大鲵疾病学研究进展(2yue24-1)

中国大鲵疾病研究进展周小愿，高志，高宏伟，韩亚慧，（中国水产科学院黄河水产研究所，陕西西安710086）摘要：随着养殖规模的日益扩大，大鲵疾病逐渐增多，许多养殖场遭受了巨大的经济损失。为此，许多学者对大鲵疾病进行了大量研究。本文总结了大鲵疾病的病因、诊断及防治等基础理论和应用方面的研究，指出了大鲵疾病研究中存在的主要问题并提出了相应的建议。关键词：大鲵；病原；诊断；治疗基金项目：陕西省科学技术计划项目（2010NKC-39）。作者简介：周小愿（1972-）,男，陕西礼泉人，硕士，高级工程师。研究方向：水产养殖和渔业环境。Tel:[phone]E-mail:[e-mail]ofgiantsalamander’sdiseasesZhouXiao-yuan,Gaozhi,GaoHong-wei,HanYa-hui,(Yellowriverfisheriesinstitute,CAFS,Xi’anShaanxi,710086,China)Abstract:Withtheenlargementofthecultivationscale,thekindsofgiantsalamander’sdiseasesbecamemoreandmore,whichhadresultedinlotsofeconomiclosses.Alargenumberofresearcheswereconductedinlastfewyears.Thestudyofcause,diagonsisandcureofthediseaseswerereviewedinthispaper.Someissuesconcerningthestudyarepointedoutandsomerelativesuggestionsareputforward.Keywords:giantsalamander,diagnosis,curepathology,research,advances.大鲵（Andriasdavidianus）属于有尾目（Caudata）隐鳃鲵科（Cryptobranchidae）大鲵属（Andrias），为国家二类野生保护动物，已被列入CITES公约附录Ⅰ中。由于大鲵具有极高的经济价值和科学意义，为科学保护和合理利用这一珍稀物种资源，自1978年报道首例大鲵人工繁育成功以来[【1】，我国许多有大鲵自然分布的地区都积极开展了大鲵的人工繁育和养殖。随着大鲵人工养殖的蓬勃展开，有关大鲵疾病的报道也逐渐增多。上世纪90年代有关大鲵疾病方面的报道主要集中于病害实用防治技术方面【2-6】；由于当时大鲵疾病的基础理论研究薄弱，病害的诊断手段和防治措施以参照鱼类为主，因而针对性不强，防治效果并不理想。为了给大鲵疾病的科学诊断和合理用药提供理论依据，进入新世纪尤其近年来，科研工作者相继开展了大鲵疾病尤其是细菌性疾病的病原学、病理学、致病机理等方面的基础研究。本文着重就上述方面的最新研究进展进行综述，以期为今后大鲵疾病学研究提供参考，从而积极推动大鲵养殖产业的持续发展。1病原根据大鲵疾病发生的原因，将之分为两大类：传染性疾病，指由病原生物引起的一大类疾病，其中由细菌、真菌等微生物引起的疾病称为传染病，由寄生虫导致的疾病称为寄生虫病；非传染性疾病，包括中毒病、外科病及营养代谢病等[7]。1.1传染病1.1.1细菌性传染疾病从众多学者所做的病菌分离、培养、人工再感染结果分析，导致大鲵细菌性疾病的主要病原菌有气单胞菌科、假单胞菌属以及爱德华菌属的细菌。其中，已分离鉴定的气单胞菌科致病菌有嗜水气单胞菌（Aeromonashydrophila）、温和气单胞菌（Aeromonassobria）以及杀鲑气单胞菌杀鲑亚种（Aeromonassalmonicidasubspsalmonicida），假单胞菌属的细菌有荧光假单胞菌（Pseudomonasfluorescens）和恶臭假单胞菌（Pseudomonasputida）；爱德华菌属的细菌则为迟钝爱德华菌（Edwardsiellatarda）。