实验名称实验一油脂酸败的测定过氧化值的测定方法

2020/1/3江南大学《食品化学》课程小组实验3蛋白酶活力的测定江南大学《食品化学》课程小组2020/1/3江南大学《食品化学》课程小组一、目的了解碱性蛋白酶活力测定的原理掌握碱性蛋白酶活力测定的方法2020/1/3江南大学《食品化学》课程小组1.微生物蛋白酶萃取液（0.01g/mL）2.0.2mol/L磷酸盐缓冲液（pH7.5）3.1%酪蛋白溶液4.5%三氯醋酸（TCA）溶液二、仪器及材料2020/1/3江南大学《食品化学》课程小组蛋白酶(水解肽键)氨基酸（AA)肽蛋白质三氯乙酸沉淀溶液(小肽和AA)正比于酶的量和反应时间评价酶活酪蛋白三、原理2020/1/3江南大学《食品化学》课程小组5％的TCA溶液、1％酪蛋白→37℃水浴保温取4支15ml具塞试管，编号A0、A1、B0、B1试管振荡后37℃水浴保温5min→分别加入2.00ml酪蛋白→37℃保温10min（准确计时）→分别在A1与B1试管中加入6.00ml5%TCA→室温下静置40min→过滤→滤液→280nm波OD值（0、B0为空白）号数A0A1B0B1酶液（ml）0.200.200.400.40磷酸盐缓冲液（ml）1.801.801.601.605％TCA（ml）6.00-6.00-四、实验步骤2020/1/3江南大学《食品化学》课程小组1.蛋白酶有哪几类？2.影响酶活力的因素有哪些？3.使用紫外分光光度计时应注意哪些问题？五、思考题