厌氧生物处理第二章

第二章厌氧生物处理的微生物学与生物化学原理废水与污泥的厌氧生物处理第一节简介1776年，Valta发现沼泽中可产生可燃气体，并提出这种气体的产生与有机质的分解有关。1806年，Herry发现这种可燃气体为甲烷。1868年，Bechamp首次从微生物学角度阐述了甲烷的形成机理。1875年，Popoff较系统研究了由各种底物发酵产甲烷的过程。1906年，Sohngen培养出八叠球菌和杆状细菌的共生物。Schnellen在此基础上，分离出甲烷八叠球菌属(Methanosarcinabarkeri)和甲烷杆菌属(Methanobacteriumformicicum)的纯种并命名。实现了微生物学在厌氧发酵原理上的又一突破。第一节简介1967年，Bryant发现乙醇转化为甲烷的过程并非如人们认为的由一种微生物完成，而是由两个共生菌一起完成的。其中一种微生物把乙醇转化为乙酸和氢气，而另一种微生物利用氢气把二氧化碳转化为甲烷。这个发现揭示：能够被产甲烷微生物所利用的底物种类是有限的，这些底物主要是乙酸、氢气、碳酸氢盐、甲醛和甲醇。第一节简介近年来，人们证实产甲烷微生物在亲缘关系上既不属于真核生物，也不属于原核生物，人们把它们划归于古细菌。对于废水厌氧处理来说，最令人感兴趣的是产甲烷细菌具有从底物转化为甲烷的过程中获取能量的能力。就这一点来说，它们也是非常独特的。也有一些其它细菌可以产生甲烷，但它们不能由甲烷产生过程中获取能量。第一节简介厌氧消化（AnaerobicDigestion）过程存在于某些自然生态系统中，例如：沼泽、湖泊和海洋的沉积物、瘤胃动物的胃液等。在非自然的生态系统中，人们利用这种厌氧消化过程，防止大量有机物在环境中的有害积累，同时，回收厌氧消化过程中产生的甲烷作为能源再利用。例如：废水厌氧处理系统、堆肥和污泥消化系统等，第二节有机物厌氧消化机理在无氧条件下，污水中所含的碳水化合物、脂肪、蛋白质等复杂有机物在厌氧分解的后期都转化成短链脂肪酸等物质。此时，如果条件合适，另一类细菌将开始繁殖活动，继续厌氧氧化，最终形成甲烷。有机物厌氧消化是一个极其复杂的过程，多年来，厌氧消化被概括为两阶段过程，即酸性发酵阶段和碱性发酵阶段。两阶段厌氧消化过程示意图细菌细胞其它产物CH4+CO2细菌细胞挥发性脂肪酸H2+CO2不溶性有机物溶解性有机物细胞外酶产酸细菌产甲烷细菌酸性发酵阶段：在不同的厌氧微生物种群作用下，将蛋白质、脂肪、碳水化合物水解并厌氧分解成脂肪酸及其它产物，并合成新细胞。碱性发酵阶段：在具有生理独特性的专性厌氧菌——产甲烷菌的作用下，将第一阶段的最终代谢产物转化成甲烷和二氧化碳。第二节有机物厌氧消化机理事实上，第一阶段的最终产物不仅仅是酸，发酵所产生的气也并不都是从第二阶段产生的。随着对厌氧消化微生物研究的不断深入，厌氧消化过程中不产甲烷细菌和产甲烷细菌之间的相互关系更加明确。1979年，伯力特（Bryant）等人根据厌氧微生物不同的生理类别和作用，提出了厌氧消化三阶段理论，成为目前较为公认的理论模式。三阶段厌氧消化过程示意图H2+CO2乙酸H2S+CO2CH4+CO2复杂有机物脂肪酸(C2)产氢产乙酸产甲烷水解、发酵产甲烷硫酸盐还原硫酸盐还原第一阶段：在水解与发酵细菌作用下，使碳水化合物、蛋白质及脂肪经水解与发酵转化为单糖、氨基酸、脂肪酸、甘油、二氧化碳和氢等。硫酸盐还原三阶段厌氧消化过程示意图H2+CO2乙酸H2S+CO2CH4+CO2复杂有机物脂肪酸(C2)产氢产乙酸产甲烷水解、发酵产甲烷硫酸盐还原硫酸盐还原第二阶段：在产氢产乙酸菌的作用下，把第一阶段产物转化为氢、二氧化碳和乙酸。硫酸盐还原三阶段厌氧消化过程示意图H2+CO2乙酸H2S+CO2CH4+CO2复杂有机物脂肪酸(C2)产氢产乙酸产甲烷水解、发酵产甲烷硫酸盐还原硫酸盐还原第三阶段：通过两组生理机能不同的产甲烷细菌的作用，将上阶段产物转化为甲烷。