咽拭子快速培养在肺炎支原体(MP)感染中的临床应用价值

期刊文献咽拭子快速培养在肺炎支原体（MP）感染中的临床应用价值谢启武时澄汪海波【摘要】目的评估咽拭子快速培养对早期诊断支原体感染的临床应用价值。方法将176例患儿分成A、B两组，A组94例，B组82例，A组为病程﹤7d,B组为病程≥7d；入院后两组中每个患儿均予以咽拭子MP培养及血MP-IgM检测，比较每组两种检查阳性率有无差异。结果A组中咽拭子培养（+）且血MP-IgM（-）为21例，咽拭子培养（-）且血MP-IgM（+）为7例，x2=6.0357，p﹤0.05，差异有统计学意义，咽拭子MP培养阳性率明显高于血MP-IgM；B组中x2=0.1904，p＞0.05，差异无统计学意义。结论咽拭子快速培养对肺炎支原体感染的早期诊断有一定临床应用价值，方法简单，创伤小，值得在临床推广。【关键词】咽拭子肺炎支原体快速培养ThroatswabrapidcultureofMycoplasmapneumoniaeinfectionintheclinicalapplicationvalue.XieQiwu,ShiCeng,WanghaiboDepartmentofPediatrics,TonglingMaternalandChildHealthHospital，Tongling244000，Anhui【Abstract】ObjectiveAssessmentofthroatswabrapidcultureforearlydiagnosisofMycoplasmapneumoniaeinfectioninclinicalapplicationvalue.MethodsThe176casesofchildrenweredividedintoA、Bgroups,Agroupof94cases,Bgroupof82cases,Agroupforthedurationof7d,Bgroupforthedurationof≥7d；EachofthetwogroupsafteradmissionwasreceivedthroatswabcultureandbloodMP-IgMtest,andthedifferenceofpositiveratewerecomparedfromtheresultsofthetwogrops.ResultsFromAgroupthroatswabculture(+)andbloodMP-IgM(-)were21cases,throatswabculture(-)andbloodMP-IgM(+)were7cases,withstatisticaldifference(x2=6.0357,P0.05).Thepositiverateofthroatswabculturewasprominentlyhigherthanthelater；TherewasnostatisticaldifferenceingroupB(x2=0.1904,P＞0.05).ConclusionThroatswabrapidcultureforearlydiagnosisofMycoplasmapneumoniaeinfectionhascertainclinicalvalueandthemethodissimple,lessinvasiveandshouldbeworthyofrecommendationforwideruseinclinic.【Keywords】Throatswab；Mycoplasmapneumoniae；Rapidculture近年来，肺炎支原体(MP)感染率呈逐年上升趋势，发病年龄趋小，临床表现多种多样，且很难与病毒、细菌等其它病原微生物感染相鉴别。而血MP-IgM产生较晚，不利于疾病早期诊断，因此寻找一种MP感染的早期实验室诊断标准显得尤为重要。本科室最近引进肺炎支原体快速鉴定培养试剂盒，现将2011年5月～12月收治的176例患儿同时进行了咽拭子MP培养和血MP-IgM检测，现将结果分析如下：1资料与方法1.1临床资料与分组176例患儿中，男98例，女78例，年龄﹤1岁38例，1～3岁55例，3～6岁54例，＞6岁29例。所有患儿入院前半个月均未使用过大环内酯类抗生素，平均病程（5.89±3.49）d，入院时的临床症状主要有：发烧、咳嗽喘息、心慌胸闷、皮疹、头痛抽搐、腹痛呕吐及关节痛等。将176例患儿分成A、B两组，A组94例，B组82例，A组为病程﹤7d,B组为病程≥7d，两组在性别、年龄、体重及临床表现等方面差异均无统计学意义（P＞0.05）。1.2方法与试剂入院后两组中每个患儿均予以咽拭子MP培养及血MP-IgM检测。咽拭子MP期刊文献快速鉴定培养基试剂盒由潍坊市汉唐生物工程有限公司提供[生产企业许可证编号：鲁食药监械生产许20080087号；注册证编号：鲁潍食药监械（准）字2010第1400140号]。将无菌棉签在患儿的口腔咽喉部捻转数次，取出棉拭子将其放入已复温的试剂瓶内搅动数次，在瓶口处折断棉签柄，旋紧瓶盖，置37℃恒温培养箱孵育6～8h即可。血MP-IgM检测（被动凝集法）试剂盒由日本富士瑞必欧株氏会社提供[SERODIA®-MYCOⅡ，注册证书编号：国食药监械（进）字2009第3402832号]。