实验动物实用手册

实验动物实用手册重庆医科大学实验动物中心二○○四年五月2目录重庆医科大学实验动物中心介绍及业务范围政策法规实验动物名词及常用实验动物介绍实验动物的常规操作常见实验动物的生理生化指标3重庆医科大学实验动物中心介绍一、人员实验动物中心于1989年成立，现有专业技术人员7人，高级职称4名，初级职称3名，其中硕士研究生导师2名，已招收硕士研究生3名。二、组织机构实验动物中心为实验动物生产、教学、科研、质检四位一体的处级单位，由分管科研校长主管。中心设有中心主任办公室、中心办公室、实验动物学教研室，同时为重庆市实验动物质量检测中心微生物质量检测站、重庆市实验动物管理委员会办公室及重庆市动物学会实验动物分会等挂靠单位。三、基础条件1、实验动物生产具有普通级豚鼠、家兔、SPF级小鼠生产许可证；普通级豚鼠、家兔、犬、猫、猴、小型猪、羊及SPF级小鼠、大鼠使用许可证。为适应新国标要求及我校的发展，学校将投资1500万元，修建6000M2新实验动物大楼，更好地满足我校及全市的需求。2、动物实验可进行普通级豚鼠、家兔、犬、猫、猴、羊等动物代养及清洁动物、SPF级小鼠、大鼠的动物实验；可承接各种药理、毒理试验及微生物检测试验。3、实验动物学教学承担硕士研究生、本科生及动物实验基本技术的实验动物学教学；承担重庆市实验动物工作人员上岗培训。3、实验动物科研近5年来，承担国家及市级科研课题7项，科研经费达256.5万元，发表论文30余篇。获重庆市政府科学技术进步二等奖两项、三等奖一项及重庆医科大学科技作品竟赛三等奖一项。获2001年度重庆市科委表彰的实验动物工作先进集体称号。4、实验动物微生物检测近3年来共投入50余万元用于实验室改建、仪器设备购买，2001年6月实验室通过重庆市质量技术监督局组织的计量认证，挂牌为重庆市实验动物质量检测中心微生物检测站，承担全市实验动物微生物(细菌、真菌、病毒)检测工作，同时可开展细胞培养、胚胎工程及分子生物学实验研究。四、社会服务进行药品的委托检测服务；开展各种动物试验工作；进行实验动物饮料的生产研究开发；进行实验动物工作人员的上岗培训；开展设施、设备及业务知识的咨询活动；组织学术交流活动等。为重医的发展奠定基础条件。4我中心现可提供以下实验动物及饲料：清洁级动物清洁级KM小鼠重庆市渝中区医学院路1号400016联系人：张道华韩志刚电话：[phone]清洁级BALB/C小鼠清洁级wistar大鼠清洁级SD大鼠裸鼠代购其他特殊品种、品系清洁级动物代为繁殖生产特殊品系清洁级动物（如转基因、基因敲除动物）普通级动物普通级新西兰兔普通级豚鼠普通级犬普通级小型香猪代购其它特殊品种、品系普通级动物代为繁殖生产特殊品系的动物普通级、清洁级饲料大、小鼠颗粒料大、小鼠种鼠料品系小鼠料兔颗粒料种兔料豚鼠料代为加工特殊饲料代为购买特殊饲料动物代养服务清洁级小鼠：清洁级品系小鼠：清洁级大鼠：裸鼠：转基因小鼠特殊品系动物其它相关产品受精蛋各种实验动物血液及其制品特殊器材的加工（如灌胃针等）动物实验可开展药物及生物材料的动物实验和动物微生物质量检测联系人：何明忠王胜电话：[phone]三致实验细胞毒性小鼠异常毒性豚鼠异毒急性、亚急性毒性试验、慢性毒性试验豚鼠过敏皮肤刺激试验过敏试验热原试验微生物检测、细菌总数测定、真菌检测、弓形虫检测、体内外寄生虫检测其他相关试验5实验动物管理有关文件摘编一、国家七部局(科学技术部、卫生部、教育部、农业部、国家质量监督检验检疫总局、国家中医药管理局、中国人民解放军总后勤部卫生部)《关于发布实验动物许可证管理办法(试行)的通知》文件精神(国科发财字[2001]545号)第一章第三条实验动物许可证包括实验动物生产许可证和实验动物使用许可证。实验动物生产许可证，适用于从事实验动物及相关产品保种、繁育、生产、供应、运输及有关商业性经营的组织和个人。实验动物使用许可证适用于使用实验动物及相关产品进行科学研究和实验的组织和个人。