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2008级《生物化学》（I）试题（A）姓名：学号：班级：一．单项选择题：（每题1分，共15分，直接在题号上划“√”）1.蛋白质变性是由于：A．一级结构改变；B．空间结构改变；C．辅基的脱落；D．二级结构改变；E．蛋白质分解；2.下列关于蛋白质α-Helix的叙述错误的是：A．Pro残基的出现可中断α-Helix；B．疏水环境比亲水环境更稳定；C．侧链原子间的氢键是它稳定的主要作用力；D．它是一些蛋白质的二级结构；3.每克大豆中的含氮量为0.08g，则大豆中蛋白质的含量为：A．60%；B．50%；C．40%；D．30%；4.蛋白质分子中的亚基是指：A．多肽链形成的三级结构的局部的相对独立的球状结构；B．多肽链依靠侧链基团之间的相互作用而形成的球状结构；C．蛋白质分子结构的基本单位；D．参与构成蛋白质四级结构的、具有独立三级结构的多肽链；5.酶原所以没有活性是因为：A．酶蛋白肽链合成不完全；B．缺乏辅酶或辅基；C．结合有抑制剂；D．活性中心未形成或未暴露；E．是变性的蛋白质；6.某一种蛋白质在pH8.0时，向阴极移动，则其等电点是：A.8.0;B.≥8.0;C.=8.0;D.8.0;E.≤8.07.加入哪种试剂一般不会导致蛋白质的变性？A．尿素；B.盐酸胍；C.SDS；D.硫酸铵；E.二氯化汞[]1.膜结构中起主动转运功能的是A.外周膜蛋白（peripheralproteins）；B.糖类；C.内在膜蛋白（integralproteins）；D.疏水分子；E.胆固醇。[]2.对于细胞膜的流体镶嵌模型，下面哪类分子可以横跨膜的内表面和外表面?A.糖；B.胆固醇；C.烃链的尾部；D.磷脂；E.蛋白质。[]3.下列哪种糖不能生成糖脎?A.葡萄糖B.果糖C.蔗糖D.乳糖E.麦芽糖[]4.下列哪一项不是辅酶的功能：A.传递氢B.转移基团C.决定酶的专一性D.某些物质分解代谢时的载体[]5.下列哪一种维生素是辅酶A的前体：A.核黄素B.泛酸C.钴胺素D.吡哆胺[]6.磷脂酰肌醇分子中的磷酸肌醇部分是这种膜脂的那个部分？A.亲水尾部B.疏水头部C.极性头部D.非极性尾部[]7.含B族维生素的辅酶在酶促反应中的作用是：A.传递电子、质子和化学基团B.稳定酶蛋白的构象C.提高酶的催化性质D.决定酶的专一性[]8.下列那种维生素衍生出了TPP:A.维生素B1B.维生素B2C.维生素B5D.生物素二．填空题：（直接在横线上填，每空1分，共25分）1.组成蛋白质的疏水性最强的氨基酸是ILE，极性最强的氨基酸是ARG；2.在蛋白质中存在的特殊氨基酸有（至少3种）：3.His是最常出现在酶催化部位的进行质子转移的氨基酸。4.Lys的pK1=2.2，pK2=9.1，pK3=10.5，则其pI=9.8。5.用PITC进行蛋白质序列测定时，需要使用无水强酸进行水解反应，原因是防止肽键被水解。6.DTNB试剂也称作Ellman试剂，主要用于测定蛋白质中二硫键的形成。7.破坏蛋白质分子表面的水化层和双电层将降低蛋白质的溶解度。8.测定蛋白质分子量常用的方法有（至少3种）：凝胶过滤，电脉，质谱。9.2-Delectrophoresis由二种电泳组成，分别是：SDS和IEF。10.常用测定蛋白质含量的方法有（至少3种）：BCA，Bradford，Follin。11.某米氏酶的Km=1μM，当［S］=100μM时，它催化反应的起始速率为0.1μM/min；若当［S］=2μM时，它催化反应的起始速率为0.067μM/min。12.酶可通过多种机理提高催化反应速率，它们包括（至少3种）：13.能被蛋白激酶磷酸化的氨基酸是（至少3种）：。1.化学方法合成多肽主要包括：1.液相法；和固相法2.乳糖是由一分子_D-葡萄糖_和一分子___D-半乳糖；_组成,它们之间通过______β-1，4__糖苷键相连。3.胆固醇可使膜脂的相变温度范围变宽；，对膜脂的流动性具有一定的调节功能。14.纤维素是由___D-葡萄糖；组成,它们之间通过__β-1，4_糖苷键相连。三．名词解释：（直接在题签后面答，每小题2分，共20分）英文出1.Enzymespecificactivity；catalyticconstant；homogenousprotein；proteinQuaternaryStructure；Allostericeffect；phosphorylation；transitionstate；2.CoenzymeCoenzyme：辅酶：是一类可以将化学基团从一个酶转移到另一个酶上的有机小分子，与酶较为松散地结合，对于特定酶的活性发挥是必要的。