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华西药学院2009-2010学年上学期分子生物学考题答案2013年1月22日晚使用说明：此答案仅供参考，如有谬误，还请见谅！一、英文翻译【12*0.5=6分】1SNP单核苷酸多态性2Transposon转座子3RNAsplicingRNA剪接4Attenuator衰减子5determinationofDNAsequenceDNA序列测定6Interruptedgene断裂基因7DDRPDNA指导的DNA聚合酶8CRP分解代谢基因活化蛋白9site-specificinvitromutation体外定向突变10frameshiftmutation移码突变（这个过时了，不考）11translocation移位12primase引物酶二、名词解释【10*2=20分】1Enhancer增强子：指远离转录起点，决定基因表达的时空特异性，增强启动子转录活力的一段DNA序列。2Molecularchaperone分子伴侣：细胞内能够帮助新生肽链正确折叠和装配组装成为成熟蛋白质的一类蛋白因子，在真核生物和原核生物中广泛存在。3semidiscontinousreplication半不连续复制：一条链上的DNA在DNA聚合酶的作用下以5'-3'方向连续合成一条长的DNA链，而另一条另一条链的DNA合成是不连续的，即先合成一段段短的DNA片段，再将这些短片段连成DNA长片段，这样的过程称为半不连续复制4supergenefamily超基因家族:来源相同、结构相似，但功能却不尽相同的一大批基因，这一大批基因分属于不同的基因家族，总称为超基因家族5promoter启动子：RNA聚合酶识别、结合和开始转录的一段DNA序列，是RNA聚合酶起始转录需要的辅助因子6micRNA干扰mRNA的互补RNA，即反义RNA，通过碱基互补和特定mRNA的SD序列、起始密码子AUG以及它们的上下游的部分核苷酸序列结合，从而抑制mRNA的翻译7reversetranscription逆转录：以RNA为模板合成DNA，这与通常转录过程遗传信息从DNA到RNA的方向相反，故称为逆转录作用，通常又叫做RNA指导的DNA合成。8stringentresponse严紧反应（这个过时了，不考）9gRNA（这个过时了，不考）10physicalmap物理图谱:以一段已知的核苷酸序列的DNA为“位标”，以碱基对Mb或Kb等物理距离为图距的基因组图。三、填空【60*0.5=30分】1、RNA生物合成抑制剂有【】、【】、【】三种，其中碱基类似物是属于【】（这个过时了，不考）2、Southern印迹杂交是鉴别【DNA】靶分子的杂交，Northern印迹杂交是鉴别【RNA】靶分子的杂交，而Western印迹杂交可以用来分析【蛋白质】3、端粒的复制依赖【端粒酶】的催化，以【RNA】为模板通过【逆转录】方式来完成4、RNA聚合酶对转录起始的调控主要是通过【σ亚基替换】来调控，这是因为【σ因子】能够识别DNA分子上的RNA合成的起始信号，不同的【σ因子】会竞争性的与核心酶结合，而且【环境】的变化可以诱导产生特定的【σ因子】，从而开启特定的基因。5、DNA复制后修复主要有【重组修复】和【SOS修复】两大类，其中【SOS修复】属于差错倾向性修复。6、根据突变带来的效果，DNA突变可分为【无义突变】、【同义突变】和【错义突变】，其中【同义】突变并没有改变蛋白质产物的氨基酸序列，是因为碱基的改变只是使一个密码子变成了它的【简并密码子】。7、蛋白质的生物合成过程中，肽链的延长由若干个循环组成，每一个循环包括【进位】、【成肽】和【移位】三个步骤。8、Trp操纵子结构基因E和D，B和A之间保持翻译步调一致的机制是通过【基因重叠】实现【翻译偶联】。9、TaqDNA聚合酶是在【PCR】技术中使用的一个重要工具酶，其最大特点是【耐热】，但是由于TaqDNA聚合酶不具有【3'-5'外切酶】活力，因此其没有校对功能。