许可证由各省、自治区、直辖市科技厅(科委)印制、发放和管理。同一许可证分正本和副本，正本和副本具有同等法律效力。第二章第六条申请实验动物使用许可证的组织和个人，必须具备下列条件：(1)使用的实验动物及相关产品必须来自有实验动物生产许可证的单位，质量合格。(2)实验动物饲育环境及设施符合国家标准。(3)使用的实验动物饲料符合国家标准。(4)有经过专业培训的实验动物饲养和动物实验人员。(5)具有健全有效的管理制度。(6)法律、法规规定的其他条件。第三章第八条省、自治区、直辖市科技厅(科委)负责受理许可证申请，并进行考核和审批。各省、自治区、直辖市科技厅(科委)受理申请后，应组织专家组对申请单位的申请材料及实际情况进行审查和现场验收，出具专家组验收报告。对申请生产许可证的单位，其生产用的实验动物种子须按照《关于当前许可证发放过程中有关实验动物种子问题的处理意见》进行确认。省、自治区、直辖市科技厅(科委)受理申请后的三个月内给出相应的评审结果。合格者由省、自治区、直辖市科技厅(科委)签发批准实验动物生产或使用许可证的文件，发放许可证。第四章第十三条具有实验动物使用许可证的单位在接受外单位委托的动物实验时，双方应签署协议书，使用许可证复印件必须与协议书一并使用，方可作为实验结论合法性的有效文件。第四章第十七条未取得实验动物生产许可证的单位不得从事实验动物生产、经营活动。未取得实验动物使用许可证的单位，或者使用的实验动物及相关产品来自未取得生产许可证的单位或质量不合格的，所进行的动物实验结果不予承认。第五章第二十二条本办法由科学技术部负责解释第五章第二十三条本办法自二○○二年一月一日起实施。二、实验动物的国家标准(GB14922-2001～GB14925-2001)国家质量监督检验检疫总局于2001年8月29日发布了实验动物国家标准，并于2002年5月1日实施。该标准对实验动物等级进行了重新设定，与寄生虫学等级对应，将实验小鼠和大鼠的微生物学等级分为清洁级，无特定病原体级(SPF)和无菌级，取消了普通级。豚鼠、地鼠和兔仍保留普通级，但要发展清洁级、SPF级。犬和猴分为普通级和SPF级。从2002年5月1日起，所有科研课题均需清洁级以上大、小鼠，否则结果不予承认，其使用设施也需达到相应级别。三、重庆市有关实验动物管理文件61、重庆市科委、卫生局、技术监督局、药品监督管理局《关于加强实验动物工作的通知》(渝科委发[1999]70号)：（1）、根据国家有关文件精神，在生命科学领域的科研立题、成果鉴定、新药评审、药品和功能食品等检验中，我市将逐步实行实验动物质量一票否决制。（2）、自2000年1月1日起，申报市级科研课题、成果鉴定，凡涉及实验动物的，应当把应用合格实验动物作为基本条件，必须出具实验动物使用许可证和实验动物质量合格证。（3）、根据国家《实验动物质量管理办法》规定，实验动物生产和使用，实行全国统一的生产、使用许可证(合格证)制度。实验动物生产和使用单位，必须取得许可证。未取得生产许可证的单位，一律不准生产和供应实验动物。未取得实验动物使用证的单位，进行动物实验和生产药品和生物制品所使用的实验动物，一律视为不合格。2、重庆市科委关于印发《重庆实验动物从业人员培训考核管理办法》的通知(渝科委发[2000]2号文：（1）、为加强实验动物从业人员的上岗管理，提高实验动物从业人员的素质，根据国家及本市有关规定，制定本办法。（2）、重庆市科学技术委员会(以下简称市科委)负责管理本市行政区域内实验动物从业人员的培训与考核工作。重庆市实验动物管理委员会负责日常管理工作。（3）、本办法所称的实验动物从业人员，是指从事实验动物和动物实验的科技人员、专业管理人员和技术工人。（4）、实验动物从业人员必须进行有关法律、法规及专业学习培训，并取得由市劳动局或市实验动物管理委员会颁发的“重庆市职业技能鉴定岗位合格证书”(以下简称“岗位证书”)或“实验动物从业人员岗位证书”，方可上岗。（5）、实验动物从业人员的上岗培训由重庆市实验动物管委会组织进行，并参加统一考试。