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自强创新立志报国-1-专题2课题2土壤中分解尿素的细菌的分离与计数青城山高级中学一、选择题1．PCR技术要求使用耐高温的DNA聚合酶，这种酶要能忍受93℃左右的高温。如果请你来寻找这种耐高温的酶，你会去哪里寻找………()A．土壤中B．海水中C．热泉中D．冷库中2．下列能选择出分解尿素的细菌的培养基是………………()A．KH2PO4、Na2HP04、MgS04·7H20、葡萄糖、尿素、琼脂、水B．KH2PO4、Na2HP04、MgS04·7H20、葡萄糖、琼脂、水C．KH2PO4、Na2HP04、MgS04·7H20、尿素、琼脂、水D．KH2PO4、Na2HP04、MgS04·7H20、牛肉膏、蛋白胨、琼脂、水；3.某同学在稀释倍数为106的培养基中测得平板上菌落数的平均值为234，那么每克样品中的菌落数是(涂布平板时所用稀释液的体积为0.1mL)…()A．2.34×108B．2.34×109C．234D．23.44.在做分离分解尿素的细菌实验时，A同学从对应106培养基上筛选出大约150个菌落，而其他同学只选择出大约50个菌落。A同学的结果产生原因()①由于土样不同②由于培养基污染③由于操作失误④没有设置对照A．①②③B．②③④C．①③④D．①②④5.关于土壤取样的叙述错误的是………()A．土壤取样，应选取肥沃、湿润的土壤B．先铲去表层土3cm左右，再取样C．取样用的小铁铲和信封在使用前不用灭菌D．应在火焰旁称取土壤6.下列关于从土壤中分离细菌的操作步骤中，正确的是…………()①土壤取样②称取10g土壤取出加入盛有90mL无菌水的锥形瓶中③吸取0.1mL进行平板涂布④依次稀释至101、102、103、104、105、106、107稀释度A．①→②→③→④B．①→③→②→④C．①→②→④→③D．①→④→②→③7.下列关于测定土壤中细菌数量的叙述，正确的是………()A．一般选用103～107倍的稀液分别涂布B．测定放线菌的数量，一般选用103、lO4和105倍稀释C．测定真菌的数量，一般选用103、104和105倍稀释D．当第一次测量某种细菌的数量，可以将101～107倍的稀释液分别涂布到平板上培养8.下列关于微生物的培养叙述错误的是()A．细菌一般在30～37℃的温度下培养1～2dB．放线菌一般在25～28℃的温度下培养5～7dC．霉菌一般在25～28℃的温度下培养3～4dD．不同种类的微生物，一般需要相同的培养温度和培养时间9.下列操作需要在火焰旁进行的一组是()①土壤取样②称取土壤③稀释土壤溶液④涂布平板⑤微生物的培养A．①②③④⑤B．②③④⑤④⑤C．③④⑤D．②③④10.下列可以鉴定出分解尿素的细菌的方法是…………()A．以尿素为唯一氮源的培养基中加人酚红指示剂B．以尿素为唯一氮源的培养基中加入二苯胺试剂C．以尿素为唯一氮源的培养基中加入苏丹Ⅲ试剂D．以尿素为唯一氮源的培养基中加入双缩脲试剂自强创新立志报国-2-11.土壤取样时最好选择哪种环境中的土壤做分离细菌的实验……()A．街道旁B．花盆中C．公园里D．菜园里12．可用于菌落数目统计的培养基是（）A固体培养基B液体培养基C半固体培养基D天然培养基13．产生标准菌落的细菌的最初数目和培养基分别是（）A一个细菌液体培养基B许多细菌液体培养基C一个细菌固体培养基D许多细菌固体培养基14．要从多种细菌中分离某种细菌，培养基要用（）A加入青霉素的培养基B固体培养基C液体培养基D加入高浓度食盐的培养基15．下表资料表明在各种培养基中细菌的生长，SCM为简单培养，U、V、X、Y、Z代表加入培养基的不同物质，问哪一种物质细菌不能合成（）培养基生长状态SCM-SCM+V+Z-SCM+U+Y+SCM+Z+X-SCM+V+Y+SCM+U+X-SCM+Y+Z+A.UB.VC.YD.Z16.