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一、绪论1.微生物（microorganism）微生物学（microbiology）*2.卫生微生物学（sanitarymicrobiology）是研究微生物与其环境相互作用的规律、对人类健康的影响以及应对方略的科学。3.卫生微生物学的展望：（1）不断发现新的病原微生物古老的传染病（结核，梅毒）死灰复燃对人类造成新的威胁；新的传染病不断出现（2）真菌和细菌毒素的深入研究（3）环境微生物检测方法和卫生标准的建立（4）环境中病毒的研究*4.新发现的传染病：出血性肠炎—肠出血性大肠埃希菌O157：H7；霍乱—O139群霍乱弧菌军团菌病---军团杆菌G-杆菌；莱姆病---伯氏疏螺旋体；埃博拉出血热---病毒疯牛病—朊毒体（又称朊粒，比病毒结构简单。人食用被疯牛病病毒污染的食物，发生致死性的神经系统疾病，称为人类新型克—雅氏病）；艾滋病—人类免疫缺陷病毒HIV传染性非典型肺炎SARS---新型冠状病毒SARS2CoV第二章微生物生态学1.生态学（Ecology）：研究生物系统与其环境条件间相互关系、相互作用规律的科学2.微生物生态学Microbialecology：是研究微生物与其生存环境、微生物群体之间相互关系的科学。3.生物圈（biosphere）地球上存在生命的部分，也叫生态圈（ecosphere），也可以说是地球上所有生物及其居住环境的总和。生境（habitat）：生物栖息的场所，或者说生物生存的环境。4.个体（individual）：指具有一定功能的生物体。种群（population）：是由许多相同的个体组成，种群内的个体之间是一个有机的统一体。是物种的具体存在单位、繁殖单位和进化单位。群落（community）：各种生物种群聚集在一起。*5.种群间八种相互关系：共生（symbiosis）或是共处（neutralism）：是指两种生物同时生存于同一栖息场所内，但两者之间互不影响，不发生生态关系，至少是没有直接的生态关系。寄生（parasitism）：一种生物侵入到另一种生物体上，从宿主体内获得自己所需要的营养物质并生长繁殖，使后者遭受损害。偏利互生（commensalism）：是指两种种群共同存在于一个生境中，其中一个获益，另一个不受影响。互利互生（mutualism）：指生活在同一生境的两种生物互换产物，互相依赖，共同有利，在生理上形成一个整体。互惠互生（synergism）：有时两个种群的共同生存可以互相受益，但不一定是固定的关系，解除关系后双方都能独立存在。竞争（competition）：指两个种群共同生活在同一环境中，因需要相同的生长因子或其他环境条件而发生的争夺拮抗（amensalism）：也称为偏害共栖，指两个种群共同生长，一种微生物产生一种物质能干扰其他微生物的代谢活动，以抑制其生长和繁殖甚至造成死亡，而对前者本身没有影响。捕食（predation）：是一种种群被另一种种群吞食的现象，捕食者从中得到营养，对被捕食者产生不利影响。6.*演替（succession）：在特定的生态系统中，不同生物群落相继更替的过程。即一个群落被另一个群落替换的过程。*顶级群落（climax）：在演替中最后稳定的群落成为顶级群落。第三章卫微研究与检测方法*1.（大题）指标微生物（indicatormicroorganism）概念：在常规卫生监测中，用以指示检品卫生状况及安全性的指示性微生物。指标微生物的分类：（1）评价样品一般卫生状况、污染程度和安全性：菌落总数、霉菌和酵母菌数。（2）粪便污染指示菌：大肠菌群、肠球菌、产气荚膜梭菌。（3）其他指标菌：特定菌，致病菌，病毒2.（多选题）指标微生物的选择标准：（一）一般卫生指标微生物的选择标准易于检出；检验方法简单、方便；有一定的代表性（二）粪便污染指标微生物的选择标准是人类肠道正常菌群的组成部分，数量上占优势。受人类粪便污染的样品中易检出，而在未被污染的样品中则无此种菌存在。