复方消卡栓的制备及质量研究

1复方消卡栓的制备及质量研究[摘要]目的：通过处方筛选，确定处方及制备工艺，并对其质量进行研究。方法：用高效液相色谱(HPLC)法测定复方消卡栓中盐酸小檗碱和消旋卡多曲的含量。色谱条件：C18柱（5um，4.6×150mm）为色谱柱；流动相：乙腈-水（50:50）[每1000ml中含磷酸二氢钾1.7g，含十二烷基磺酸钠0.85g]；流速：1.0ml/min；检测波长：230nm；柱温：25℃。结果：盐酸小檗碱在11.9131-174.7256ug/ml范围内呈良好线性关系（r=0.996370084）；消旋卡多曲在5.04-156.24ug/ml范围内呈良好线性关系（r=0.999970398）；盐酸小檗碱和消旋卡多曲的精密度RSD分别为0.82896%和0.86286%，平均回收率分别为103.0776%和99.9983%。[关键词]栓剂制备工艺盐酸小檗碱消旋卡多曲质量研究复方消卡栓是由消旋卡多曲和盐酸小檗碱而研制成的用于治疗婴幼儿腹泻的一种栓剂。消旋卡多曲是一种新型抗腹泻药，属于脑啡肽酶抑制剂，具有高效特异性抑制分泌作用，主要通过抑制过度分泌的水和电解质来治疗腹泻，适用于各种腹泻的对症治疗。消旋卡多曲具有疗效高、起效快、对中枢神经系统、呼吸系统、心血管系统、内分泌系统无明显作用的优点，可用于2个月以上的婴儿止泻，但其水溶性差，且味苦，目前上市的剂型主要是颗粒剂、干混悬剂、分散片、胶囊剂等。盐酸小檗碱又名黄连素，具有显著的抑菌作用，对多种革兰氏阳性菌和阴性菌有抑制作用，对肠道痢疾杆菌作用最强，同时，黄连素还具有收敛、减少肠液分泌的作用，用于治疗腹泻已有3000多年的历史，但其味极苦，对于口服婴幼儿乃至成年人都很难接受，患者的依从性差。针对上述问题，昆明邦宇制药有限公司研制了复方消卡栓（专利号201010563796），该药通过直肠给药，避免了口服困难的缺点，而且直肠内黏膜血管丰富，有利于药物在全身的循环，并能部分避免首过效应导致的肝代谢，药物的生物利用度较高。现对复方消卡栓的制备及其质量进行研究。1.仪器与试药Waters2489高效液相色谱仪（Waters）；紫外分光光度计UV-1700(岛津制作所)；BS210S电子天平（北京赛多利斯）；HH-S2s数显恒温水浴锅（上海试验仪器制造有限公司）；HS-6150D超声仪（江苏汉邦科技有限公司）；ZRS-8G智能溶出试验仪（天津大学无线电厂）；RBY-A型融变时限试验仪（上海黄海药检仪器有限公司）盐酸小檗碱对照品（批号110713-200609；110713-200911；中国药品生物制品检定所提供）；消旋卡多曲对照品（批号100682-200401，中国药品生物制品检定所提供）；盐酸小檗碱原料药（批号101001；四川省玉鑫药业有限公司）；消旋卡多曲原料药（批号091203；山东齐都药业有限公司）；半合成脂肪酸甘油酯（批2号101110；武汉祥和顺达精细化工有限公司）；聚乙二醇4000（批号20101111；青岛天力源生物科技有限公司）；聚乙二醇6000（批号20101103；青岛天力源生物科技有限公司）；硬脂酸聚氢氧（40）酯（批号20101106；青岛天力源生物科技有限公司）；吐温-80（化学纯，天津市风船化学试剂科技有限公司）；磷酸二氢钾、十二烷基磺酸钠、甲醇、氢氧化钠均为分析纯，乙腈为色谱纯，水为纯化水。2．处方筛选2.1栓剂的制备方法按处方，称取栓剂基质置烧杯中，60-70℃水浴熔融，加入原料药研匀，倾入涂有润滑剂（95%乙醇:甘油=5:1）的栓模中（稍微溢出口为度），放冷，待完全凝固后，削去溢出部分，取出即得。2.2基质的选择用三种不同的基质分别制成栓剂，测其融变时限，结果见表1。表1不同基质栓的比较不同基质的药栓融变及释药现象半合成脂肪酸甘油酯30分钟内能完全软化，但无药释现象聚乙二醇4000:聚乙二醇6000（1:1）60分钟内能软化和溶解，有释药现象硬脂酸聚烃氧（40）酯90分钟内不软化和溶解，无药释现象结论：以半合成脂肪酸甘油酯为基质，凝固较慢，药栓细腻。