实验专题复习要点

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《分子与细胞》实验专题复习知识要点实验一、检测生物组织中的糖类、脂肪和蛋白质(必修一P18)实验二:观察DNA、RNA在细胞中的分布(必修一P26)1.实验原理:甲基绿和吡罗红两种染色剂对DNA和RNA的亲和力不同,甲基绿使DNA呈现绿色,吡罗红使RNA呈现红色。2.所用试剂及其作用:0.9%的NaCl溶液:保持细胞原有形态盐酸:能够改变细胞膜的通透性,加速染色剂进入细胞,同时使染色休中的DNA和蛋白质分离,有利于DNA与染色剂结合。3、过程:取口腔上皮细胞制片→水解→冲冼涂片→染色→观察(先低倍镜观察,找到目标后将其移至视野中央,调节清晰后换用高倍物镜观察)实验三:用高倍镜观察线粒体和叶绿体(必修一P47)1、实验原理:叶绿体的辨认依据:叶绿体是绿色的,呈扁平的椭圆球形或球形。线粒体辨认依据:线粒体的形态多样,有短棒状、圆球状、线形、哑铃形等。健那绿染液是专一性染线粒体的活细胞染料,可以使活细胞中线粒体呈现蓝绿色。2、实验材料:藓类的叶、黑藻的叶(叶子薄而小,叶绿体清楚,可取整个小叶直接制片)3、过程:制片→低倍镜下找到叶片细胞→高倍镜下观察叶绿体的形态和分布还原性糖脂肪蛋白质材料苹果、梨花生种子黄豆或鸡蛋清试剂斐林试剂甲液:0.1g/mLNaOH溶液乙液:0.05g/mLCuSO4溶液(甲乙液混合用)苏丹Ⅲ或苏丹Ⅳ染液(显微镜观察)双缩脲试剂A液:0.1g/mLNaOH溶液B液:0.01g/mLCuSO4溶液(先加A液再加B液)结果(加热出现)砖红色沉淀橘黄色或红色紫色DNARNA材料人的口腔上皮细胞试剂甲基绿吡罗红颜色绿色红色制作人的口腔上皮细胞临时装片→观察线粒体4、实验结果实验四探究酵母菌的呼吸方式(必修一P91)1、实验原理:(1)酵母菌是一种单细胞真菌,在有氧和无氧的条件下都能生存,属于兼性厌氧菌,(2)CO2可使澄清石灰水变混浊,也可使溴麝香草酚蓝水溶液由蓝变绿再变黄。(3)橙色的重铬酸钾溶液,在酸性条件下与乙醇(酒精)发生化学反应,变成灰绿色。2、.方法步骤:提出问题→作出假设→设计实验→(包括选择实验材料、选择实验器具、确定实验步骤、设计实验记录表格)→实施实验→分析与结论→表达与交流。3、10%的NaoH溶液的作用:吸收空气中的CO24、:结果(1)酵母菌在无氧条件下进行无氧呼吸,产生酒精和二氧化碳(2)酵母菌在有氧条件下进行有氧呼吸,产生氺和二氧化碳线粒体叶绿体材料人的口腔上皮细胞藓类的叶、黑藻的叶试剂健那绿染液不需染色颜色蓝绿色(本身呈现)绿色实验一至实验四总结:实验五叶绿体色素的提取和分离(必修一P97)1、实验原理:(1)叶绿体中的色素不溶于水,易溶于有机溶剂中,所以用丙酮、乙醇等能提取色素。(2)层析液是有机溶剂。色素在层析液中的溶解度不同,分子量小的溶解度高,随层析液在滤纸上扩散得快,溶解度低的随层析液在滤纸上扩散得慢。所以用层析法来分离四种色素。2、实验材料:幼嫩、鲜绿的菠菜叶3、过程提取色素(5克绿叶剪碎,加SiO2、CaCO3和10mL无水乙醇,迅速、充分研磨。)→收集滤液(用棉花塞塞住试管口)→制备滤纸条(将干燥的滤纸,一端剪去二个角,并在距这一端1cm处划一铅笔线)→划滤液细线(用毛细吸管吸取少量滤液,沿铅笔线划出细、齐、直的一条滤液细线,干后重复三次)→纸层析法分离色素(将3mL层析液倒入烧杯中,将滤纸条(划线一端朝下)插入层析液中,用培养皿盖盖上烧杯)4、结果扩散最快是胡萝卜素,扩散最慢是叶绿素b,含量最多的是叶绿素a。材料试剂出现颜色还原性糖苹果、梨斐林试剂砖红色沉淀脂肪花生种子苏丹Ⅲ或苏丹Ⅳ染液橘黄色或红色蛋白质鸡蛋清双缩脲试剂紫色淀粉马铃薯匀浆碘液蓝色DNA人的口腔上皮细胞甲基绿绿色RNA人的口腔上皮细胞吡罗红红色线粒体人的口腔上皮细胞健那绿蓝绿色叶绿体藓类的叶、黑藻的叶不需染色绿色CO2检测无澄清的石灰水(溴麝香草酚蓝水溶液)变浑浊(蓝变绿再变黄)酒精检测无重铬酸钾溶液橙色变成灰绿色5、注意事项项目目的加SiO2为了研磨得更充分。