培养基中浓度过高抑制微生物生长的原因是（）A含热量太多B会使微生物失水C导致微生物休眠D培养基中的碳源和氮源比例失衡17．不同种类的细菌菌落表现为不同的特征，下列属于菌落特征的是（）（1）菌落大小（2）菌落形状（3）菌落的隆起程度（4）菌落的颜色（5）菌落的透明度A（1）（2）（3）B（2）（3）（4）C（1）（3）（4）D（1）（2）（3）（4）（5）18．某同学在１０、100、1000倍稀释液的平均菌落数为2760、295、46,则菌落总数为()A27600B29500C46000D3775019.下列氮肥能被植物直接吸收的是()(1)硝酸盐(2)尿素(3)磷酸二氢氨(4)氨A(1)(2)(3)(4)B(1)(3)(4)C(2)(3)(4)D(1)(3)20．将某种细菌接种到彻底灭菌的固体培养基上，经过一段时间后能得到（）A无一定形态的群体B菌丝C单个细菌D菌落21．在微生物学中，将允许特定种类的微生物生长，同时又能抑制或者阻止其他种类微生物生长的培养基称做()A．鉴别培养基B．加富培养基自强创新立志报国-3-C．选择培养基D．基础培养基22．用稀释涂布平板法来统计样品中的活菌数时，通过统计平板上的菌落数就能推测出样品中的活菌数。原因是()A．平板上的一个菌落就是一个细菌B．菌落中的细菌数是固定的C．此时的一个菌落一般来源于样品稀释液中的一个活菌D．此方法统计的菌落数一定与活菌的实际数相同23．本课题以土壤中的细菌为研究对象，要达到的目的是()。①从土壤中分离出能够分解尿素的细菌②从土壤中分离出能够分解氨的细菌③统计每克土壤样品中究竟含有多少分解尿素的细菌④统计所取土壤样品中究竟含有多少分解尿素的细菌A．①③B．②④C．①②D．③④24．下列关于微生物分离和培养的有关叙述，不正确．．．的是（）A．分离土壤中不同的微生物，要采用不同的稀释度B．测定土壤样品中的活菌数目，常用显微镜直接计数法C．提纯和分离严格厌氧型微生物，一般不用稀释涂布平板法D．分离能分解尿素的细菌，要以尿素作为培养基中唯一氮源25．用稀释涂布平板法测定同一土壤样品中的细菌数，在对应稀释倍数为106的培养基中，得到以下几种统计结果，正确的是()。A．涂布了一个平板，统计的菌落数是230B．涂布了两个平板，统计的菌落数是215和260，取平均值238C．涂布了三个平板，统计的菌落数分别是21、212和256，取平均值163D．涂布了三个平板，统计的菌落数分别是210、240和250，取平均值233二、非选择题26.统计菌落数目一般用稀释涂布平板法，当样品的稀释度足够高时，培养基表面生长的一个，来源于样品稀释液中的一个。计数时一般选择菌落数在______________的平板计数。27.在做本课题实验时，一位同学在稀释倍数为106的培养基中涂布了3个平板，统计的菌落数分别为21、212和256，该同学以这3个平板上菌落数的平均值163作为统计结果。你认为这一结果是否接近真实值?如果需要改进，如何改进?28.在进行操作本课题实验时应特别注意：、、。29．在做本课题实验时，甲同学筛选出的菌落与其他同学不同，并且他在设计实验时并没有设置对照。思考下列问题：(1)你认为出现甲同学这种结果的原因可能是什么?(2)要帮助甲同学排除可能影响实验结果的因素，需要设置，实验方案有两种：一种方案是可以由其他同学用与甲同学进行实验，如果结果与甲同学一致，则证明甲同学，如果结果不同，则证明甲同学存在操作或的配制有问题。另一种方案是将甲同学配制的培养基在不加的情况下进行培养，作为空白对照，以证明培养基是否受到。(3)由此问题你得出的启示是什么?30．(10分)微生物与人类关系密切，虽然有些微生物能使动植物患病，但多数微生物对人类是自强创新立志报国-4-有益的，请回答下列有关问题。(1)下表为两种微生物的培养基配方。