10、乳糖操纵子同时独立地受到【正】、【负】两个系统的调控，只有当【cAMP-CAP】结合到【CAP结合位置】上和【阻遏蛋白】脱离【操纵基因】时，才开始结构基因的转录。11、典型转座子都含有【】和【】两个基本序列，如果按【】分类，可以分为【】和【】。（不考了，过时了）12、染色质从形态上可以分为【常染色质】和【异染色质】，其中【常染色质】是一种【松懈伸展】的DNA状态，可以进行活跃的复制和转录。13、tRNA的功能位点有【氨基酸接受位点】、【识别氨酰-tRNA合成酶位点】【反密码子位点】和【核糖体识别位点】。14、致癌RNA病毒是以【出芽】方式从细胞中释放，不会使宿主细胞裂解，其致癌机理是通过【前病毒的癌细胞基因编码的蛋白质】使细胞发生癌变，病毒RNA通过【逆转录】生成dsDNA并整合到宿主DNA序列中是病毒致癌的重要环节，因此【逆转录酶】是新药设计和疾病治疗的重要靶酶。15、RDDP具有【依赖RNA的DNA聚合酶】、【依赖DNA的DNA聚合酶】和【RNaseH】活力。16、保证DNA复制忠实性的三大防线是【复制系统的忠实性】、【损伤修复】、【复制后修复】。四、不定项选择【7*2=14】【此处以往年判断并说明理由题代替】1、复制子是从启动子到终止子之间的一段DNA序列。参考答案：错，因为复制子是从复制起点到复制终点的一段DNA序列，参与的是DNA的复制，而启动子和终止子参与的是转录过程。2、顺反子与基因是同义语。参考答案：错，因为顺反子是一段编码蛋白质的核苷酸序列，只是一段编码序列，而基因不仅包含编码序列，还应包括调控序列。3、核酸分子杂交技术的目的是扩增DNA。参考答案：错，因为核酸分子杂交技术的目的是定性或定量地测量特定的核苷酸序列4、从模版的使用情况来讲，DNA转录是对称的，全保留的。参考答案：错，因为转录是不对称的5、经过剪接的mRNA遗传信息不全来自DNA。参考答案：错，因为经过剪接的mRNA遗传信息全部来自DNA（自己再拓展一下吧，结合剪接的概念和特点）6、真核生物的mRNA是多顺反子RNA。参考答案：错，真核生物的mRNA是单顺反子RNA7、PCR扩增产物的特异性是由模板的纯度确定的。错，PCR扩增产物的特异性是由引物决定的。五、简答题【30分】1、比较转录和复制的异同点答：2、简述核糖体的活性中心答：A.mRNA结合位点B.Aa-tRNA结合位点C.肽基-tRNA结合位点D.tRNA排出位点E肽酰转移酶位点3、比较DDDP、DDRP、RDDPDDRPDDDPRDDP概念DNA指导的RNA合成DNA指导的DNA合成RNA指导的DNA合成参与反应转录复制逆转录模板DNADNARNA原料NTPdNTPdNMP合成方向5'-3'5'-3'5'-3'特点需镁离子，模板，不需要引物，能直接启动一条新链合成需镁离子，模板，需要引物，不能直接启动一条新链合成需模板和引物忠实性低，缺乏校对功能高低，缺乏校对功能4、抗肿瘤药物分为哪几种种类，每一种的作用机理是什么，请举例说明。参考答案：（1）针对逆转录酶的抗肿瘤药，如AZT，抗HIV药（2）RNA合成抑制剂如烷化剂（3）抗代谢肿瘤药，如长春新碱。5、请简述操纵子的基因表达调控思想。参考答案（不一定对）：操纵子水平的调控主要有以下三种类型：（1）诱导型操纵子（乳糖操纵子）（2）阻遏操纵子（色氨酸操纵子）（3）cAMP-CAP正调控系统。乳糖操纵子同时独立地受到正、负两个系统的调控，只有当cAMP-CAP结合到CAP结合位置上和阻遏蛋白脱离操纵基因时，才开始结构基因的转录。其基因调控思想为：结构基因只是提供了编码蛋白质一级结构的一种潜在可能性。6、【原文为英文】假设一个细菌DNA复制水平较低，而其细胞内DNA聚合酶I、III，连接酶、解链酶，SSB和旋转酶均正常，dnaA、B、C也均正常，染色体中oriC区域也为正常水平，为何该细菌DNA复制水平比较低。