以聚乙二醇4000:聚乙二醇6000（1:1）为基质，凝固快，但有吸湿性。以硬脂酸聚烃氧（40）酯为基质，凝固快，光滑性差。硬脂酸聚烃氧（40）酯栓在较长时间内即不软化也不溶解，无释药现象。聚乙二醇类栓剂能溶解，能释放药物，但时间较长。半合成脂肪酸甘油酯栓剂，能较快软化，但没有释放药物。为使栓剂能快速释药，我们选择了半合成脂肪酸甘油酯为基质，同时加入适量表面活性剂吐温-80。2.3处方筛选以半合成脂肪酸甘油酯为基质，加入不同比例的吐温-80，加入原料药搅匀，倾入涂有润滑剂（95%乙醇:甘油=5:1）的栓模中（稍微溢出口为度），放冷，待完全凝固后，削去溢出部分，取出即得。表2不同栓剂辅料用量原辅料用量处方编号1234半合成脂肪酸甘油酯18.6618.7418.6418.69吐温-8000.37（2%）0.75（4%）1.12（6%）盐酸小檗碱（74.33%）4.044.044.044.04消旋卡多曲0.90.90.90.9取上述四种栓剂，参照《中国药典》2010版测释放度第二法测其释放度，溶出介质：磷酸盐缓冲溶液（PH6.8）250ml。温度：37℃。转速：120转/分钟。分别于5、10、15、20、25、30分钟取样，微孔滤膜过滤，取20ul注入高效液相色3谱仪，记录色谱图，计算其释放度，结果见表2.1、表2.2。2.1表面活性剂不同用量盐酸小檗碱的释放情况吐温-80用量取样时间（min）0510152025300%吐温-8000.270.810.891.161.431.582%吐温-80015.3340.3242.1942.7067.9168.624%吐温-80015.4444.2853.0560.1463.7168.586%吐温-8009.4934.8734.9263.9568.1674.192.2表面活性剂不同用量消旋卡多曲的释放情况吐温-80用量取样时间（min）0510152025300%吐温-8000.310.590.640.721.552.242%吐温-8007.668.9810.8411.9612.8516.004%吐温-8003.446.478.829.519.9910.686%吐温-8004.425.505.816.5110.3211.76通过释放度的比较，可以看出盐酸小檗碱及消旋卡多曲的释药速度随吐温-80用量的增加而呈增加趋势，4%吐温时盐酸小檗碱的释药速度最为平稳，而2%吐温时消旋卡多曲释药速度最快，同时也可以看出两个主药在6%吐温时释药并不是最快的，综合考虑后选用4%吐温的处方（处方3）进行试制。2.4置换价的测定2.4.1空白栓的制备处方：半合成脂肪酸甘油酯24g，吐温-800.96g（按30粒计，制20粒）。制备5组。2.4.2含药栓的制备处方：盐酸小檗碱4.04g（含量74.33%，以无水物计，按每粒含100mg）；消旋卡多曲0.902g(含量99.8%，按每粒含30mg)；半合成脂肪酸甘01020304050607080010203040取样时间（min）释放度（%）0%叶温-802%叶温-804%叶温-806%叶温-80图1吐温-80不同用量盐酸小檗碱的释放情况05101520253005101520253035时间（min）释放度（%）0%吐温-802%吐温-804%吐温-806%吐温-80图2吐温-80不同用量消旋卡多曲的释放情况4油酯17.23g；吐温-800.69g（按30粒计，制备20粒）。制备5组。2.4.3置换价的计算：将制备的空白栓分别每组取20粒称重，计算得平均每粒重为0.762008g，同样将制备的含药栓分别每组取20粒称重，计算的平均每粒重0.81102g，则（4.04+0.902）/30=0.16473，0.81102-0.762008=0.16473×（1-1/x），计算得置换价x=1.4235。