XiangyaHospitalofCentralsouthuniversity血液科血液研究室标准操作规程第1版/第1次编号:SOP-XT66编写人:张国平因子X11活性测定审核人:批准人:实施日期:2012/10/1第1页,共3页一、原理血浆中内源性凝血系统任一凝血因子缺乏,都会导致部分凝血活酶时间延长。乏因子血浆试剂可用于确定某种凝血因子缺乏。总之,可以测定患者血浆某种因子缺乏和缺乏程度。用不同乏因子血浆和患者血浆混合,测定部分凝血活酶时间,结果用不同稀释度标准血浆,正常和乏因子混合血浆制成参考曲线来解释。缺乏某种特定凝血因子患者血浆不能用相应乏因子血浆补偿,从而导致部分凝血活酶时间延长。二、标本准备用枸橼酸钠抗凝管采集新鲜静脉血约3ml(抗凝剂与血液比约为1:9),混匀后及时分离血浆(2500rpm/min离心10min),避免溶血,血浆应在2小时内进行测定,如果不能在2小时内完成检测,应将血浆低温保存(-在-20℃中保存2周)。三、试剂准备试剂存储于2-8℃冰箱,开盖后上机按图标,打开试剂装载画面。等待试剂装载位前方的信号灯变为绿色,然后将所需要的试剂托架插入仪器(确保试剂条码处于中缝中且转到左边。2)每瓶试剂的条码号、产品名称、批号会自动识别,选择“Vial#”旁边的图标,打开现有试剂瓶号,选择适当瓶号,点击图标确认,试剂位会显示试剂的名称。3)如有试剂显示为红色,取出带有要更换试剂的试剂托架,然后取下要更换的试剂瓶,更换新的试剂重新扫描条码四、操作步骤1.开机打开仪器开关和操作电脑,双击电脑桌面上的DestinyMAXGUI图标并输入登录密码,软件启动,在触摸屏上显示主菜单。2.开机检查和日常保养按图标打开保养菜单,进行开机检查和日常保养装载质控并测试1.按打开“试剂装载”窗口。将按要求复溶好的质控品装载到相应的质控/定标托架(1301)上,并将其插入到试剂装载轨道2、3,4或5。2.按“工作列表”窗口按打开“QCandCalibration”命令窗口。3.装载的质控品会在质控/定标托架上显示。用当前装载的试剂、标准品和质控可进行的检测将以白色背景显示。点击“QC”栏相应检测处为。4.点击开始运行质控测试。3.装载标本,运行标本测试a)装载标本并测试1)质控通过后,在标本托架中插入标本,按进入工作列表。等待标本装载区域的信号灯变为绿色,然后将标本托架插入仪器。如果标本使用条码功能,确保标本条码处于中缝中,标本ID号可以通过条码自动读取;2)如要更改标本ID号,按标本ID区域,出现对话框后,按,删除不正确的ID后,输入正确的ID号,按确认。在项目测试栏,选择测试项目,按启动标本测试。4.测试完毕,重新清洗加样针并关机当所有标本测试完毕后,进入保养菜单。分别打开“Daily”和“Other”页面,进行试剂针和加样针的去污染。点击图标,用纱布加酒精清洁加样针头的外表面;点击图标数次,进行加样针的清洗。在主界面按图标退出操作软件并关闭操作电脑,此时关闭仪器电源即可。五、临床意义1、正常参考值70%-120%。2、临床应用:凝血因子Ⅷ、Ⅸ、Ⅺ以及Ⅻ活性测定用于以下几种情况:1)用于证明部分凝血活酶时间延长的原因;2)用于诊断先天性或获得性因子缺乏症;3)用于鉴别诊断异常蛋白血症和蛋白合成性疾病。4)凝血因子Ⅷ、Ⅸ活性测定可用于监测血友病甲或乙患者使用因子Ⅷ或Ⅸ替代疗法的疗效;另外,因子Ⅸ活性测定也可应用于诊断消耗性凝血病、肝硬化,并能更精确的监测口服抗凝剂的疗效。5)测定凝血因子Ⅺ、Ⅻ活性亦可反映血液凝固中接触期的激活。六、注意事项1、采血①防止组织损伤,避免外源因子进入。②尽快送检。③避免从输液管取血,以防稀释,用药。④抽血时的压力、时间长短会影响局部血液的浓缩,可影响血小板释放和某些凝血因子的活性。2、收集管要求:硅化玻璃管或塑料管,最好使用真空采集管,不推荐使用注射器3、抗凝剂选择①推荐用0.109mol/L(3.2%)枸橼酸钠(5H2O),PH7.10-7.35,能有效阻止Ⅴ和Ⅷ降解②抗凝剂与血液的比例为1:9。4、采集过程:①加压:使用止血带或不太紧的血压带,时间不超过1分钟。②最佳采集状态:病人处于休息,平静状态;静脉穿刺没有造成明显损伤。③舍弃第一毫升血或不使用第一管血④确保血液迅速均匀地流动⑤抽出的静脉血必须立即轻微上下颠倒3-4次,保证与枸橼酸钠充分的混合。不允许反复冷冻