加CaCO3防止研磨时叶绿素受到破坏。用棉花塞塞住试管口防止丙酮挥发层析液不能没及滤纸条防止色素溶解在层析液中滤液细线越细、越齐越好防止色素带之间部分重叠重复三次增加色素在滤纸上的附着量,实验结果更明显实验六:认识显微镜的结构,学会使用显微镜(必修一P7)1、光学显微镜的结构结构:(1)光学部分目镜、镜筒、物镜、遮光器(有大小光圈)和反光镜(有平面镜和凹面镜)(2)机械部分镜座、倾斜关节、镜臂、载物台(上有通光孔、压片夹)、镜头转换器、粗、细准焦螺旋。2、目镜无旋转螺丝,镜头越长,放大倍数越小;物镜有旋转螺丝,镜头越长,放大倍数越大(反目正物)。3、呈像原理:倒立放大的虚像。(物镜质量的优劣直接影响成像的清晰程度)4、放大倍数:目镜和物镜二者放大倍数的乘积(显微镜放大倍数是指直径倍数,即长度和宽度,而不是面积)5、显微镜的使用:取镜和安放(装镜头)→对光(转动粗准焦螺旋【顺时针】,俯首侧视镜筒慢慢下降。调节视野亮度只可用遮光器和反光镜)→低倍镜观察找到物像后,把要观察的物像移到视野中央→高倍镜观察(把低倍镜移走,换上高倍镜,只准用细准焦螺旋和反光镜把视野调整清晰,直到物像清楚为止)注:换高倍物镜时只能移动转换器,换镜后,只准调节细准焦、反光镜(和光圈)。6:放大倍数与视野的关系:放大倍数越小,视野范围越大,看到的细胞数目越多,视野越亮;放大倍数越大,视野范围越小,看到的细胞数目越少。7.装片的移动:物像在何方,就将载玻片向何处移。(原因:物像移动的方向和实际移动玻片的方向相反)8.污点判断:1)污点随载玻片的移动而移动,则位于载玻片上;2)污点不随载玻片移动,换目镜后消失,则位于目镜;换物镜后消失,则位于物镜;3)污点不随载玻片移动,换镜后也不消失,则位于反光镜上。实验七探究影响酶活性的因素(必修一P78、P83)方法步骤:提出问题→作出假设→设计实验→(包括选择实验材料、选择实验器具、确定实验步骤、设计实验记录表格)→实施实验→分析与结论→表达与交流。实例:比较过氧化氢酶和Fe3+的催化效率1、实验原理过氧化氢酶和Fe3+都能催化H2O2分解放出O2,肝脏提取液中含有过氧化氢酶。2、方法步骤:3、结论:酶可在常温常压下,高效地完成对化学反应的催化。(酶具有高效性)4、肝脏进行研磨的目的:研磨可破坏肝细胞结构,使细胞内的酶释放出来,增加酶与底物的接触面积试管加入物质处理现象点燃的卫生香12ml的H2O2溶液不做处理无气泡产生或产生极少量气泡无明显变化290.C水浴加热产生少量的气泡轻度复燃3加2滴FeCl3溶液产生较多的气泡复燃4加2滴肝脏研磨液产生大量的气泡猛烈复燃实验八观察细胞的有丝分裂(必修一P115)1、染色体容易被碱性染料(如龙胆紫溶液)着色,通过在高倍显微镜下观察各个时期细胞内染色体(或染色质)的存在状态,就可判断这些细胞处于有丝分裂的哪个时期,进而认识有丝分裂的完整过程。2.实验材料:洋葱(可用葱、蒜代替)3、实验步骤:根尖的培养→装片的制作(解离→漂洗→染色→制片)→观察(低倍镜观察,再高倍镜观察)4.注意事项步骤注意问题目的解离:放入盛有质量分数为15%的盐酸和体积分数为95%的酒精溶液的混合液(1:1)的玻璃皿中,室温下解离3~5min。解离时间要保证,细胞才能分散开来。解离时间也不宜过长。溶解细胞间质,使细胞相互分离。细胞已被盐酸杀死。否则,根尖过于酥软,无法取出。漂洗:根尖酥软后,用镊子取出,放入清水中漂洗约10min。漂洗要充分,可换水1~2次。洗去解离液,便于染色。染色:把洋葱根尖放进盛有质量浓度为0.01g/mL或0.02g/mL的龙胆紫溶液的玻璃皿中染色3~5min。染色时间不宜过长,否则显微镜下一片紫色,无法观察。龙胆紫等为碱性染料,可使染色体着色。醋酸洋红溶液也能使染色体着色显微镜知识点精析显微镜的知识及操作不仅是初中学生应该掌握的,而且对于高中学生来说应该进一步加深理解。