专题二:微生物的培养与应用班级姓名得分呼和浩特第一中学2012学年第二学期1日期1.(15分)某学校打算开辟一块食用菌栽培基地,以丰富学生的劳动技术课内容。首先对食用菌实验室进行清扫和消毒处理,准备食用菌栽培所需的各种原料和用具,然后从菌种站购来各种食用菌菌种。请回答下列问题:(1)微生物在生长过程中对各种成分所需量不同,配制培养基时各成分要有合适的________。在烧杯中加入琼脂后要不停地________,防止__________________________。(2)将配制好的培养基分装到试管中,加棉塞后若干个试管一捆,包上牛皮纸并用皮筋勒紧放入________中灭菌,压力________kPa,温度________,时间________。灭菌完毕拔掉电源,待锅内压力自然降到0时,将试管取出。如果棉塞上沾有培养基,此试管应________________________________________________________________________。(3)使用高压蒸汽灭菌锅时注意,先向锅内倒入________。把锅内水加热煮沸并将其中原有冷空气彻底排出后将锅密闭。(4)从一支试管向另一支试管接种时注意,接种环要在酒精灯________(“内”或“外”)焰灭菌,并且待接种环________后蘸取菌种,试管口不能离开酒精灯火焰附近,将接种的试管在适温下培养,长成菌落后放入________℃冰箱中保藏。2.(15分)下表是一种培养基的配方,请回答:(1)此培养基的营养要素有__________类,其中蛋白胨主要提供的是__________。(2)各成分含量确定的原则是__________。(3)在各种成分溶化分装前,须进行的是__________。(4)该培养基按物理性质划分属于__________培养基,能培养的细菌同化作用类型是__________。(5)如要鉴别自来水中的大肠杆菌是否超标,需加入__________,观察它的__________特征。(6)若酵母菌中混杂有细菌,要将酵母菌分离出来,可采用__________的选择培养基。(7)从配制培养基,到培养完成的整个实验过程中所采用的防止杂菌感染的措施有哪些?_______________________________________________________________________________________________________________________________________________。3.(15分)选择培养是微生物学中最强有力的技术手段之一。主要是指利用不同微生物间生命活动特点的不同,制定环境条件使仅适应条件的微生物旺盛生长,从而使其在群落中的数量大大增加,人们能够更容易地从自然界中分离到所需的特定微生物。选择条牛肉膏0.5g蛋白胨1gNaCI0.5g琼脂2g水100mL专题二:微生物的培养与应用班级姓名得分呼和浩特第一中学2012学年第二学期2日期件可根据所需分离的微生物的特点,从物理、化学、生物及综合多个方面进行选择,如温度、pH、紫外线、高压、光照、氧气、营养等许多方面。下图描述了采用选择方法从土壤中分离能降解对羟基苯甲酸的微生物的实验过程。(1)本实验所需培养基为_______________。(2)实验原理是__________________________________________________________。(3)①→③重复培养的目的是________________________________________________________________________。(4)⑤的菌落中大部分是降解________的微生物。(5)⑥为________组,⑦为________组,设置⑥的目的是____________________________________________________________________。(6)接种到⑥的培养基中,在操作过程中为防止污染应注意的事项是____________________________________________________________________。4.(15分)某小组同学为了调查湖水中细菌的污染情况而进行了实验。实验包括制备培养基、灭菌、接种及培养、菌落观察与计数。请回答与此实验相关的问题:(1)培养基中含有的蛋白胨、淀粉分别为细菌培养提供了________和________。除此之外,培养基还必须含有基本成分是________和________。(2)对培养基进行灭菌,应该采用的方法是________。(3)为了尽快观察到细菌培养的实验结果,应将接种了湖水样品的平板置于________中培养,培养的温度设定在37℃。要使该实验所得结果可靠,还应该同时在另一平板上接种________作为对照进行实验。(4)培养20小时后,观察到平板上有形态和颜色不同的菌落,这说明湖水样品中有________种细菌。一般说来,菌落总数越多,湖水遭受细菌污染的程度越________。(5)如果提高培养基中NaCl的浓度,可以用于筛选耐______细菌,这种培养基被称为________。专题二:微生物的培养与应用班级姓名得分呼和浩特第一中学2012学年第二学期3日期5.(15分)尿素是一种重要的农业肥料,但若不经细菌的分解,就不能更好地被植物利用。生活在土壤中的微生物种类和数量繁多,同学们试图探究土壤中微生物对尿素是否有分解作用,设计了以下实验,并成功筛选到能高效降解尿素的细菌(目的菌)。培养基成分如下表所示,实验步骤如图所示。请分析回答问题:KH2PO41.4gNa2HPO42.1gMgSO4·7H2O0.2g葡萄糖10g尿素1g琼脂1.5g将上述物质溶解后,用蒸馏水定容到100mL(1)此培养基能否用于植物组织培养?