这些细菌侵染宿主机体的途径与方式各异，导致大鲵患病后所表现的临床症状也不尽相同[8-10，18，20](见表1)。体表创伤成为几乎所有致病菌感染大鲵使其患病的主要诱因和途径。王高学等[35]和王印等［20］通过致病菌分离培养后进行人工体内注射再感染动物实验，确定了荧光假单胞菌和杀鲑气单胞菌通过大鲵的体表创伤进行入侵感染。敖弟书等【23】通过用含有不同浓度的迟钝爱德华菌水环境接触大鲵以及胃肠道食入大量病菌感染试验发现：体表没有创伤的大鲵在接触含致病菌的水环境时均无感染症状；而食入大量致病菌仅引起轻微感染。因而也确定了体表创伤是迟钝爱德华菌感染大鲵的主要途径。食用变质饵料食物和饮用或生存环境中的水质变差也是造成大鲵感染致病菌的另外两个途径。赵虎等【31】在研究确定一例大鲵感染恶臭假单胞菌致病寻找病原菌来源时证实，该致病菌来源于食用的腐败变质的饵料食物。比较钟蕾等、文正常等以及徐景娥等[8-10]报道的感染嗜水气单胞菌后的患病大鲵出现的病症可以发现：钟蕾等观察到患病大鲵的体表无溃疡、糜烂等病灶，而文正常等则发现患病大鲵体表有溃疡、腐烂特征。这点差异或许和该致病菌的致病机理有关以及患病大鲵个体差异有关。之所以有的患病大鲵感染嗜水气单胞菌后出现体表溃疡、腐烂，是因为病鲵的体表有创伤，而没有溃疡和腐烂出现是因为患病大鲵的体表皮肤健全完好。因此，可以确定：嗜水气单胞菌对于大鲵的感染除了体表创伤外，也可能通过饮水或吃食来进行的。上述的大多数致病菌的致病机理通过相关研究已较为清楚，主要包括黏附和侵袭[25-28]、抗宿主免疫机制、分泌毒素[29]等。吴中明等［22］从感染迟钝爱德华菌致死的大鲵体内发现肝脾吞噬细胞聚集分布，很可能是迟钝爱德华菌在抵抗病鲵的免疫机制过程中，在吞噬细胞中存活、复制导致大量吞噬细胞死亡的结果。分泌毒素并通过毒素对宿主组织细胞产生损伤是致病菌造成宿主出现各种病症的病理基础。目前研究已知嗜水气单胞菌的主要毒力因子为气溶素（Aer）,其能够造成宿主产生败血症和肠炎、腹水等疾病【12，13】；温和气单胞菌和嗜水气单胞菌类似，在宿主体内也能够产生各种溶血素和肠毒素等致病因子；荧光假单胞菌则可产生内毒素来损伤组织细胞，从而导致宿主败血病的发生[38]。王高学等[35]在显微观察中发现了荧光假单胞菌对患病大鲵组织细胞损伤和引起败血症的直接证据：组织细胞出现肿胀、颗粒变形、玻璃样变和坏死崩解，大量红细胞变形、碎裂溶解，呈溶血性贫血，血液中白细胞极少，无白细胞浸润现象。迟钝爱德华菌不过，目前对于有些大鲵致病菌的致病机理甚或生物学特性的研究还不够充分。赵虎等【31】研究确定了恶臭假单胞菌为一例大鲵患病的病原菌，并对该菌的生理生化特性进行了较为详尽的研究。关于恶臭假单胞菌引发的水产动物疾病的报道是最近10年才陆续出现的。如樊海平报道的欧洲鳗Anguillaanguilla烂鳃病【32】、沈锦玉等报道的大黄鱼Pseudosciaenacrocea肝肾白点病【33】及毛芝娟等报道的黑鲷Sparusmacrocephlus肠炎病等[34]。比较分析可以发现，上述研究结果之间存在一定差异。如对于该菌的生理生化特征分析中，赵虎等发现该菌对尿素和精氨酸的反应呈阳性，而沈锦玉等和毛芝娟等结果则为阴性；在药物敏感试验中，赵虎等和沈锦玉等发现该菌对先锋Ⅴ表现出耐药性，而毛芝娟等的结果则显示为敏感。而且，目前已知关于假单胞菌属的分类也较为混乱【47】，至于恶臭假单胞菌的致病机理则更加不清楚。因此，恶臭假单胞菌对于大鲵的致病机理以及该菌的生物特性方面的研究还需进一步加强。表1大鲵主要传染性疾病病理特征Table1Pathologiccharacteristicsofthegiantsalamander’smajorinfectiousdiseases疾病类型致病菌病理特征参考行为特征外部特征解剖特征文献细菌性疾病嗜水气单胞菌浮于水面，行动呆滞，不摄食或摄食量急剧下降眼球外凸，双眼覆盖一层白膜，体表布满白点；有或无溃疡、糜烂头、胸、腹腔等部位有积水；肝脏肿大，肝脏或脾脏有出血点；肠、胃充血。