婴幼儿奶粉中双氰胺的检测方法HPLC法

博纳艾杰尔产品应用案例地址：天津经济开发区西区南大街179号邮编：300462电话：[phone]传真：[phone]Email：[e-mail]网址：客服：400-606-8099婴幼儿奶粉中双氰胺的检测方法（HPLC-UV法）北京时间1月25日凌晨消息，新西兰牛奶中发现了有害物质——双氰胺。双氰胺又名二氰二胺，缩写DICY或DCD。虽然国际标准未对食品中的双氰胺限量，但高剂量的双氰胺对人体是有毒的。针对婴幼儿奶粉中基质复杂的特点，本方法加大了净化材料的用量，以获得了更好的净化效果。采用天津博纳艾杰尔科技的新一代的Cleanert®MAS-QuChERS-双氰胺净化管（500mg/15mL，货号：MS-SQA02）和Venusil®HILIC液相色谱柱，建立了奶粉中双氰胺的MAS-QuEChERS快速前处理方法和LC-UV以及LC-MS/MS检测方法。1实验部分1.1仪器、试剂与材料高效液相色谱仪，涡旋振荡器，超声波清洗机，氮吹仪。双氰胺标准品（CAS：461-58-5；FW=84.08），新一代Cleanert®MAS-QuChERS-双氰胺净化管，Venusil®HILIC液相色谱柱，微孔滤膜，乙酸铵、乙酸、乙腈为色谱纯，实验用水为超纯水。表1双氰胺的信息名称结构式分子量CAS双氰胺NHNH2NHN84.08461-58-51.2实验步骤称取1g试样于50mL具塞离心管中，加2mL水，涡旋30s，加2ml乙腈涡旋30s。再往现有的提取液中加2mL乙腈，重复上述提取步骤。再将该提取步骤重复2次，得到共计约10mL的提取液。以4000r/min离心5min，将全部上清液加入新一代Cleanert®MAS-QuChERS管中（500mg/15mL），将MAS管上下晃动30s，然后涡旋30s后，8000r/min离心5min，取全部上清液（约10ml）于玻璃试管中，50℃下氮气吹干，加入1ml乙腈复溶，过0.22μm微孔滤膜，待测。注：1.做基质加标实验时的标准溶液建议选择以水为溶剂，防止加标瞬间发生蛋白沉淀；2.乙腈提取分4次，为防止乙腈体积过多时沉淀蛋白速度过快，影响提取效果。1.3实验条件1.3.1高效液相色谱法（HPLC法）：博纳艾杰尔产品应用案例地址：天津经济开发区西区南大街179号邮编：300462电话：[phone]传真：[phone]Email：[e-mail]网址：客服：400-606-8099色谱柱：Venusil®HILIC（5μm，100Å，4.6*250mm）；流动相：10mmol/L乙酸铵（pH=4.0）：乙腈=15:85；波长：220nm；进样量：10µl；柱温：30℃；流速：0.8mL/min。2结果与讨论2.1高效液相色谱法：2.1.1双氰胺的液相色谱图min024681012mAU020406080VWD1A,Wavelength=220nm(双氰胺\DEF_LC2013-01-2905-26-15\067-1001.D)5.571图1双氰胺1µg/ml标准溶液的液相色谱图2.1.2实际样品基质加标的线性关系和检出限准确称取双氰胺标准品50mg于50mL容量瓶中，加水溶解并稀释至刻度，作为标准贮备液；分别称取1g奶粉试样，添加一定量标准溶液，配制成含双氰胺为0.5µg/g，1µg/g，2µg/g，5.0µg/mL和10µg/g的添加样品，按照上述提取、净化方法操作，所得净化液按照上述色谱条件，依次进样检测。以双氰胺含量为横坐标，峰面积为纵坐标，拟合线性方程，结果见表4：表4双氰胺线性方程和定量限（HPLC法）名称保留时间线性方程相关系数最低定量限（S/N=10）双氰胺5.57minY=108.16X+27.8270.99710.5µg/g2.1.3准确度和精密度选取市售某品牌婴幼儿奶粉试样，进行添加回收实验，结果见表5表50.5µg/g添加回收实验结果（HPLC法）平行1平行2平行3平均值RSD82.3%85.5%89.1%85.63%3.97%博纳艾杰尔产品应用案例地址：天津经济开发区西区南大街179号邮编：300462电话：[phone]传真：[phone]Email：[e-mail]网址：客服：400-606-8099min024681012mAU020406080VWD1A,Wavelength=220nm(双氰胺\20130128000035.D)5.520min024681012mAU020406080VWD1A,Wavelength=220nm(双氰胺\20130128000034.D)5.568图2婴幼儿奶粉空白液相色谱图图3婴幼儿奶粉0.5µg/g添加双氰胺的液相色谱图3产品订货信息产品名称规格型号货号新一代MAS-QuChERS-双氰胺净化管（填料量加大，更适合婴幼儿奶粉等复杂样品）500mg/15mL，50支/包MS-SQA02MAS-QuChERS-双氰胺净化管100mg/2mL，50支/包MS-SQA01VenusilHILIC液相色谱柱4.6*250mm，5μm，100ÅVH952505-02.1*150mm，5μm，100ÅVH951502-0微孔滤膜0.22μm，直径13mm,200/PkAM021320双氰胺对照品500mg/瓶，含量≥99.0%DCD-00011g/瓶，含量≥99.0%DCD-0002离心管50mL，带螺纹盖，25个/包LXG0050一次性注射器5mL,100/pkZSQ-5ML另有HPLC-MS/MS检测方法，请登录查看