________,理由是。(2)培养基中加入尿素的目的是筛选,这种培养基属于________培养基。(3)“目的菌”生长所需的氮源和碳源分别来自培养基中的________和________,实验需要振荡培养,原因是。(4)转为固体培养时,常采用的方法接种,获得单菌落后继续筛选。(5)下列材料或用具中:①培养细菌用的培养基与培养皿;②玻棒、试管、锥形瓶和吸管;③实验操作者的双手。需要灭菌的是:;需要消毒的是:。(填序号)(6)在进行分离分解尿素的细菌的实验时,A同学从培养基上筛选出大约150个菌落,而其他同学只选择出大约50个菌落。A同学的实验结果产生的原因可能有______(填序号)。①由于土样不同②由于培养基污染③由于操作失误④没有设置对照(7)简述土壤中可分解尿素细菌的鉴定方法及原理:____________________________________________________________________,____________________________________________________________________。6.(15分)有些微生物能合成纤维素酶,通过对这些微生物的研究和应用,使人们能够利用秸秆等废弃物生产酒精,用纤维素酶处理服装面料等。纤维素酶可以通过微生物发酵生产,为了提高酶的产量,请你设计一个实验,利用诱变育种的方法,获得产生纤维素酶较多的菌株。专题二:微生物的培养与应用班级姓名得分呼和浩特第一中学2012学年第二学期4日期(1)写出实验步骤:①将培养好的生产菌株分成两组,。②制备含有的固体培养基。③_____________________________________________________________________________________________________________________________________________。④_____________________________________________________________________。(2)预期实验结果及结论:①诱变组中菌落周围的透明圈比对照组________,说明__________________________________________________________。②诱变组中菌落周围的透明圈与对照组________,说明________________________。③诱变组中菌落周围的透明圈比对照组小,说明______________________________。(3)若获得纯净的高产菌株,需进行________或________操作。1.答案:(1)比例用玻棒搅拌琼脂糊底引起烧杯破裂(2)高压蒸汽灭菌锅100121℃15~30min废弃(3)适量水(4)外冷却42.答案(1)五碳源、氮源、特殊的营养物质(生长因子)(2)根据所培养微生物的营养需要(3)调pH(灭菌)(4)固体异养型(5)伊红一美蓝菌落(6)加青霉素(7)对配制的培养基用高压蒸汽灭菌;接种前用酒精擦拭双手;试管加棉塞;接种前用火焰灼烧接种针(接种环);接种在酒精灯火焰旁完成。3.答案:(1)选择培养基(2)利用以对羟基苯甲酸为唯一碳源的选择培养基,经选择培养,选择出能降解对羟基苯甲酸的微生物(3)增大分解对羟基苯甲酸微生物的比例(4)对羟基苯甲酸(5)对照实验说明通过选择培养的确得到了欲分离的目标微生物(6)接种环在火焰上灼烧灭菌,烧红的接种环在空气中冷却,同时打开皿盖挑取菌种接种到试管中,并塞好棉塞,接种环在火焰上灼烧,杀灭残留物4.答案:(1)氮源(碳源不作要求)碳源无机盐水,(2)高压蒸汽灭菌(3)恒温培养箱无菌水(4)多高(5)盐(或NaCl)选择培养基5.答案:(1)不能缺少多种必需的矿质元素(2)目的菌选择(3)尿素葡萄糖为目的菌提供氧气(4)涂布平板(划线)(5)①和②③(6)①②③(7)在以尿素为唯一氮源的培养基中加入酚红指示剂,细菌合成的脲酶将尿素分解为氨,pH增高,使酚红指示剂变红6.答案:(1)①一组用一定剂量的诱变剂处理,另一组不处理作为对照②纤维素③把诱变组的大量菌株接种到多个含有纤维素的固体培养基上,同时接种对照组(未处理)的菌株,把它们置于相同的适宜条件下培养④一段时间后,取培养基用刚果红染色,观察记录菌落周围透明圈的大小情况(2)①大诱变育种获得了高纤维素酶产量的菌株,②相同诱变育种没有使菌株发生变化③诱变育种获得了低纤维素酶产量的菌株,(3)平板划线稀释涂布平板专题二:微生物的培养与应用班级姓名得分呼和浩特第一中学2012学年第二学期5日期6.在农业生产研究上,常需要进行微生物的培养和计数。(1)下图是利用________法进行微生物接种,把聚集的菌种逐步________分散到培养基的表面,为达到这一目的,操作上应注意:(至少答2项)__________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________。(2)分析下面培养基的配方:NaNO3、KH2PO4、Na2HPO4、MgSO4·7H2O、KCI、H2O。若此培养基用于培养分解尿素的细菌,则应除去上述______________成分,并加入葡萄糖和______________。(3)三位同学用稀释涂布平板法测定同一土壤样品中细菌数量。在对应稀释倍数为106的培养基中,得到以下统计结果:甲同学涂布了两个平板,统计的菌落数是236和260,取平均值248。乙同学涂布了三个平板,统计的菌落数是210、240和250,取平