1.2判断标准咽拭子培养基颜色由红色变为桔黄色或淡黄色且仍保持清澈透明为支原体（+）,培养基颜色不变色或虽变色但外观混浊为支原体（-）；血MP-IgM检测：抗体滴度≥1:40为（+）。1.3比较两组内阳性率有无差异即各组内咽拭子MP培养（+）且血MP-IgM（-）与咽拭子MP培养（-）且血MP-IgM（+）的例数差异有无统计学意义。1.4统计学方法采用SPSS13.0V统计学软件，行自身配对两分类的x2检验。2结果表1A组咽拭子MP培养与血MP-IgM的比较（例）咽拭子MP培养血MP-IgM合计+-+-13217533460合计207494表2B组咽拭子MP培养与血MP-IgM的比较（例）咽拭子MP培养血MP-IgM合计+-+-20129413250合计2953822.1A组中统计结果x2=6.0357，p﹤0.05，差异有统计学意义，咽拭子MP培养的阳性率明显高于血MP-IgM(见表1)；2.2B组中统计结果x2=0.1904，p＞0.05，差异无统计学意义，尚不能认为咽拭子MP培养和血MP-IgM的阳性率有差异(见表2)。3讨论期刊文献肺炎支原体(MP)是介于细菌和病毒之间的已知能独立生活的最小病原微生物，无细胞壁，大小125～150nm，需要在含胆固醇的特殊培养基，接种后10天才能长出菌落，呈球状、杆状、丝状等多种形态，革兰氏染色阴性【1】。目前认为MP感染主要通过飞沫传播，，MP进入呼吸道后，利用它的神经氨酸受体与呼吸道黏膜上皮紧密附着，释放一种特异性的危害物质(氧自由基)——过氧化氢，造成呼吸道黏膜上皮破坏，这是MP的主要致病方式【2】。MP肺炎感染在非感染期间占小儿肺炎的10%～20%，流行年份可达30%【3】。每隔3～7年发生一次区域性流行，持续时间可达1年。其流行特点之一是发病年龄趋小，儿童和婴幼儿感染率都有增加趋势【4】。近年来发现MP感染在儿科除了引起呼吸道病变外，还可以引起多系统损伤，我国有关报道MP感染肺外脏器受累达52.35%【5】。且较多患儿以肺外症状为首发表现，极易造成误诊，常在应用β-内酰胺类抗生素一段时间后无效，进一步检查后才考虑为MP感染所致，延误病情最佳治疗时机。因此MP感染的相关检测应成为儿科常规辅助检查之一，必须引起儿科临床医生的重视。目前临床上MP感染的最常用检查是血清冷凝集素(属IgM型)，大多滴度上升至1：32或更高，阳性率50%～70%，病情愈重阳性率越高。冷凝集素大多于起病后第一周开始出现，至第3～4周达高峰，2～4个月消失【1】。由于婴幼儿免疫系统尚未完全发育完善，部分免疫功能低下，MP感染时抗体产生不足，并且MP-IgM阳性率受年龄、时间、B细胞功能及敏感性等多因素影响，产生假阴性，影响检出率【6】。发病1周后才是MP-IgM最佳检测时机，不利于临床早期诊断与治疗，且抗体在病原体消失后数周仍然存在，可能导致误诊【7】。此外临床上应用的聚合酶链反应(PCR)法以特异性引物通过PCR技术从患者呼吸道分泌物中检测MP-DNA,敏感性和特异性高，对MP感染的早期诊断意义较大，但PCR本身存在假阳性，操作复杂且对实验室的环境要求较高，并且需昂贵的仪器，检测费用亦较高，从而在一般实验室不能普及开展【8】。另外用病人的痰液或咽拭洗液培养支原体需要2～3周，因此对临床帮助不大。而MP快速鉴定培养基是一种有利于MP生长的条件培养基，培养基内含有葡萄糖、酚红、小牛血清及抑菌剂，MP在生长繁殖时分解葡萄糖产生氢离子，使培养基的PH值下降，培养基内的酚红由红色变为黄色。一般在标本置恒温培养箱内(37℃)孵育6～8h，期间就可取出观察并判定结果。标本中的其它细菌因培养基中加入的生物抑菌剂而被抑制，对结果影响甚微。笔者对MP快速鉴定培养基培养结果阳性患儿均予以大环内酯类抗生素正规治疗，大多数取得了满意疗效，进一步证实MP快速鉴定培养法结果可靠，值得信赖，尤其对MP感染的早期诊断比血MP-IgM检测更加有临床参考价值。另外，MP快速鉴定培养法简便快速，6～8h即可出结果，实验室条件要求不高，无需特殊仪器设备，且创伤小，易于被家长接受，值得在临床尤其是基层医院推广。【参考文献】[1]胡亚美，江载芳.诸福棠实用儿科学[M].7版.北京：人民卫生出版社，2002:1204-1205.[2]吕蓉蓉.儿童肺炎支原体感染的研究进展[J].中华儿科杂志,2011,7(5):58.期刊文献[3]沈晓明，王卫平.儿科学[M].7版.北京：人民卫生出版社，2008：208.[4]宋世军，张旋，谢世营.儿童肺炎支原体抗体检测和肺炎支原体培养的对照研究[J].中国优生与遗传杂志,2007,15(9):98-99.[5]陈亚萍.肺炎支原体感染肺外表现156例[J].临床肺科杂志，2007,12(4):374.[6]刘宁.患儿肺炎支原体、衣原体诊断价值[J].检验医学，2007,22(2):110-113.[7]张国英，李鑫，徐卫平.肺炎支原体咽拭子培养法的临床应用[J].中国误诊学杂志，2009,9(33):8119.[8]张宏辉.肺炎支原体快速鉴定培养基在小儿支原体肺炎早期诊断中的应用[J].当代医学，2009,15(16):171.作者简介：谢启武（1975～），男，在职研究生，主治医师Tel:15921334262E-mail:[e-mail]工作单位：安徽省铜陵市妇幼保健院儿科244000