排出体外后，在外环境中存活时间与肠道致病菌大致相似。（或稍长）作为饮用水的指标菌，对氯的抵抗力应不低于肠道致病菌或略强些，而且进入水中不会生长繁殖。检验方法简便，易于检出和计数。*2、指标微生物分类：1.评价样品一般卫生状况、污染程度和安全性：菌落总数、霉菌和酵母菌数。2.粪便污染指示菌：大肠菌群、肠球菌、产气荚膜梭菌。3.其他指标菌：特定菌，致病菌，病毒一般卫生状况指标菌：3.菌落总数的概念：是指被检样品的单位重量（g）、容积（ml）、表面积（cm2）或体积（m3）内，所含有的能在某种培养基上经一定条件、一定时间培养后生长的菌落总数。卫生学意义：是判定样品被微生物污染程度的程度，菌落总数越多，说明污染程度越严重。菌落总数=细菌菌落总数+霉菌菌落总数+酵母菌菌落总数细菌菌落培养的一定条件：一般用营养琼脂培养基，37℃有氧条件下培养一定时间（水样18~24h，食品样品48h）后生长得菌落总数。霉菌和酵母菌总数是指检样经过处理，在一定条件下培养后，所计算出的1g或1ml检样中所含的霉菌和酵母菌的菌落数。卫生学意义：是判定被检样品被霉菌和酵母菌的污染程度的指标菌。检验方法：倾注平板法。一定条件是指培养基--粮食：高渗察氏培养基；食品、药品、化妆品：孟加拉红（虎红）培养基。需氧条件，28℃，培养3天4．菌落总数的检验方法：倾注平板法（又叫混合法，标准平板法，为标准检验方法。）；表面涂布法；表面滴定法粪便污染指示菌：***5.（考点）大肠菌群（coliformgroup）：是一群能在37℃、24小时内发酵乳糖、产酸产气，需氧或兼性厌氧的革兰阴性无芽孢杆菌。包括4个菌属：埃希菌属、枸橼酸杆菌属、克雷伯菌属、肠杆菌属。卫生学意义：大肠菌群菌主要来源于人畜粪便，故将其作为粪便污染的指标菌，大肠菌群数越高，说明粪便污染越严重，推断样品中可能存在肠道致病菌。6.能在37度生长的称为总大肠菌群，而在44.5度仍能生长的大肠菌群称为耐热大肠菌群（粪大肠菌群（faecalcoliform））；粪链球菌（即肠球菌）：在动物粪便中所占比例高，故二者比值可判断粪便来源：粪大肠菌群/肠球菌＞4.1，污染来源于人粪便；粪大肠菌群/肠球菌＜0.7，污染来源于动物粪便；在0.7~4.1之间，混合污染。7.产气荚膜梭菌（亚硫酸盐还原梭菌）：在外界环境存活的时间较长。作为水或土壤卫生细菌学检验中的指标菌，判断污染时间。8.特殊环境的卫生指标菌：（1）判断压力蒸汽锅灭菌效果：嗜热脂肪杆菌芽孢（2）判断电离辐射灭菌或消毒效果：短小杆菌（3）判断环氧乙烷灭菌或消毒效果：枯草杆菌黑色变种芽孢9.特定菌：是指在某些检品中规定不得检出的菌类，包括非致病菌（或条件致病菌）和致病菌。用于药品、化妆品致病菌：用于食品菌落总数：水、土壤、空气、食品、药品、化妆品霉菌酵母菌总数：食品、药品、化妆品大肠菌群：水、食品、化妆品亚硫酸盐还原梭菌：土壤、水10.微生物检验优先：一个样品需做多种分析，应先取部分作微生物检验，其余留作他用。11.结果报告：细菌、霉菌和酵母菌总数：cfu/ml(g)，cfu/cm2(m3)cfu:菌落形成单位特定菌或致病菌：1ml或1g为单位报告“检出”或“未检出”。大肠菌群总数报告：大肠菌群数(3个/L或40个/100g)或（MPN/L=3或MPN/100g=40)MPN：最可能数PFU空斑形成单位（计量病毒或噬菌体）第四章消毒与灭菌D值杀灭微生物数量达90%所需的时间。*1、消毒disinfection灭菌sterilization抗菌antibacterial抑菌bacteriostasis*2、依据消毒时机分为（1）预防性消毒（2）疫源地消毒（分为随时、终末）预防性消毒（preventivedisinfection）：是指在未发现传染源情况下，对可能受到病原微生物污染的物品和场所进行的消毒。如公共场所、运输工具、餐具、饮用水等。疫源地消毒（disinfectionofepidemicfocus）：是指对存在或曾经存在传染源的场所进行的消毒。