考试合格的由市劳动局或市实验动物管理委员会颁发“岗位证书”。凡在院校选修过《实验动物学》课程，且成绩合格者，由相关部门出具证明，可直接申领“岗位证书”。（6）、“岗位证书”有效期五年。持证人在期满前须经重新培训和考核，合格者换发新的“岗位证书”。（7）、培训内容应包括：实验动物学基本知识，国内外发展概况及有关法规；实验动物的选择和应用；实验动物的质量影响因素和质量控制；常用实验动物及其饲养管理；影响动物实验质量的因素和质量控制；动物实验的基本知识和技能；动物模型的建立和应用；动物设施的管理；从业人员的职业道德。培训课时不应少于30学时。已取得岗位证书的人员，每年必须参加一定时间的继续教育学习。（8）、未取得“岗位证书”的人员不得从来实验动物和动物实验工作。（9）、从事实验动物工作的单位，应加强对其从业人员的上岗管理，不得安排未取得“岗位证书”的人员从事实验动物和动物实验工作。（10）、本办法由市科委负责解释。7常用实验动物名词一、实验动物(LaboratoryAnimal)基本概念及分类方法(一)实验动物的定义：遗传背景明确、来源清楚、对其携带的微生物、寄生虫实行控制，经科学方法人工培育用于科学实验的动物。(二)实验动物的分类方法1、按遗传学控制分类*近交系(1nbredStrain)(1)定义：杂种动物经过相当于20代全同胞兄弟单纯连续繁殖，各条染色体上的基因趋于纯合，品系内个体差异趋于零。(2)近交动物的特征a、纯合性和一致性纯合性指的所有动物的基因位点都应是纯合的。一致性指的是任何可遗传的体征都完全一致。例如：血型和组织型，体重、毛色。b、遗传稳定性c、特异性就整个近交系小鼠而言，每个晶系在遗传上都是独特的，几乎每个近交系都建立了各自的遗传概况。有些品系可能自发某些疾病，成为研究人类疾病的动物模型。d、分布于各地，引一对即可繁殖。e、背景资料和数据较完整。*封闭群(Closedcolony)(1)定义：以非近亲配种方式进行繁殖生产的一个种群，在不从外部引入新血缘条件下，至少连续繁殖四代以上称封闭群。(2)封闭群的特点：a、由于非近交，具有杂合性，从而避免近交衰退的出现。b、由于没有引进新的血缘，种群间遗传特性能保持相对稳定。c、群内个体间，因其具有杂合性，所以个体间的反应性具有差异，重复性和一致性不如近交系。1、按微生物学分类*普通级动物Convention（CV）alAnimal不携带所规定的人兽共患病病原和动物烈性传染病的病原。*清洁动物Clean（CL）Animal除普通级动物应排除的病原体外，不携带对动物危害大和对科学研究干扰大的病原体。饲养在屏障系统中。空气要经过滤净化，饲养室要保持正压，进入室内的—切物品要经过消毒灭菌，工作人员进入要洗澡和穿灭菌工：作服，动物饮水要经灭菌。*无特定病原体动物SpecificPathogen-free（SPF）Animal除清洁动物应排除的病原外，不携带主要潜在感染或条件致病菌和对科研干扰大的病原。饲育在屏障系统中，是通过无菌动物、悉生动物、SPF动物而获得的。笼具、饲料饮水都要经过特殊处理，并有严格的检疫、消毒、隔离制度。国外所作的科研实验主要使用SPF动物。*无菌动物Germfree（GF）Animal无可检出的一切生命体。此种动物自然界中并不存在，它是经人工剖腹产净化培育出来的。在隔离器中剖腹产取出其仔体，用无菌母鼠代乳或人工哺乳。悉生动物(GnorobioticAnimal)动物体内所携带生命体(病毒、细菌、真菌、原虫和寄生虫)是已知的，也叫已知菌动物。二，实验动物的设施实验动物，动物实验以及其相关的科学研究适用的设施。它既用于动物生长、繁殖又能保证动物实验的安全与质量。8(一)设施的分类：l、开放环境(Openenvironment)饲育环境与外界相同，有强力通风设施，饲料、饮水和垫料要求不被污染，应有防鼠，防昆虫措施。2、屏障环境(Barrierenvironment)洁净度万级饲育