实验八植物抗逆性的鉴定(电导仪法)1.实验目的■学习电导仪法测定膜相对透性的方法■理解逆境对植物膜透性的影响2.实验原理植物细胞膜是细胞与外界环境的一道分界面,对维持细胞的微环境和正常的代谢起着重要的作用。在正常情况下,细胞膜对物质具有选择透性能力。当植物受到逆境影响时,如高温或低温,干旱、盐渍、病原菌侵染后,细胞膜遭到破坏,膜透性增大,从而使细胞内的电解质外渗,以致植物细胞浸提液的电导率增大。膜透性增大的程度与逆境胁迫强度有关,也与植物抗逆性的强弱有关。伤害率本次实验测定高温对植物细胞膜的伤害电导率K=GQQ:电极常数(电导仪本身决定)G:实测电导值伤害率(%)=处理电导率煮沸电导率×100%3材料、仪器设备及试剂(一)材料:梧桐叶片;(二)仪器设备:1.电导仪;2.打孔器;3.真空干燥器;4.恒温水浴锅;4实验步骤1)打取叶圆片:自选叶片,洗净吸干,避开叶脉打取30个叶圆片,放入1支试管,再打取30个叶圆片,放入另1支试管,依此类推,每支试管皆放入30个叶圆片;2)试管分别编号为:1A,1B,2A,2B……5A,5B,每管加入15ml纯水,抽真空15min;3)水浴处理:5组(1A1B,2A2B……5A5B)分别在60℃水浴0,10,20,30,40min,取出后用自来水冷却10分钟;高温处理时间(min)010203040重复1管号1A2A3A4A5A重复2管号1B2B3B4B5B4)测量电导率:用电导仪测定浸泡溶液的电导率(分组单独领取电导仪,详细使用方法分组指导);5)煮沸电导率:测过电导率的10支试管再放入100℃沸水浴中15min,以杀死植物组织,取出试管后用自来水冷却10min,测其煮沸电导率。电导仪(conductivitymeter)的使用方法电源开关“开”,预热;打开(测量/校正)拨至“测量”;(补偿/一般)拨至“一般”;(×1/×10-2)拨至“×1”;量程范围选“×103”,使待测值介于0.1~0.999之间。每次往待测液中插入电极时,都要首先用纯水冲洗电极,并用吸水纸轻轻拭干。电导值AB处理电导率平均值Ct煮沸电导率平均值C100伤害率(Ct/C100)×100CK10min20min30min40min5数据记录与处理表1高温对叶片伤害率的影响6实验结果及分析比较不同处理的叶片细胞透性的变化情况,记录结果,并加以解释以伤害率同处理时间的关系作图并分析7注意事项叶片不要用蜡质的,可以用梧桐叶、芭蕉叶;水浴加热隔3分钟摇一次,测量前也要摇匀;煮沸时单管要分开,否则沸水窜入试管;电导仪使用前电极放入纯水中浸泡,开关打开后,不要长时间将电极放在待测液或水中;每次往待测液中插入电极使,都要首先用纯水冲洗电极,并轻轻拭干。