A培养基KH2PO4Na2HPO4MgSO4·7H2O葡萄糖尿素琼脂1.4g2.1g0.2g10.0g1.0g15.0gB培养基纤维素粉NaNO3Na2HPO4·7H2OKH2PO4MgSO4·7H2OKCl酵母膏水解酪素5g1g1.2g0.9g0.5g0.5g0.5g0.5g上述两种培养基中的物质溶解后，均用蒸馏水定容到1000mL。①如果要进行土壤中分解尿素的细菌的分离，则需要选择上述哪种培养基？______，该培养基能分离尿素分解菌的原因是_____________________。②在该培养基中可加入______指示剂，根据指示剂的颜色可鉴定该种细菌能够分解尿素。③从功能上来看，上述两种培养基均属于______培养基。(2)把牛肉膏蛋白胨固体培养基倒入平板，等培养基冷凝后，应将平板_______放置，这样做的目的是可防止___________________________________________造成污染。(3)微生物接种的方法很多，平板划线法操作结束时，为什么仍需要灼烧接种环？_____________________________________________________________。(4)微生物培养过程中还有什么方法或步骤要防止其他微生物污染？31.（8分）【生物—生物技术实践】下表为某微生物培养基的配方，请回答相关问题：成分含量成分含量Na2HPO43g尿素1.0gK2HPO41gC6H12O630gMgSO4·7H2O0.5g琼脂15gFeSO40.01gH2O1000mlNH4NO30.3g（1）该培养基按物理性质分属于__________培养基，无论配制何种培养基，在原料称量、溶解之后要__________，然后分装、包扎并灭菌，常用的灭菌方法是______________。（2）根据培养基的成分判断，该培养基能否用于分离土壤中分解尿素的细菌？______________，原因是________________________________。（3）为检测尿素分解菌是否存在，还应加入___________，如果存在，将出现______反应。（4）微生物常用的接种方法有________________________________。自强创新立志报国-5-一、1．C2．A3．B4．A5．C6．C7．B8．D9．D10．A11．D12.A13.C14.B15.C16.B17.D18.D选D。本题考查菌落计数法测定微生物的数目的方法。注意是计算不同稀释度的平均菌落数。首先选择平均菌落数在30～300之间的，当只有一个稀释倍数的平均菌落数符合此范围时，则以该平均菌落数除以涂布平板时所用稀释液体积(0.1mL)，再乘以稀释倍数作为该样品的细菌总数；若有两个稀释倍数的平均菌落数均在30～300之间，则按两者菌落总数之比值来决定，若比值小于2应采取两者的平均数，若大于2，则取其中较小的菌落总数。本题295、46在30～300之间，46×103与295×102比值为1.6，应取二者的平均数进行计算。19.B20.D21.C22.C23.A24.B25.D二、26．菌落活菌30～30027．不接近真实值，需要重新实验。28．无菌操作做好标记制定计划29．(1)可能的原因有：一是由于土样不同，二是由于培养基污染或操作失误,三培养基中混入其它氮源。(2)对照实验一样的土样，无误，失误培养基土样污染。(3)启示：做实验时一定要设置对照。30.①A培养基培养基中尿素为唯一氮源，只有能分解尿素的微生物才能生长繁殖②酚红③选择(2)倒过来皿盖上的水珠落入培养基(3)杀死接种环上残留菌种，避免污染环境和感染操作者(4)培养基灭菌，接种环灭菌，接种过程无菌操作。31.(1)固体调pH高压蒸汽灭菌（2）不能培养基中含有NH4NO3，尿素不是唯一氮源（3）酚红红色（4）平板划线法或稀释涂布平板法