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11、我国药物的三大药源指的是化学药物、生物药物、中草药。2、现代生物药物已形成四大类型，包括基因工程药物、基因药物、天然生物药物、医学生物制品。1、生化活性物质浓缩可采用的方法有盐析浓缩、有机溶剂沉淀浓缩、用葡聚糖凝胶浓缩、用聚乙二醇透析浓缩、超滤浓缩、真空减压浓缩与薄膜浓缩。2、生化活性物质常用的干燥方法有减压干燥、喷雾干燥、冷冻干燥等。3、冷冻干燥是在低温、低压条件下，利用水的升华性能而进行的一种干燥方法。4、固定化酶常采用的方法可分为吸附法、包埋法、交联法和共价键结合法四大类。5、由于目的蛋白质和杂蛋白分子量差别较大，拟根据分子量大小分离纯化并获得目的蛋白质，可采用（C）A、SDS凝胶电泳B、盐析法C、凝胶过滤D、吸附层析6、分离纯化早期，由于提取液中成分复杂，目的物浓度稀，因而易采用（A）A、分离量大分辨率低的方法B、分离量小分辨率低的方法C、分离量小分辨率高的方法D、各种方法都试验一下，根据试验结果确定1.固相析出法主要包括盐析法，有机溶剂沉淀法，等电点沉淀法，结晶法及其它多种沉淀方法等。2.按照一般的习惯，析出物为晶体时称为结晶法，析出物为无定形固体则称为沉淀法。3结晶包括三个过程：(1)形成飽和溶液；(2)晶核形成；(3)晶体生长。4.、晶体的质量主要是指晶体的大小、形状和纯度等3个方面。1、在一定的pH和温度下改变离子强度（盐浓度）进行盐析，称作(A)A．KS盐析法B．β盐析法C．重复盐析法D．分部盐析法2、盐析法与有机溶剂沉淀法比较，其优点是（B）A.分辨率高B.变性作用小C.杂质易除D.沉淀易分离3、将配基与可溶性的载体偶联后形成载体-配基复合物，该复合物可选择性地与蛋白质结合，在一定条件下沉淀出来，此方法称为（A）A．亲和沉淀B．聚合物沉淀C．金属离子沉淀D．盐析沉淀4、影响晶体大小的主要因素与下列哪些因素无关(D)A．过饱和度B．温度C．搅拌速度D．饱和度1、吸附剂按其化学结构可分为两大类：一类是有机吸附剂，如活性炭、淀粉、大孔吸附树脂等；另一类是无机吸附剂，如白陶土、氧化铝、硅胶、硅藻土等。2、常用的吸附剂有活性炭、硅胶和白陶土等。3、大孔网状聚合物吸附剂按骨架的极性强弱，可分为非极性、中等极性、极性和强极性吸附剂四类。1、用大网格高聚物吸附剂吸附的弱酸性物质，一般用下列哪种溶液洗脱（D）A.水B.高盐C.低pHD.高pH2、“类似物容易吸附类似物”的原则,一般极性吸附剂适宜于从何种溶剂中吸附极性物质（B）A.极性溶剂B.非极性溶剂C.水D.溶剂3、活性炭在下列哪种溶剂中吸附能力最强？（A）A.水B.甲醇C.乙醇D.三氯甲烷4、关于大孔树脂洗脱条件的说法，错误的是：（A）A.最常用的是以高级醇、酮或其水溶液解吸。B.对弱酸性物质可用碱来解吸。C.对弱碱性物质可用酸来解吸。D.如吸附系在高浓度盐类溶液中进行时，则常常仅用水洗就能解吸下来。1、葡聚糖凝胶的孔径大小取决于交联度，其越小，凝胶孔径越大；而琼脂糖凝胶的孔径却依赖于琼脂糖浓度。22、琼脂糖凝胶的一个特征是分离的分子量范围非常大，其分离范围随着凝胶浓度上升而下降，颗粒强度随浓度上升而提高。1、凝胶层析中，有时溶质的Kd1，其原因是（B）A.凝胶排斥B.凝胶吸附C.柱床过长D.