单克隆抗体制备服务

整理文档很辛苦,赏杯茶钱您下走!

免费阅读已结束,点击下载阅读编辑剩下 ...

阅读已结束,您可以下载文档离线阅读编辑

资源描述

应用淋巴细胞杂交瘤技术将免疫动物的B淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合形成杂交瘤细胞,通过HAT筛选,ELISA抗体检测,有限稀释克隆化,选择出具有分泌抗体功能又能无限繁殖的来源于单一B细胞的杂交瘤细胞。该细胞分泌产生非常均一的、其结构、氨基酸顺序都是一致的,且只针对一种抗原决定簇的高特异性抗体,这就是单克隆抗体。单抗的最大优势是它的特异性、均一性、高效性和无限供应性。在免疫学、医学、生物学等领域的基础研究和临床医学上,包括对疾病(包括癌症)的诊断、预防和治疗等方面,均显示出巨大的生命力。服务内容(1)免疫和ELISA检测:客户提供蛋白质或多肽与载体蛋白(如KLH)偶联,需要约4mg蛋白质免疫源或5~10mg多肽,免疫5只Balb/c小鼠,采血用ELISA进行检测。(2)融合和帅选:用小鼠脾细胞与骨髓瘤细胞进行融合,得到的杂交瘤细胞通过增殖和ELISA筛选得到高效价的克隆。(3)亚克隆和交付结果:挑选两个最好的克隆进行亚克隆和亚型鉴定,交付结果包括每个克隆一瓶细胞核5ml培养上清。服务标准项目备注动物至多5只Ballb/C小鼠或3只大鼠弗氏试剂加弗氏完全佐剂进行初疫,然后除终免外都弗氏不完全佐剂进行免疫免疫原每只小鼠/大鼠每次注射10~50ug蛋白或多肽偶联物免疫免疫原用无菌盐水稀释并与佐剂混合,腹腔注射,在免疫存在下产生加强性的免疫应答周期第1天采血0.2ml(获得0.1ml免疫前血清)第一次免疫(抗原加弗氏完全佐剂)第14天第二次免疫(抗原加弗氏不完全佐剂)第21天采血和ELISA检测第28天第三次免疫(抗原加弗氏不完全佐剂)第35天采血和ELISA检测第42天第四次免疫(抗原溶于PBS或盐水)第47天细胞融合细胞融合用显示出预期免疫应答的小鼠进行细胞融合扩增及筛选融合细胞96孔板培养,ELISA筛选阳性克隆亚克隆阳性克隆用有限稀释法亚克隆并鉴定亚类。稳定的单克隆杂交瘤细胞用培养瓶扩增并冻存我们提供交付包括2瓶冻存的细胞或者每克隆提供1瓶活细胞及5ml培养上清此外,我们还提供完整的详尽的实验报告。

1 / 2
下载文档,编辑使用

©2015-2020 m.777doc.com 三七文档.

备案号:鲁ICP备2024069028号-1 客服联系 QQ:2149211541

×
保存成功