由于显微镜是精密仪器,很多初中生可能对于显微镜望而却步,这就影响了高中对于显微镜知识的进一步学习,况且显微镜这部分知识知识点比较多比较散乱,难度也比较大,很多同学掌握的不是很牢固,现就这部分知识点进行归类总结。一、显微镜的构造很多老师对于显微镜的构造的介绍可能只是把显微镜从镜箱拿出来放在讲台上让同学们看各部分的构造。在这里我个人觉得在介绍显微镜构造时应着重介绍以下几点:①从目镜筒中抽出目镜,从转换器上拧下物镜,这样使学生知道目镜无螺纹,而物镜有螺纹。②把不同放大倍数的目镜和物镜放在同一桌面上,能让学生直观看到目镜越长,放大倍数越小;物镜越长,放大倍数越大。并且可以比较一下物镜的通光孔径,放大倍数越大的,通光孔径越小。③粗准焦螺旋、细准焦螺旋调节范围的大小。④遮光器的位置及怎样调节。二、显微镜成像的原理很多老师在讲课时只给学生强调出显微镜成像的结论,对于成像的原理很少介绍,这样很多同学对于这点就比较模糊,因此,应把显微镜成像的原理图直观的展示给学生,让学生知道显微镜成像的具体过程。下图是显微镜成像原理示意图。通过此图学生很清晰的看到物体被放大了两次,这样就很容易得出:结论一:显微镜的放大倍数=目镜的放大倍数X物镜的放大倍数,结论二:显微镜成的是倒立放大的虚像,像的上下、左右和实物都相反。例1、如果一个细小的物体被放大50倍,这里“被放大50倍”是指该细小物体的()A、体积B、表面积C、面积D、长度或宽度解析:显微镜放大的物体的实质为长度或宽度,而不是面积。面积大约被放大了2500倍左右。所以,答案为D。例2、如果在载玻片上写一个字母“b”,那么在视野中看到的是()A、bB、dC、pD、q解析:答案为D。方法1:根据显微镜放大的为上下、左右和实物都相反的虚像,先把“b”左右相反得到“d”,再把“d”上下相反得到“q”。方法2:最快捷的方法,把“b”旋转180°即可得到答案。三、低、高倍显微镜的使用低倍镜的使用顺序为取镜、安放、对光、观察。在低倍镜的取镜过程中学生应牢记“左托右握”准则,放在实验台的左上方,在观察时两眼都睁开,左眼看镜,右眼绘图。在低倍镜观察时两次使用粗准焦螺旋,并且方向相反。对于显微镜的操作,用下面的口诀来概括:一取二放,三安装,四转低倍,五对光。六上玻片,七下降。八升镜筒,细观赏。看完低倍,转高倍。九退整理,后归箱。对于高倍显微镜的使用可以说是高中生物教材中一个非常重要的实验,很多同学容易犯错误注意事项如下:①在换高倍物镜前,一定把要观察的对象移至视野中央。②换高倍物镜时,要转转换器,不能掰物镜。③切忌动粗准焦螺旋,以免压坏玻片损坏物镜镜头。四、显微镜使用中常见题型归类1.物、目镜组合观察细胞例3、显微镜头盒中的4个镜头。甲、乙镜头一端有螺纹,丙、丁皆无螺纹。甲长3cm,乙长5cm,丙长3cm,丁长6cm。请问:物镜与装片之间距离最近的是;在同样光源条件下,视野中光线最暗的一组镜头是。解析:这是一道典型的物、目镜组合的题目。首先要区分物镜和目镜,前面在介绍显微镜的结构时讲过物镜有螺纹,目镜无螺纹。因此甲、乙为物镜,丙丁为目镜。然后判断哪是高倍镜,哪是低倍镜;物镜越长,放大倍数越高,目镜越长,放大倍数越低,因此,乙是高倍物镜,丙是高倍目镜。最后,掌握高倍镜和低倍镜的特点:所以,答案为:乙;乙x丙2.物像移动与装片移动的关系结论三:物象移动与装片移动的方向相反。例4、用显微镜镜检人血涂片时,发现视野内有一清晰的淋巴细胞如图。为进一步放大该细胞,首先应将其移至视野正中央,则装片的移动方向应是A.向右上方B.向左上方C.向右下方D.向左下方解析:视野中物象从右上方移到中央,也就是说,物象向左下方移动。由于物象移动和装片移动方向相反,所以应向右上方移动标本。答案为A。注意:这里一定要看准移动的是物象还是装片,不然方向很容易弄错。3.视野中污物位置的判断例5、当你开始用低倍显微镜观察自制的装片时,发现视野中有一异物,移动装片,异物并不动,转换高倍物镜后,异物仍在。这异物可能在()A、反光镜上B、装片上C、物镜上D、目镜上解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