2.5复方消卡栓制备2.5.1基质用量的计算：4.942/x=1.4235计算得x=3.4717，则基质用量为0.762008×30-3.4717=19.3885g，基质由半合成脂肪酸甘油酯和吐温-80共同组成，半合成脂肪酸甘油酯的量：y+0.04y=19.3885，计算得y=18.6428≈18.64g，即半合成脂肪酸甘油酯的量是18.64g，吐温-80的量是0.04×18.64g=0.75g(按30粒计)。2.5.2处方与制备：2.5.2.1处方盐酸小檗碱134.67g（74.33%）消旋卡多曲30.07g（99.8%）半合成脂肪酸甘油酯621.33g吐温-8024.85g制成1000粒2.5.2.2制备取半合成脂肪酸甘油酯置烧杯中，60-70℃水浴熔融，加入盐酸小檗碱、消旋卡多曲及吐温-80，研匀，倾入涂有润滑剂（95%乙醇:甘油=5:1）的栓模中（稍微溢出口为度），放冷，待完全凝固后，削去溢出部分，取出即得。产品编号110301KB。按该处方重复制备10批，批号为110301，110302，110303，110304，110305，110306，110307，110308，110309，110310。3.质量研究3.1性状本品为黄色栓剂。3.2鉴别3.2.1理化鉴别取本品10粒，60℃熔化，凝固，切成细末，称取0.1g，加水10ml，缓缓加热溶解后，取出放冷，过滤。同法制备盐酸小檗碱空白栓对照液，做如下鉴别试验：（1）取上述滤液2ml，加碘-碘化钾试剂2滴，复方消卡栓的溶液生成红棕色沉淀，空白对照液的溶液显红色，但无沉淀生成。（2）取上述滤液2ml，加硅钨酸试剂8滴，复方消卡栓的溶液有淡黄色沉淀生成，空白对照液无沉淀生成。53.2.2色谱鉴别在含量测定项下记录的色谱图中，供试品溶液两主峰的保留时间与对照品溶液相应的两主峰的保留时间一致。3.3检查3.3.1重量差异按《中国药典》2010版（二部）栓剂重量差异检查项目检查，10批样品中每批取完好的栓剂20粒，精密称定，结果见表3。表3重量差异检查10批样品重量差异均在规定范围内，且重量差异较小。3.3.2融变时限检查按《中国药典》2010版（二部）附录XB融变时限项目检查，取完好的复方消卡栓3粒，在室温下放置1小时后，分别放在3各金属架的下层圆板上，装入批号110301110302110303110304110305110306110307110308110309110310粒重（g）0.79530.79850.81800.80850.79980.80830.81730.80960.80560.80960.80450.81020.81530.81180.81880.82370.80700.80690.81630.80380.80100.79920.80990.81570.80730.81480.80760.81950.80570.82000.80190.80760.80860.80800.80640.80780.80360.81600.80620.81410.80400.79310.80750.81960.81510.79940.81170.80710.81780.81130.80310.79940.80610.80620.80600.81460.81320.80830.80310.80090.80740.80130.81800.80560.80170.81340.81890.80610.80210.80390.81770.79910.80830.81130.80830.81360.80950.80560.80300.80410.81170.81070.80580.81090.80720.81140.80550.80350.80750.81550.79720.79830.81130.80600.80770.80560.80840.80620.80800.80870.81180.80080.80790.81070.82320.80620.80420.80390.80980.806