3.Proteoglycans：蛋白聚糖：由糖胺聚糖与线性多肽共价结合成的多糖和蛋白质复合物。（或各种糖胺聚糖与不同的核心蛋白质结合而形成的一类糖复合体。）4.Epimers：差向异构体：在立体化学中，含有多个手性碳原子的立体异构体中，只有一个手性碳原子的构型不同，其余的构型都相同的非对映体叫差向异构体四．问答及计算题：（共40分）1.某化合物上含有唯一可解离的基团—COOH，其pKa=3.5，试分别计算该化合物在pH=4.5时，解离形式所占的百分数？（此小题5分）A：利用pH=pKa+log[A-]/[A]进行计算，[A-]/[A]=10，[A-]=90.9%；2.某八肽经处理得到以下结果，请确定该肽的氨基酸顺序，并简单说明理由。（此小题8分）（1）酸水解后测得氨基酸种类为：Ala、Cys、Glu、Lys、Arg、Gly、Met、Phe；（2）在羧肽酶A作用下首先得到的氨基酸无旋光性；（3）用FDNB反应并酸水解后可得到DNP-Ala；（4）用胰蛋白酶水解得三个肽段（A、B、C肽）：A肽为二肽，其水解产物之一有坂口反应；B肽为三肽，其在pH中性时电泳带向负极移动，水解产物之一有醋酸铅反应；C肽为三肽，其在pH中性时电泳不移动；（5）用CNBr作用得二个肽段（D、E肽）：D肽为六肽，其用FDNB反应并水解后可得到DNP-Ala；E肽为二肽；（6）用胰凝乳蛋白酶水解得到二个肽段（F、G肽）：F肽为三肽，其用FDNB反应并水解后可得到DNP-Ala，G肽为五肽。答：Ala-Arg-Phe-Cys-Lys-Met-Gln-Gly。3.一种基因工程表达的蛋白质的分子量为24kDa、pI为5.5，在其N末端含有一段融合肽段，以利于亲和层析。但研究发现该段融合肽段影响该酶的活性，因此，在使用亲和层析纯化目标蛋白质后，需要用另一蛋白酶将该段融合肽段水解掉。该蛋白酶的pI为7.5，分子量为100kDa。你只有DEAE-纤维素和SephadexG100这二种层析介质，请设计一种纯化该酶的实验方案（要写出层析的条件和各种蛋白质的流出顺序）。（此小题6分）答：使用DEAE-纤维素进行离子交换层析，pH为6.5，上样缓冲液浓度约为20mM，则蛋白酶流出，目标蛋白质吸附。然后进行洗脱，或降低pH5.5，或提高浓度至约100mM以上。如果纯度不够高，再进行SephadexG100层析，缓冲液pH为6.5，浓度约为150mM，蛋白酶先流出，目标蛋白质后流出。4.某酶的Km=4.7×10-5mol/L，Vmax=22μmol/min，[S]=2×10-4mol/L，[I]=6×10-4mol/L，Ki=3×10-4mol/L，求当I为非竞争性抑制剂时该酶催化的反应速率和抑制百分数。（此小题6分）答：Vi=Vm[S]/(Km+[S])(1+[I]/Ki)=22×2×10-4/(4.7×10-5+2×10-4)×(1+6×10-4/3×10-4）=44×10-4/2.47×10-4=5.9379μmol/min，Vo=Vm[S]/{Km+[S]}=22×2×10-4/{4.7×10-5+2×10-4}=44×10-4/2.47×10-4=17.8μmol/min，I%=(1-Vi/Vo)%=1—5.9379/17.8=66.6%。5.什么进Bohr效应？血红蛋白A与血红蛋白F在结构与功能上有什么区别？（此小题5分）答：一级结构不同，BPG的调节作用，氧合曲线的改变。6.为什么Superoxidedismutase(SOD)催化反应的kcat/Km可达到2×109M-1s-1这么高？（此小题5分）A：Becauseitisadiffusion-controlledraeaction,anditsnegativelychargedsubstrateisatractedbyapositivelychargedelectricfieldneartheactivesite——Cu2+and4hydrophilicAAs(twoGlu,oneLysandoneArg).TheelectricfieldaroundtheSODactivesiteenhancestherateofformationofESabout30-fold.7.上述化合物中(1)哪个是半缩酮形式的酮糖？(2)哪个是吡喃戊糖？(3)哪个是糖苷？(4)哪个是α-D-醛糖？（此小题5分）答：（1）C(2)D（3）E（4）B