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1小鼠体内培养体外培养2.2.3动物细胞融合与单克隆抗体学习目标：举例说出动物细胞融合与单克隆抗体学习重难点：动物细胞融合技术与单克隆抗体的制备一、自主学习1、动物细胞融合（1）概念：指在一定条件下将或动物细胞结合形成一个细胞的过程。（2）过程：不同类型的动物细胞细胞。（3）原理：（4）诱导动物细胞融合的方法有三种：生物方法（）、化学方法（）、物理方法（）。比较动物细胞融合与植物体细胞杂交的异同比较项目细胞融合的原理细胞融合的操作诱导融合的方法用途植物体细胞杂交细胞膜的流动性用纤维素酶、果胶酶去除细胞壁后诱导原生质体融合离心、电刺激、振动、聚乙二醇（PEG）诱导克服远源杂交不亲和，获得杂种植株动物细胞融合细胞膜的流动性用胰蛋白酶使细胞分散后诱导细胞融合除应用植物细胞杂交手段外，还可用灭活病毒诱导制备单克隆抗体思考：动物细胞融合完成的标志是什么？动物细胞的融合最有价值的应用是什么?2、单克隆抗体1、抗体⑴产生细胞：_________________。⑵成分：__________。⑶传统方法制备的抗体特点：产量低、纯度低、特异性差。2、单克隆抗体的制备(1)过程⑵融合形成的杂交细胞（杂交瘤细胞）的特点：_______________、____________________。⑶单克隆抗体的优点：__________、_________、____________、、。思考：1、制备单克隆抗体时，为什么要选用B淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合形成的杂交瘤细胞？在融合的过程中你可以找出几种类型的细胞？克隆产生特定抗体的杂交细胞灭活的病毒灭活的病毒给小鼠注射特定的抗原蛋白培养骨髓瘤细胞→从________中分离B淋巴细胞→骨髓瘤细胞__________检验2思考：2、制备单克隆抗体的过程有两次筛选，两次筛选的目的是什么？3、单克隆抗体的应用（1）单克隆抗体研究中最活跃的领域之一是开发治疗（2）单克隆抗体还可以用于治疗由于，如类风湿关节炎、系统性红斑狼疮等。（3）根据免疫移植的治疗原则，制备的针对免疫细胞或分子的单克隆抗体具有，较小。例：科学家用小鼠骨髓瘤细胞与某种细胞融合，得到杂交细胞，经培养可产生大量的单克隆抗体，与骨髓瘤细胞融合的是（）A.经过免疫的B淋巴细胞B.不经过免疫的T淋巴细胞C.经过免疫的T淋巴细胞D.不经过免疫的B淋巴细胞巩固练习1、基因型为Aa与基因型为Bb的动物体细胞混合，用灭活的仙台病毒处理后，不可能获得下列哪种基因型的细胞()A．AAaaB．AaBbC．AabbD．BBbb2、动物细胞融合和植物体细胞杂交的比较中，正确的是()①诱导融合的方法完全相同②所用的技术手段不相同③所采用的原理完全相同④都能形成杂种细胞A.①②B.①③C.②④D.③④3、单克隆抗体是指（）A．单个骨髓瘤细胞增殖产生的抗体B．单个淋巴细胞增殖产生的抗体C．单个杂交瘤细胞增殖产生的高度单一的抗体D．单个抗体通过克隆，产生大量抗体4、用动物细胞工程技术获取单克隆抗体，下列实验步骤中错误的是（）A．将抗原注入小鼠体内，获得能产生抗体的B淋巴细胞B．用纤维素酶处理B淋巴细胞与小鼠骨髓瘤细胞C．用聚乙二醇作诱导剂，促使能产生抗体的B淋巴细胞与小鼠骨髓瘤细胞融合D．筛选杂交瘤细胞，并从中选出能产生所需抗体的细胞群，培养后提取单克隆抗体5、下图是单克隆抗体制备过程示意图，其中1过程注射的物质和A细胞的名称为()A、抗体、T淋巴细胞B、抗原、T淋巴细胞C、抗体、B淋巴细胞D、抗原、效应B淋巴细胞6、（多选）下列关于单克隆抗体的制备和应用的叙述中，正确的是()A．B淋巴细胞与骨髓瘤细胞的融合，一般不需要灭活的仙台病毒或聚乙二醇诱导B．融合后形成的杂交瘤细胞既能大量增殖，又能产生单克隆抗体C．体外培养时，一个效应B淋巴细胞可以产生抗体，但不能无限增殖3D．单克隆抗体与常规抗体相比，特异性强，灵敏度高，优越性明显7、右图是某种淋巴细胞，膜外颗粒状物质为抗体。据图回答：（1）这是细胞，它是由分化而来的。（2）抗体从开始合成到分泌出细胞，经过的细胞结构顺序是（填标号）。抗体的分泌说明细胞的各种生物膜在结构上具有，并以〔〕的形式转变。（3）在分泌抗体时要消耗由〔〕提供的能量。（4）抗体的化学本质是，它能与发生特异性结合，发挥免疫效应，该过程属于免疫。（5）若该抗体是单克隆抗体，则该细胞名称为。在制备单克隆抗体的过程中，要应用的动物细胞工程的技术手段是。8、右图为细胞融合的简略过程，请据图回答：（1）若A、B是植物细胞，在细胞融合之前已用__________________________处理，除去了____________；由A、B到细胞C的过程中，常用的物理方法是_____________________________。融合完成的标志是_______________。（2）若A、B是植物细胞，则形成的D细胞还要应用______________________________技术把D培养成植株。（3）若A、B是动物细胞，一般取自________________________________，然后用使其分散开来；由A、B到C的过程中，常用的不同于植物细胞融合的手段是，所形成的D称为，A、B融合为C的过程说明了细胞膜具有。（4）若该过程是制备单克隆抗体，A为小鼠效应B细胞，那么，在获得此细胞之前，小鼠已经被注射了。注射后小鼠身体发生了相应的免疫反应，生成了__________________________________________，图中B为。（5）若该过程仍是制备单克隆抗体，在A、B到C的过程中，所形成的C有_____种，用来培养的D细胞应该是_________________。从中选择出它的方法是_________________培养，获得D后，常用的培养方法是培养液中培养和________________________________。（6）若A为人细胞，B为鼠细胞，并分别用红、绿荧光染料标记细胞膜上的蛋白质，在C细胞时，细胞一半发红色荧光，一半发绿色荧光。到D细胞阶段，两种颜色的荧光均匀分布，请解释原因。______________________________________。4巩固练习1-5CCCBD6、BCD7、效应B细胞B淋巴细胞或记忆细胞④⑤③②①一定的连续性2囊泡6线粒体球蛋白抗原体液杂交瘤细胞动物细胞融合8、⑴纤维素酶和果胶酶细胞壁电激、离心、振动产生新的细胞壁⑵植物组织培养⑶动物胚胎或出生不久的幼龄动物的组织或器官胰蛋白酶灭活的病毒杂交细胞一定的流动性⑷抗原效应B细胞、记忆细胞、抗体骨髓瘤细胞⑸3杂交瘤细胞用特定选择培养基小鼠腹腔内增殖（6）细胞膜上的蛋白质是可以移动的。