参考答案（不一定对）：缺少引物酶，同时也缺乏原料7、构建一个已知分子大小氨基酸序列的真核生物蛋白的原核表达系统，经过以下三个步骤：1）从组织和细胞中分离提取RNA转录复制概念DNA指导的RNA合成DNA指导的DNA合成合成原料NTPdNTP聚合酶DDRPDDDP合成方向5'-3'5'-3'模板不对称转录，只有一条链做模板两条链分开各自同作为模板忠实性低，DDRP缺乏校对功能高调控主要是转录起始主要是复制起始2）PCR扩增RNA并逆转录为DNA3）将DNA整合到载体上问：1）从组织细胞中提取的RNA应该是哪一种，为什么2）PCR扩增的引物有什么要求，为什么3）有人认为此过程过于繁琐，可直接用蛋白质来制作DNA序列，此方法是否可行，为什么参考答案（不一定对）：（1）mRNA，因为只有mRNA才能逆转录为DNA（2）A.a.5'端引物应与待扩增片段5'端上游的一小段DNA序列相同，引导信息链的合成；b.3'端引物应与待扩增片段3'端上游的一小段DNA序列互补，引导互补链的合成B.因为引物决定PCR扩增产物的特异性和长度。（3）不能，因为此系统为原核生物的基因系统，原核生物的基因为连续基因，不具内含子，而真核生物的基因为不连续基因，有内含子，在转录时需要进行加工，原核系统无法做到！补充：05-06年分子生物学(重题不再写)一翻译1.replicon复制子2.SSB：单链结合蛋白3.nucleicacidhybridization核酸分子杂交4.DNAligaseDNA连接酶5.RDRPRNA指导的RNA聚合酶6.PDI蛋白质二硫键异构酶7.nucleosome核小体8.exon外显子9.okazakifragment冈崎片段二、名解1.telomerase端粒酶：是由一条RNA和蛋白质组成的复合物，为逆转录酶，能够以其自身携带的RNA为模板逆转录合成DNA2.分子伴侣（上面已有，不再赘述）3.semi-reservativereplication半保留复制：DNA在复制时，两条链解开分别作为模板，在DNA聚合酶的催化下按照碱基互补配对的原则合成两条与模板链互补的新链，以组成新的DNA分子，新合成的DNA分子与亲代DNA的碱基顺序完全一致，由于子代DNA中一条链是新合成的，一条链来自亲代DNA，故称为半保留复制。4.超基因家族（上面已有，不再赘述）5.operon操纵子：由几个功能相关的结构基因和调控区组成的一个基因表达的协同单位。6.micRNA（上面已有，不再赘述）7.translationalrepression翻译阻遏，利用阻遏物对翻译进行调控的机制，cp通过特异性结合到rep基因的核糖体结合位点上阻遏rep基因的翻译8.hnRNA核内不均一RNA真核生物的原初转录物是分子量极大的前体，在核内加工过程中会形成分子大小不等的中间物，称为核内不均一RNA9.gRNA（上面已有，不再赘述）10.严紧反应（上面已有，不再赘述）三、填空1.tRNA对Aa的选择性主要通过【氨酰-tRNA合成酶的专一性】来实现，而tRNA对mRNA的选择则是通过【密码子与反密码子的配对】来实现的四、问答1简述原核生物DNA复制有关的酶类及其功能：参考答案：A.DNA连接酶：连接DNAB.DNA解链酶：水解双链DNAC.引物酶：启动RNA引物的合成D.DNA旋转酶：又称拓扑异构酶II，兼具内切酶和连接酶活力，能放松复制叉前方的正超螺旋，便于解链E.SSB（单链结合蛋白）：选择性地结合在解开的单链DNA上，防止DNA单链重新形成双螺旋结构F.DNA聚合酶：催化新生DNA的合成2.以操纵子的基因表达调控为例，说明RNA聚合酶对启动子或操纵子的选择主要由细菌赖以生存的培养基的营养成分决定的。3.答：在原核生物的基因表达调控中RNA聚合酶对启动子或操纵子的选择主要由细菌赖以生存的培养基的营养成分决定的，其调控机制主要是通过诱导型操纵子的调控机制来实现的。例：乳糖操纵子的调控，当环境中含有葡萄糖时，葡萄糖的分解代谢产物使细胞内cAMP处于低水平，CAP失活，无法打开结构基因，乳糖操纵子关闭。如果环境中没有葡萄糖时，乳糖操纵子也不一定打开，因为如果