大豆异黄酮的提取

课题：大豆异黄酮的提取一、实验目的：通过单因素试验及正交试验,就大豆异黄酮的提取工艺条件进行优化,找出最佳的工艺参数。二、实验材料与方法：1.1实验材料：大豆、正己烷、乙醇、标准大豆异黄酮1.2实验方法：1.2.1材料预处理：取样,蒸馏水净化、吸干,105℃烘箱中杀青15~20min,于80℃烘箱烘干至恒重。粉碎,备用。1.2.2大豆异黄酮的提取流程及方法：（1）准确称取大豆粉,按W：V=1：1取正己烷脱脂，于65℃恒温水浴锅中水浴搅拌15min,布氏漏斗过滤2次,弃滤液,滤渣105℃烘烤2h,室温称恒重。脱脂2次,干燥备用。（2）取豆粉,按照一定的料液比加入一定浓度的乙醇醇提,置一定温度恒温水浴摇床中振荡浸提一定时间。2000r/min离心10min,上清液保留,沉淀物置于60℃烘箱干燥至恒重为止。沉淀物按上述方法浸提一定的次数，合并2次提取液。（3）提取液置于60℃恒温水浴锅中蒸发浓缩,至50mL。1.2.3单因素试验设计以大豆异黄酮的提取率为评价指标,采用乙醇热浸提法提取大豆异黄酮。本研究以提取过程中的乙醇浓度、料液比(W：V)、提取温度、提取时间、提取次数5个可能影响提取效果的因素展开单因素试验(见表1),以确定相关影响因素及各因素的水平。在单因素试验结果的基础上,确定正交试验的因素与水平,优化出大豆异黄酮提取的最佳工艺条件。表一大豆异黄酮提取的单因素及水平1.2.4根据单因素试验结果采用L9(34)进行正交试验,以优化提取工艺。1.2.5大豆异黄酮的测定(1)标准曲线的制作：准确称取标准大豆异黄酮1mg,用95%的乙醇定容至100ml,即标准液。分别准确移取标准液2,3,4,5,6,7ml于10ml具塞比色管中,加95%的乙醇至10ml后在261nm处测定其吸光值，得到的大豆异黄酮标准曲线方程。(2)样品液中大豆异黄酮含量的测定:取一定量样品液直接在261nm处测定其吸光值,计算异黄酮浓度，再计算异黄酮的提取率。三、实验结果与分析