温和气单胞菌活动减弱皮肤溃烂、出血腹部积水，口腔内出血杀鲑气单胞菌食欲减退甚至废绝体表黏液部分脱落，体表有绿豆大小的白色小点和白斑，四肢最多，白色斑点进一步腐烂成溃疡状直至暴露红色的肌肉，-腐皮病迟钝爱德华菌进食减少、拒食体表黏液脱落，皮肤溃烂,特别以四肢和腹部皮肤为多见皮肤溃烂,特别以四肢和腹部皮肤为多见产生败血症,在疏松的皮下、脾脏及肝脏都能见到大量细菌分布，肝脾充血、肿胀坏死等明显的炎性表现，在肝脾吞噬细胞内成聚集分布。恶臭假单胞菌皮肤大面积溃烂，出现大面积白色水霉，且身体各部位均有发生肝脏表面有米粒大小的灰白色坏死灶，脾脏略肿大；从十二指肠到泄殖腔均有条索状出血。赤皮病荧光假单胞菌全身肿胀，呈充血发炎的红斑块和化脓性溃疡，腹水增多,肝脏肿大有出血点，肠组织糜烂、溃疡，各器官出血性坏死。真菌水霉属、绵霉属和丝囊菌属拒食,急躁不安地全池游动,甚或身体翻转，最终行动迟钝头部、躯干部、四肢、尾部可观察到有水霉菌寄生；早期，寄生部位只看到边缘不明显的小白点，随后逐渐见到长出的棉絮状菌丝感染部位肌肉溃烂，严重者出血。刮除菌丝后，可见四肢上有许多肉瘤状圆点，并出血，1.1.2真菌病目前已知发现的大鲵真菌病为水霉病(Saprolegniasis)或肤霉病(dermatomyeosis)，致病菌为卵菌纲水霉目水霉科(Saprolegniaceae)的水霉属(Saprolegnia)和绵霉属(Achlya)、丝囊菌属(Aphanomyce)的一些种类。大鲵水霉病的发病机理目前已研究较为清楚。致病菌对宿主无严格选择性，各种水产动物包括大鲵，从卵到各龄成体等都可感染，且极易发生大规模传染并迅速蔓延，造成大量宿主死亡，危害特别严重[41-42]。安苗等【51】研究发现，当大鲵体表皮肤因物理化学因素或细菌感染受到损伤时，致病菌感染皮下肌肉，成长为具有一定长度，呈分支多而纤细的灰白色水霉菌茵丝，其生长发育分无性和有性两种繁殖方式。外茵丝主要靠出芽生殖形成新茵丝，也可形成孢子在适宜条件下发育为新茵丝；有性繁殖是在菌丝上分别形成藏卵器和雄器，受精后由孢子囊内孢子成长为新茵丝。菌丝与伤口的组织细胞缠绕粘附，使组织发炎、坏死，而宿主因负担过重，游动失常，食欲减退，很快瘦弱死亡。该类致病菌在宿主死后不久繁殖特别快，所以具腐生性，对大鲵是一种继发性感染[43]。不过，由于致病菌是腐生性的，因而未受伤的个体及正常受精卵不受感染[44]。1.2寄生虫病：在自然生长状态下，大鲵体内也会寄生有线虫[53，54]，但是目前的研究发现，真正对养殖大鲵带来严重危害的，大多为饵料生物中携带的“外来物种”线虫。刘昌利[55]研究发现，.鲤嗜子宫线虫（Philometracyprini）能够感染大鲵，能引起患病大鲵皮肤充血、发炎，受害严重者可导致病鲵的表皮轻度腐烂。该种线虫体长多在10-12cm，最长达18cm；虫体细长，圆筒状，体呈红色，虫体表面分布着许多透明的乳突，虫体内大部分被粗大的子宫所占据。这种线虫对大鲵的大小及性别没有选择性，一般感染时间为每年的1-2月，即大鲵冬眠期，等到3月上旬后大鲵开始外出活动时，虫体则自然消失，期中间宿主为剑水蚤。陈云祥也发现，毛细线虫可以感染大鲵，引起病鲵拒食，行动减少，并逐渐消瘦。该线虫体呈乳白色，两端尖细，体长可达10cm，一般寄生在大鲵的体表，如躯干、四肢、腹部、头部等部位，也可寄生在肠道内。其宿主为大鲵的饵料食物鱼类。非传染性病导致这类疾病的原因大多是由于饲养管理不善而引起的动物抵抗力下降，生理机能失调。在日常管理方面，常由于水质不良引起大鲵产生气泡病、浮头、弯体病以及碱中毒等，养殖水温控制不当可导致大鲵感冒，而在人工养殖条件水质达不到泉水的标准(大鲵喜阴暗怕强光)、人工养