单宁的测定方法

油菜籽皮中单宁含量的测定Folin-Denis比色法[3]。原理单宁类化合物在碱性溶液中,可将磷钨酸钠还原并生成蓝色化合物,颜色的深浅与单宁含量正相关,在760nm最大吸收处比色,以单宁酸为标样作标准曲线,再根据测得的吸光值在标准曲线上查得对应的单宁含量。标准曲线的制作准确配制01100mg/mL的单宁酸标准溶液,分别吸取0、0.5、1.0、1.5、2.0、2.5、3.0、3.5mL标准液加入装有25mL水的50mL容量瓶中,再各加215mLFolin-Denis显色剂,10mLNa2CO3饱和溶液,摇匀定容,室温下放置30min后比色,用0mL标准液的反应体系作参比,每个样品作3次平行测定,以平均吸光值与标准溶液的反应体系作线性回归分析,得到回归方程。标准曲线如图1所示。图1Folin-Denis法测定单宁含量的标准曲线油菜籽皮中单宁含量的测定取油菜籽皮5g,用50%乙醇(料液比1：6)在70℃下搅拌40min,超声波辅助提取。提取3次,将油菜籽皮单宁的提取液合并,定容至250mL,取提取液1mL于含约25mL水的50mL容量瓶中,加215mLFolin-Denis显色剂,10mLNa2CO3饱和溶液,摇匀定容至50mL,室温下放置30min后于760nm处进行比色测定。再根据标准曲线查找所测吸光值对应的单宁浓度,计算出油菜籽皮中单宁含量。单宁含量(%)=单宁量(g)/样品重(g)*250