如传染病院或病家对患者分泌物、排泄物、污染物品和居室的消毒。第七章水中多G-菌，水下底泥中G+菌多，尤其是芽孢杆菌属*1.水生境总的特点是比较稳定，体积庞大、流动，能起缓冲、稀释和混合的作用。自然水体中广泛存在着微生物群，各种水环境的理化因素有很大差异，但均能为微生物生长提供条件。影响因素有：温度、静水压、光照、溶解氧、氢离子浓度6.5~8.5、化学物质、营养物质2.水中微生物特点：（1）水中细菌个体较小，多有鞭毛，能运动；（2）有纤毛能变形（3）许多水中细菌具有粘附在固体表面或碎屑上的特点。（4）水中细菌一般能耐受低浓度的营养物质。3.水体富营养化（Eutrophication）：过量的含磷、氮物质进入水体内，使水中藻类大量繁殖，由于藻类的生长和死亡促进了异养菌的繁殖，水体变色、变浊，有腥臭味，这一过程叫水体富营养化。水体富营养化的后果是导致了水体生态平衡的破坏。水体富营养化发生在湖泊称“水花”或“水华”，发生在海洋称“赤潮”。4.海水中微生物的特点：（1）海水中的细菌主要是革兰阴性杆菌，体积小。具有多形态性，比淡水中细菌少。（2）嗜低温性，在12~25℃之间生长最好。（3）嗜盐性，其特点是无盐不长，高盐不长。（4）能产生多种色素，许多海洋细菌能在有氧条件下发光。（5）深海细菌具有耐压或嗜压的特点（6）能生长在低营养浓度环境中，多为好氧菌或兼性厌氧菌*5.水中常见病原体及其危害：⑴细菌类病原体：①沙门菌属：水中生存力强。伤寒沙门菌--伤寒；甲、乙型副伤寒沙门菌----副伤寒②志贺菌属—细菌性痢疾，粪口途径传播③大肠埃希菌属（粪口）：EPEC肠致病性大肠埃希菌—流行性婴儿腹泻；夏秋季ETEC产毒性—儿童急性腹泻和旅行性腹泻；EIEC侵袭性—志贺菌样大肠埃希菌，类痢疾症状，婴幼儿和成人患病；EHEC出血性—暴发性出血性肠炎，O157：H7EAEC黏附性—小儿顽固性腹泻、旅行性腹泻④霍乱弧菌：古典生物型和埃尔托生物型⑤小肠结肠炎耶尔森菌：嗜冷性，流行于冬季。其污染与大肠杆菌之间无明显关系⑥嗜肺军团菌⑦钩端螺旋体（其余为粪便污染，钩端螺旋体为尿污染）⑵病毒类病原体：最常见1（下1为粪口途径）①肠道病毒属：包括脊髓灰质炎病毒、柯萨奇病毒、埃可病毒和新型肠道病毒②肝炎病毒：甲型和戊型（粪口途径）③急性胃肠炎病毒：轮状病毒、Norwalk病毒轮状病毒分A~G7组，A组为婴幼儿患病，B组为成人患病。脊髓灰质炎病毒的减毒株无致病力，操作方便，可作为水中病毒的指示物。6、影响水中病毒存活的因素：光照、温度、凝聚和吸附、PH值（5~9）、无机离子、生物因素（细菌、藻类、原虫、海洋生物）生物因素最重要除肠道病毒外，许多病毒在低Ph环境下不稳定，可依据此分离。二价阳离子对有包膜的RNA病毒有热稳定作用，对病毒的感染性起保护作用，重金属对病毒有杀灭作用。7、水中微生物的采样：（1）各种检验用品必须事先进行消毒灭菌，保持无菌状态。（2）采自来水时，应先用酒精灯火焰消毒水龙头，在放水5~10分钟后采样；地面水应选择有代表性的地点，据水面10~15cm深处采用；含有余氯水养应按每500ml水样中加入1.5%硫代硫酸钠2ml。（3）采样后应尽量在2小时内检验，4℃保存不应超过4小时。8、菌落总数是将1ml水样接种在营养琼脂培养基中，于37度经18~24h后所生长的细菌菌落总数，是水质被污染程度的主要标志。常用的计算方法：平板计数法。9、大肠菌群的检测方法：发酵法（三步发酵法）（1）初步发酵试验（2）分离培养（3）证实试验（复发酵）分离培养使用伊红美蓝培养基（EMB），平板划线。***10、生活饮用水卫生标准：2006年新规定每毫升水中菌落总数不得超过100CFU，每100ml水样中不得检出总大肠菌群、粪大肠菌群大肠埃希菌不得检出。瓶（桶）装饮用水卫生标准2003年：菌落总数《20CFU/ml，大肠菌群《3MPN/100ml，致病菌（指肠道致病菌和致病性球菌）不得检出，霉菌、酵母菌不得检出。第八章土壤微生物1、土壤微生物种群：细菌（异养菌