一组（乙酸歧化菌）将乙酸脱羧产生甲烷，即：2CH3COOH2CH4+2CO2另一组（嗜氢甲烷菌）将氢和二氧化碳转化成甲烷，即：4H2+CO2CH4+2H2O硫酸盐还原三阶段厌氧消化过程示意图H2+CO2乙酸H2S+CO2CH4+CO2复杂有机物脂肪酸(C2)产氢产乙酸产甲烷水解、发酵产甲烷硫酸盐还原硫酸盐还原硫酸盐还原在以上阶段里，还包含以下过程：a.水解阶段有蛋白质水解、碳水化合物水解和脂类水解过程。b.发酵酸化阶段包含氨基酸、糖类、较高级脂肪酸与醇类的厌氧氧化过程。c.产乙酸阶段包含从中间产物形成乙酸、氢气和由氢气、二氧化碳形成乙酸过程。d.甲烷化阶段包含由乙酸形成甲烷和从氢气和二氧化碳形成甲烷过程。除以上这些过程以外，当废水含有硫酸盐时，还会有硫酸盐还原过程。第二节有机物厌氧消化机理此外，W.W.Eckenfelder等学者，把有机物厌氧发酵生产沼气的过程（例如，城市污水处理厂的污泥消化过程）分成四个阶段。从生产实践的经验来看，对于一些悬浮物含量较高的复杂有机废水或污泥，“四阶段”的划分似乎更确切些。对于指导生产控制更有效，更容易理解。四阶段厌氧消化过程示意图氨氮、碳酸盐其它产物CH4+CO2乙酸、H2不溶性有机物溶解性有机物水解阶段酸化阶段甲烷化阶段低分子脂肪酸酸性衰退阶段一、水解阶段：在水解细菌胞外酶的作用下，将非溶解性的聚合物转化为简单的溶解性单体或二聚体。水解过程通常较缓慢，有机质颗粒越大，浓度越高，水解过程需时越长。乙酸、H2+CO2四阶段厌氧消化过程示意图氨氮、碳酸盐其它产物CH4+CO2乙酸、H2不溶性有机物溶解性有机物水解阶段酸化阶段甲烷化阶段低分子脂肪酸酸性衰退阶段二、酸化阶段：在产酸细菌的作用下，将碳水化合物分解为低分子量的脂肪酸（主要是乙酸、丁酸和丙酸）。产酸过程进行的很快，料液中脂肪酸大量积累，pH值迅速下降，料液具有腐烂的气味。乙酸、H2+CO2四阶段厌氧消化过程示意图氨氮、碳酸盐其它产物CH4+CO2乙酸、H2+CO2不溶性有机物溶解性有机物水解阶段酸化阶段甲烷化阶段低分子脂肪酸酸性衰退阶段三、酸性衰退阶段：在此阶段，酸化阶段产物进一步转化为氢、二氧化碳和乙酸等。同时，由于产氨细菌的活动，料液中氨氮浓度增高，氧化还原电位降低，pH上升，为产甲烷菌的活动创造了适宜条件。此阶段的副产物还有硫化氢、粪臭素等。四阶段厌氧消化过程示意图氨氮、碳酸盐其它产物CH4+CO2乙酸、H2不溶性有机物溶解性有机物水解阶段酸化阶段甲烷化阶段低分子脂肪酸酸性衰退阶段乙酸、H2+CO2四、甲烷化阶段：通过两组生理机能不同的产甲烷细菌的作用，将上阶段产物转化为甲烷。一组（乙酸歧化菌）将乙酸脱羧产生甲烷，即：2CH3COOH2CH4+2CO2另一组（嗜氢甲烷菌）将氢和二氧化碳转化成甲烷，即：4H2+CO2CH4+2H2O第三节厌氧消化的微生物学基础厌氧消化是一个非常复杂的生物学过程，厌氧微生物是指能够在无氧条件下分解有机物的微生物，是一个统称。在一个厌氧消化设备内，有各种微生物存在，形成一个与环境条件、营养条件相对应的微生物群体。这些微生物通过其生命活动完成有机物厌氧代谢的复杂过程。根据功能，厌氧微生物可分为不产甲烷微生物（或称厌氧有机物分解菌，发酵细菌）和产甲烷微生物两大类。第三节厌氧消化的微生物学基础不产甲烷微生物：不产甲烷微生物系指将复杂有机物转化为简单的小分子化合物的一系列微生物，也就是产甲烷阶段以前所有降解有机物或产酸的微生物。这些微生物包括厌氧菌和兼性厌氧菌，还发现有少量好氧菌。不产甲烷阶段的微生物包括细菌、真菌和原生动物三大类。不产甲烷阶段细菌的种类很多，数量很大，但具水解活性的细菌只占微生物群落的很小部分。其中专性厌氧菌数量最多，比兼性厌氧菌和好氧菌多100～200倍。第三节厌氧消化的微生物学基础不产甲烷细菌：发酵细菌产氢菌同型乙酸菌硫酸盐还原菌其它特殊细菌1.纤维素分解菌：将纤维素分解成小分子化合物。