实验三_叶绿体色素的提取分离和性质分析

二、实验原理2.类胡萝卜素（一）叶绿体色素：胡萝卜素叶黄素叶绿素a叶绿素b1.叶绿素（三）叶绿素的光学性质叶绿素与类胡萝卜素都具有光学活性，表现出一定的吸收光谱，可用分光光度计精确测定。三、实验材料与试剂新鲜的菠菜叶片。95%乙醇、CaCO3、醋酸铜结晶、浓盐酸、汽油。量筒，滤纸，大培养皿一只，小培养皿一只，长滴管，剪刀。四、实验步骤1、叶绿体色素提取：将菠菜叶片擦净，去中脉后取10g剪碎，加少许碳酸钙和石英砂，再分次加入10mL酒精研磨，过滤，定容至50ml，分装于5个试管内，容量分别为10ml。234513、叶绿体色素吸收光谱曲线取1ml提取液于比色杯中（试管2），加3ml95%乙醇。用95%乙醇作为对照，在400~700nm之间每隔20nm测一次光。记录波长和吸光度A于下表中，并在标准绘图纸上绘出叶绿体色素的吸收光谱曲线。λ（nm）400420440460480500…...600620640660680700A4、叶绿体色素含量的计算在标准曲线上查出波长600nm时的叶绿体色素浓度。叶绿体色素含量（mg·g-1）=样品鲜重（g）叶绿体色素浓度（mg·L-1）×提取液体积（mL）×10-35、叶绿素提取液荧光现象观察取试管3：从与入射光垂直的方向观察；再在透射光方向观察叶绿体色素溶液的颜色；记录叶绿素体色素溶液颜色有何不同，分析原因。6、光对叶绿素的破坏作用将试管4置于暗处，试管3置于强光下，照射2~3小时后，观察试管颜色的变化，解释这种现象。7、铜代叶绿素反应向试管5中逐滴加入浓盐酸，并不断摇匀，至颜色变化，观察并记录现象；向变色后的叶绿素溶液中加入少量醋酸铜，并在酒精灯上缓缓加热，观察并记录颜色的变化。分析原因。