实验6-a-淀粉酶的固定化及淀粉水解作用的检测

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第二部分:酶的应用实验目的:1.制备固定化a-淀粉酶2.进行淀粉水解的测定知识回顾:1、在果汁生产中利用________,可以提高果汁的产量和质量,其原理是___________。你还能画出出汁量和温度关系的曲线吗?2、洗衣粉中添加________,可以更有效地清除顽渍。常用的酶制剂有_________________四类。1、酶制剂的概念和种类(一)酶制剂含有酶的制品①定义:多酶片、加酶洗衣粉中的蛋白酶和脂肪酶②种类:A、液体酶制剂治疗某些胃病的胃蛋白酶液B、固体酶制剂2、酶的生产①提取法定义:采用一定的技术直接从动植物或微生物的组织、细胞中将酶提取出来优点:简单易行,在动植物或微生物资源丰富的地区具有应用价值实例:在屠宰厂,可以从家畜胰脏中提取出胰酶;在水果加工厂,可以从菠萝皮中提取出菠萝蛋白酶缺点:要有充足的原材料,广泛应用受到限制②发酵法——常用方法定义:通过微生物发酵获得所需要的酶。如果是胞外酶,可以从发酵液中直接提取;如果是细胞内酶,则可将细胞弄碎再经过提取纯化而得到。易培养、繁殖速度快、便于大规模生产。优点:提取方式:在食品、化工、轻纺、医药等领域大规模使用酶制剂,说明酶制剂使用有很多优点,你能思考后举出一些吗?催化效率高、低能耗、低污染等。酶制剂的使用有缺点吗?3、酶制剂的优点1、通常对强酸、强碱、高温和有机溶剂等条件非常敏感,容易失活;2、溶液中的酶很难回收,不能被再次利用,提高了生产成本;3、反应后会混在产物中,可能影响产品质量。(难分离)4、酶制剂的缺点1、固定化酶技术。即将酶固定在一定空间内的技术(如固定在不溶于水的载体上)。2、固定化酶技术的优点:(1)使酶既能与反应物接触,又能与产物分离;(2)固定在载体上的酶可以被反复利用。(二)固定化酶固定化酶:就是将水溶性的酶用物理或化学的方法固定在某种介质上,使之成为不溶于水而又有酶活性的制剂。固定化的方法:吸附法、交联法、包埋法、共价偶连法等3.固定化酶方法实验原理:本实验是用吸附法将a-淀粉酶固定在石英砂上,一定浓度的淀粉溶液经过固定化酶柱后,可使淀粉水解成糊精,用淀粉指示剂溶液测试,流出物呈红色表明水解产物糊精生成淀粉α-淀粉酶糊精β淀粉酶葡萄糖糖化淀粉酶麦芽糖这里使用的是枯草杆菌的a-淀粉酶,其作用的最适温度为50~75℃;最适PH为5.5~7.5遇碘显蓝色遇碘显红色遇碘不显色(三)实验反应柱固定化酶气门心夹子5ml注射器步骤:1.将灌注了固定化酶的注射器放在注射器架上,用滴管滴加淀粉溶液,使淀粉溶液以0.3ml/min的流速过柱.在流出5ml后接收0.5ml流出液,加入1~2滴KI-I2溶液,观察颜色.用水稀释1倍后再观察颜色.反应柱固定化酶气门心夹子5ml注射器淀粉课后练习1.如何证明洗涤固定化酶柱的流出液中没有淀粉酶?2.耐高温的淀粉酶有哪些可能的用途?可在试管中加入1ml可溶性淀粉,再加几滴淀粉酶柱流出液,保温几分钟后用碘液检验。如仍显蓝色,则流出液中没有淀粉酶了。可以在高温下使淀粉水解快,而且酶不会因高温上而失活,所以可在一些需要高温加热同时又要水解淀粉的反应中使用。1、研究认为,用固定化酶技术处理污染物是很有前途的。如将从大肠杆菌得到的磷酸三酯酶固定到尼龙膜上制成制剂,可以用来降解残留在土壤中的有机磷农药,与用微生物降解相比,其作用不需要适宜的()A、温度B、PHC、水分D、营养D2、目前,日用化工厂大量生产的酶制剂,其中的酶大都来自A、化学合成B、动物体内C、植物体内D、微生物体内D3.酶的固定方法不包括()。A.将酶吸附在固体表面上B.将酶相互连接起来C.将酶包埋在细微网格里D.将酶制成固体酶制剂,如加酶洗衣粉中的酶D5.关于固定化酶的叙述不正确的是()。A.既能与反应物接触,又能与反应物分离B.固定在载体上的酶可被反复利用C.可催化一系列反应D.酶的活性和稳定性受到限制C

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