[1]。本病为革兰氏阴性、兼性厌氧性、无芽孢的短杆菌，具有周鞭毛和菌毛[2]。可以引起胚胎死亡、脐炎、败血症、肉肿、全眼球炎、气囊病、腹膜炎、输卵管炎等一系列病症，并且还常常与病毒和其它细菌性疾病并发。病鸡精神沉郁,闭目呆立或蹲地缩成一团,羽毛蓬乱,两翼下垂,饮食欲减退或废绝。部分病禽跛行,跗关节肿胀,失明,张口喘息,呼吸困难,有的排黄绿色稀粪或血粪,死前鸡冠、颜面呈紫色[3]。2.大肠杆菌给人类和动物造成的危害根据鞠洪涛的《大肠杆菌耐庆大霉素基因定位》,可以清晰的看到，全球每年因感染产毒素性大肠杆菌至少可导致6.5亿人发病,并引起约80万5岁以下儿童死亡。其中，我国许多地区大肠杆菌在腹泻病人的病原谱中占首位[4]。而恽时3锋，潘震寰等人分析认为,O157型大肠杆菌曾在日本等国家引起食品污染事故,致病性较严重,通常会导致患者腹泻、脱水甚至死亡。在兽医临床上,致病性大肠杆菌一年四季均可致病,其中，仅鸡的发病率就达到10%～69%,死亡率约为3.8%～72.0%[5]。另外，张敬礼，王双山在《大肠杆菌病的防治研究》提出，该病在所有家禽群中，发病率均高、病程长，且因与其他呼吸道疾病如慢性呼吸道疾病混合或并发感染，是大肠杆菌的主要特征。大肠杆菌病不但造成各种家禽生产能力下降，而且还影响到产品质量。尤其是20世纪80年代以来,随着我国养殖业集约化程度的不断提高,畜禽大肠杆菌病在各地的流行趋于严重,在受不利环境因素和其他传染因子应激的畜禽群中,大肠杆菌感染一直居于首位，严重影响着我国畜牧养殖业的发展[6]。3.大肠杆菌病流行特点高福、苏敬良指出，大肠杆菌是哺乳动物和禽类肠道的正常菌群，并且在饲料、饮水、鸡的体表、孵化场、孵化器等各处普遍存在，该病主要是由大肠杆菌污染饲料、饮水、用具及环境后，细菌经鸡的呼吸道、消化道和种蛋等途径进行传播[7]。而顾城均、吴光明则认为，大肠杆菌发病无明显季节性，一年四季均可发生。尤以冬季和气候多变季节高发，各种日龄、品种的家禽均可发病。同时，大肠杆菌发病率与死亡率因受各种应激因素影响而有较大差异[8]。另外，大肠杆菌在饲料、饮水、鸡的体表、孵化场、孵化器、鸡舍等地方普遍存在，其中在种蛋表面、种蛋内、孵化过程中的死胚分离率较高。若混有其他病原体感染因素的影响，则大肠杆菌感染率更为严重。如与禽流感、家禽传染性支气管炎、败血支原体、传染性鼻炎、传染性法氏囊、禽霍乱、葡萄球菌等病并发，大肠杆菌发病率就较高[9]。4.大肠杆菌的分离与鉴定及药敏试验研究进展：众多专家对大肠杆菌的分离与鉴定的方法和结果颇为相似，但药敏试验的结果差异很大。兰罗勋、陈红等人的研究中得出结果为：该菌对氟苯尼考、羟苄青霉素、痢特灵高度敏感，对庆大霉素、大观霉素、四环素、卡那霉素中度敏感，对恩诺沙星、链霉素、氧氟沙星、新霉素、复方新诺明不敏感，青霉素、头孢唑啉无抑菌4作用[10]。马萍等人研究结果表明：大肠杆菌对痢特灵、新霉素，阿米卡星、庆大霉素十分敏感，绝大多数菌株对羧苄青霉素、复方新诺明、氨苄西林等敏感[11]。王贵升等人认为：同一血清型的分离株对药物的敏感性也表现出不同程度的差异性。O2型的SD9菌和SD10菌共敏感药物为63.64,078型的SD2、SD3和SD5菌共敏感药物为68.18，O138型的SD7菌和SD8菌共敏感药物为77.27[12]。5.大肠杆菌病防治现状刘倍增、张强认为，抗菌药物和大肠杆菌疫苗在养殖业上广泛使用,极大地促进了规模化、集约化畜牧业的发展。但抗生素的广泛持续和不当使用造成了畜禽产品中的药物残留,抗菌药物残留除了可能对消费者造成直接的急、慢性毒性外,还有可能产生过敏反应,随着抗生素使用时间的延长,多重耐药性的问题越来越严重,目前我国家禽大肠杆菌耐药性严重而复杂,几乎对所有的抗菌药物都已经产生了耐药性[13]。中国兽医药品监察所对其保存的大肠杆菌进行药敏试验发现,20世纪50年代分离的菌株基本上不存在耐药性问题；20世纪60年代的菌株耐药谱也较窄,在15种目前常用的抗生素中仅对链霉素和四环素具有耐药性,而且耐药性仅为20%。另外，刘栓江、杨汉春、王建舫提出，从20世纪70年代起,大肠杆菌的耐药性迅速增加,并出现了多重耐药的菌株;20世纪80～90年代分离的菌株多为多耐药菌株；20世纪90年代分离的菌株有87%可同时耐5种以上的抗菌素[12]。家禽大肠杆菌耐药性产生的速度极快,与我国目前的家禽养殖环境、养殖方式和技术水平密切相关。通过在山东地区对盐酸环丙沙星进行连续3年的耐药性调查发现,1996年盐酸环丙沙星治疗大肠杆菌的有效率为100%,1997年为63.7%,而其毒力因子就能成为致病的菌株，故迄今对其所引起的疾病尚无理想的疫苗来预防[14]。6.山东省单县鸡大肠杆菌病研究现状近年来，山东省单县畜牧业日益扩大。单县在畜牧业十二五发展规划中指出，立足资源优势，着力推进“12322工程”。即一个中心，以保持畜牧业的持续稳定健康发展为中心；两个确保，确保不发生重大动物疫情，确保畜产品质量安全；三个创新，即创新观念，用工业化管理的理念谋划发展畜牧业[15]。5“十一五”期间，畜牧业保持持续健康的发展态势，畜牧业已经成为单县农业中的一个大产业，成为建设现代农业增收的主导产业和重要渠道[16]。单县畜牧局贾成立指出（2010），近年来鸡大肠杆菌病严重威胁着家禽业的发展，给养殖户造成较大的经济损失。市场上治疗大肠杆菌病的药品繁多，其主要成分往往不写