1各免疫指标测定的意义1、免疫器官指数的测定胸腺、脾脏和法氏囊是肉鸡重要的免疫器官,其脏器指数可在一定程度上反映机体免疫功能的强弱。胸腺和法氏囊是重要的中枢免疫器官,其主要功能是产生T淋巴细胞和分泌胸腺素,主要参与细胞免疫;脾脏是外周免疫器官具有丰富的淋巴细胞和巨噬细胞,但B淋巴细胞比例较大,因此与体液免疫关系更为密切。其重量和其功能以及其中的免疫细胞数量有关,器官指数的高低决定了其中淋巴细胞增殖的程度,可粗略估计免疫功能的强弱,是一个粗浅和滞后的指标。2、血液指标的测定2.1血清免疫球蛋白IgG,IgM,IgA免疫球蛋白(Ig)是指具有抗体活性或化学结构上与抗体相似的球蛋白,一般存在于血液等多种体液中及某些细胞的表面上,血清免疫球蛋白的测定是检查体液免疫功能最常用的方法。通常检测IgG,IgM,IgA,这三类Ig就可以代表血清Ig的水平。禽类有3种免疫球蛋白,即IgG,IgM,IgA;IgG:是单体免疫球蛋白,是再次体液免疫反应产生的重要Ig,其血清中的浓度约为5-7mg/ml,远高于其它免疫球蛋白,且维持时间长,是机体杭感染的主要力量。它还参与抗肿瘤、抗寄生虫以及某些变态反应等过程。血清IgG是B淋巴细胞产生,血清含量最高,直接参与体液免疫反应的主要免疫分子。IgM是初次体液免疫反应产生的重要Ig,其含量仅次于IgG,是由浆细胞完整分泌,一般仅存在于血液内,起抗原受体作用。IgA是外分泌液中的主要Ig,能抵抗微生物入侵肠道、呼吸道、泌尿生殖道、乳腺和眼睛,能凝集颗粒性抗原和中和病毒。血清Ig含量升高,说明机体体液免疫功能增强。2.2血清补体C3、C4补体(complement,C)是存在于正常人和动物血清与组织液中的一组经活化后具有酶活性的蛋白质。正常情况下,补体是血浆蛋白的组成成分。补体系统的各成分,以无活性的前体存在于血浆中。需要时,再在激活物如抗原-抗体复合物等的作用下,依次被激活,最终发挥溶解、破坏细菌、病毒等致病物的作用。补体系统激活过程中,可产生多种生物活性物质,引起一系列生物学效应,参与机体的抗感染免疫,扩大体液免疫效应,调节免疫应答。同时,也可介导炎症反应,导致组织损伤;补体的含量相对稳定,不因免疫而增强,补体的活化和抑制通过多种补体分子严格控制。补体系统是体内重要的免疫效应和免疫效应放大系统,发挥机体特异性和非特异性的抗感染作用。补体C3,C4含量的升高,说明机体特异性细胞免疫功能增强。2.3血清细胞因子IL-2,IL-4,IFN-γ,TNF-αIL-2:主要由激活的T淋巴细胞产生,在免疫系统中具有十分重要的免疫生理调节效应,能激活、提高免疫细胞的多种功能,如提高它们杀伤癌细胞、病毒或细菌感染细胞、促进细胞因子的繁殖,刺激T细胞在体外的生长,促进抗体生成和分泌的能力。IL-2能刺激T辅助2细胞和自然杀伤细胞产生细胞因子和促进细胞因子的繁殖以及刺激T细胞在体外生长等功能,因此机体内IL-2含量的多少可以间接反映出机体的免疫应答水平。IL-4:是II型辅助T细胞(Th2细胞)分泌的细胞因子。白细胞介素-4的生物作用,包括刺激活化B细胞和T细胞增殖、CD4+T细胞分化成II型辅助T细胞.它也在调节体液免疫和适应性免疫中起关键作用。其含量的高低也可以间接反映机体免疫应答的水平。IFN-γ:干扰素具有很强的免疫调节作用。它可以调节T,B淋巴细胞的免疫功能,小剂量时起促进作用,大剂量起抑制作用。干扰素可引起干扰素敏感细胞表面抗原和某些受体的表达增加。鸡IFN-γ的生成可促进Th0细胞向Th1分化而抑制Th2的生成。由于Th1和Th2分别介导机体细胞免疫和体液免疫,因此鸡IFN-γ可根据不同病原感染,与其它细胞因子(如IL-4等)共同作用,对机体进行免疫干预,实现免疫系统防御功能。鸡IFN-γ可刺激自然杀伤细胞并增强其杀伤功能,有利于机体清除病毒感染;鸡IFN-γ能促进巨噬细胞吞噬能力和炎症反应,并可直接促进T,B细胞分化和细胞毒T淋巴细胞成熟,刺激B细胞分泌抗体,从而增强机体免疫功能。因此鸡IFN-γ的高低也可反映机体免疫功能的强弱。TNF-α:TNF具有众多免疫活性,TNF-α可直接杀伤肿瘤细胞,具有类似干扰素的抗病毒作用,增强对病毒感染细胞的杀伤作用。TNF-α参与单核巨噬细胞的活化及自分泌的调节作用,促进单核巨噬细胞及其它细胞产生细胞因子IL-1,IL-6以及TNF-a本身。所以TNF-α可以反映机体的免疫状态。2.4T淋巴细胞亚群CD4,CD8T淋巴细胞是机体免疫系统内功能最重要的一大细胞群,在正常机体内各个T淋巴细胞亚群相互作用,维持着机体正常的免疫功能。CD4细胞是机体免疫系统中的一种重要免疫细胞,CD4主要表达于辅助T(Th)细胞,是Th细胞TCR识别抗原的共受体,与MHCⅡ类分子的非多肽区结合,参与Th细胞TCR识别抗原的信号转导。CD8是T淋巴细胞的一个亚群,在杀伤病毒感染细胞及肿瘤细胞中起重要作用,CD8表面含有两种特征分子,一类是T细胞受体(T-cellReceptor)分子,一类是MHCⅠ类分子,MHCⅡ(MajorHistocompatibilityComplexⅡ)由一条α糖蛋白链和一条β糖蛋白链构成。CD8通过表面的MHCⅠ分子与CD4等其他免疫细胞的MHCⅡ分子结合,从而识别其他免疫细胞表面结合的抗原物质,起到免疫调节的作用。3、淋巴细胞转化率测定淋巴细胞转化试验是利用淋巴细胞与抗原或有丝分裂因子(简称为丝裂原)在体外共同培养,淋巴细胞的代谢和形态发生一系列变化,进一步转化为淋巴母细胞这一特性来反映机体免疫状态的一种试验。淋巴细胞转化率的高低可以反映机体的细胞免疫水平。因此可作为测定机体免疫功能的指标之一。ConA作为T淋巴细胞有丝分裂原,仅促进T淋巴细胞的增殖,对B淋巴细胞不起作用。鸡淋巴细胞增殖反应是衡量机体细胞免疫能力的重要指标,在研究鸡的免疫功能及各种疾病特别是病毒性疾病致病机制时有着重要的作用。3