纤维素分解是厌氧消化的第一步，也是重要的一步。2.半纤维素分解菌：分解原料中的半纤维素，生成木糖、阿拉伯糖、甘露醇和半乳糖。3.淀粉分解菌：将淀粉水解为葡萄糖等。或将淀粉分解成丙酮、丁醇、丁酸、乙酸和氢。4.蛋白质分解菌：将蛋白质分解成氨基酸，然后进一步分解成有机酸、硫醇、氨和硫化氢。5.脂肪分解菌：将脂肪分解成脂肪酸，然后进一步分解成甲烷和二氧化碳。第三节厌氧消化的微生物学基础不产甲烷细菌：发酵细菌产氢菌同型乙酸菌硫酸盐还原菌其它特殊细菌产氢菌，或称为产氢产乙酸菌，是不产甲烷微生物中一群极为重要的菌种。产酸细菌分解或利用有机酸而生成乙酸和氢，为产甲烷细菌提供基质。第三节厌氧消化的微生物学基础不产甲烷细菌：发酵细菌产氢菌同型乙酸菌硫酸盐还原菌其它特殊细菌同型乙酸菌可将一碳化合物（如H2/CO2或甲酸等）或多碳化合物代谢为乙酸。因此，它们在厌氧消化过程中的存在，加大了乙酸做为形成甲烷的直接前体的意义。由于代谢过程不产生氢，可使系统维持较低的氢分压。第三节厌氧消化的微生物学基础不产甲烷细菌：发酵细菌产氢菌同型乙酸菌硫酸盐还原菌其它特殊细菌硫酸盐还原菌能够把脂肪酸、乙醇和硫酸盐（亚硫酸盐）转化为乙酸和硫化氢，从而提供甲烷菌所需的还原性条件、硫化氢和一部分乙酸。硫化氢可为甲烷菌提供生物合成所需的碳源，并可维持介质的还原性质，使氧化还原电位维持在－300mV以下。但是，当污水中含硫酸盐较多时，硫酸盐还原菌可能对甲烷菌产生抑制作用并与甲烷菌争夺底物。因此，对硫酸盐还原菌的控制是采用厌氧处理含硫酸盐污水时要认真对待的问题。第三节厌氧消化的微生物学基础不产甲烷细菌：发酵细菌产氢菌同型乙酸菌硫酸盐还原菌其它特殊细菌乳酸菌：可利用乳酸生成乙酸和丙酸，某些菌还能产生较高级的酸，也能发酵其它底物。厌氧光合成细菌：已经成功分离并试图应用于污水处理。厌氧消化过程各大类细菌的位置H2+CO2乙酸H2S+CO2CH4+CO2有机物脂肪酸、有机酸、醇产氢产乙酸菌产甲烷菌发酵细菌产甲烷菌硫酸盐还原菌硫酸盐还原菌硫酸盐还原菌同型乙酸菌第三节厌氧消化的微生物学基础产甲烷细菌：甲烷菌的形态甲烷菌的分类甲烷菌的培养甲烷菌的繁殖甲烷菌的能量代谢各种甲烷菌在形态上是不同的，常见的有以下四种：1.甲烷杆菌：杆状细胞通常弯曲，连成链或长丝状。2.甲烷球菌：球形细胞从正圆形到椭圆形，排列成对或成链。3.八叠球菌：繁殖成有规则的、大小一致的细胞，这些细胞堆积在一起。4.甲烷螺旋菌：细胞呈有规则的弯曲杆状，最后形成螺旋丝状。第三节厌氧消化的微生物学基础产甲烷细菌：甲烷菌的形态甲烷菌的分类甲烷菌的培养甲烷菌的繁殖甲烷菌的能量代谢各种甲烷菌在形态上差别很大，但在生理学上却十分相似，都是严格的厌氧菌，主要代谢产物都是甲烷。到目前为止，已报道并得到公认的甲烷菌有14种19个菌株，分属三目四科七属。甲烷菌的主要特性：1.最适宜温度：温度对于各种菌产甲烷活性有显著的影响，大部分甲烷菌为中温菌，最适宜温度35－40℃。2.最适宜pH：介质pH对各种菌产甲烷活性的影响也很显著，每种甲烷菌都有一个最佳pH值，一般都在6.3－9.0的范围内。第三节厌氧消化的微生物学基础产甲烷细菌：甲烷菌的形态甲烷菌的分类甲烷菌的培养甲烷菌的繁殖甲烷菌的能量代谢所有甲烷菌都是从形成甲烷的过程中获得生长所需的能量而合成新细胞。甲烷菌的营养条件比较简单，大多数都能在以二氧化碳、氨、硫化物作为主要碳、氮和硫来源的培养基上生长。1.碳营养源：各种甲烷菌利用不同的底物作为碳源，除乙酸、氢和二氧化碳外，八叠球菌还能利用甲醇、乙胺和乙酸盐等作为底物。2.氮营养源：氨氮是所有产甲烷菌的主要氮源。在培养基中加氨基酸，可缩短世代时间，增加细胞产量。3.硫营养源：硫化物是甲烷菌所需硫的主要来源，但有少数菌种能利用半胱氨酸作为硫源。第三节厌氧消化的微生物学基础产甲烷细菌：甲烷菌的形态甲烷菌的分类甲烷菌的培养甲烷菌的繁殖甲烷菌的能量代谢一般甲烷菌繁殖倍增时间都比较长，长者