流速过低2、凝胶层析中，有时小分子溶质的Kd1，其原因是（A）A.水合作用B.凝胶吸附C.柱床过长D.流速过低3、在凝胶层析中样品各组分最先淋出的是（A）A.分子量最大的B.体积最大的C.分子量最小的D.体积最小的4、为了进一步检查凝胶柱的质量，通常用一种大分子的有色物质溶液过柱，常见的检查物质为蓝色葡聚糖，下面不属于它的作用的是（C）A.观察柱床有无沟B.观察色带是否平整C.测量流速D.测量层析柱的外水体积1、离子交换剂由载体、功能基团和平衡离子组成。平衡离子带正电荷为阳离子交换树脂，平衡离子带负电荷称阴离子交换树脂。2、写出下列离子交换剂类型：732强酸001x7树脂（强酸性苯乙烯系阳离子交换树脂），724弱酸101x4树脂（阳离子型），717强碱201x7树脂（强碱性苯乙烯系阴离子交换树脂），CM-C羧甲基纤维素（弱酸性阳离子交换纤维素）,DEAE-C二乙基氨基乙基纤维素（强碱型阴离子交换纤维素），PBE94多缓冲交换剂（碱性阴离子交换剂）。3、色谱聚焦是一种高分辨的新型的蛋白质纯化技术。它是根据蛋白质的等电点，结合离子交换技术的大容量色谱，能分离几百毫克蛋白质样品，洗脱峰被聚焦效应浓缩，分辨率很高，操作简单。4、在采用多缓冲阴离子交换剂作固定相的离子交换聚焦色谱过程中，当柱中某位点之pH值下降到蛋白质组分PI值以下时，它因带正电荷而下移，如果柱中有两种蛋白组分，pI值较大者会超过另一组分，移动至柱下部pH较高的位点进行聚焦。1、亲和层析洗脱方法有非专一性洗脱，特殊洗脱，专一性洗脱。2、亲和力大小除由亲和对本身的解离常数（亲和势KL）决定外，还受许多因素的影响，其中包括微环境、空间位阻、配基浓度、载体孔径、结合位点等。3、亲和层析中常用作分离酶的配基有底物的类似物，抑制剂，辅酶和底物。4、亲和层析中非专一性吸附有离子效应、疏水作用、复合亲和力。5、亲和过滤指的是将亲和层析和膜过滤结合运用，它包括亲和错流过滤和亲和膜分离两大方法。1、制备亲和柱时应首先选用的配基是（A）A.大分子的B.小分子的C.中等大小的D.不确定2、亲和层析的洗脱过程中，在流动相中加入配基的洗脱方法称作（C）A.阴性洗脱B.剧烈洗脱C.竞争洗脱D.非竞争洗脱3、亲和层析的洗脱过程中，在流动相中减去配基的洗脱方法称作（D）A.阴性洗脱B.剧烈洗脱C.正洗脱D.负洗脱1、生物药物与生物制品的定义生物药物：是利用生物体、生物组织、细胞或其成分，综合应用生物与医学、生物化学与分子生物学、微生物学与免疫学、物理化学与工程学和药学的原理与方法进行加工、制造而成3的一大类预防、诊断、治疗和康复保健的制品。生物制品：是应用普通的或以基因工程、细胞工程、蛋白质工程、发酵工程等生物技术获得的微生物、细胞及各种动物和人源的组织和液体等生物材料制备的，用于人类疾病预防、治疗和诊断的药品。2.基因工程药物与基因药物有什么区别？基因工程药物是应用基因工程和蛋白质工程技术制造的重组活性多肽、蛋白质及其修饰物。药物的化学成分属于多肽或蛋白质。而基因药物是以基因物质（以基因物质（RNA或DNA及其衍生物）作为治疗的物质基础，包括基因治疗用的重组目的DNA片段、重组疫苗、反义药物和核酶等。药物的化学成分为核酸或其衍生物。3.生物药物的特性有哪些？（1）药理学特性：①活性强:体内存在的天然活性物质。②治疗针对性强，基于生理生化机制。③毒副作用一般较少，营养价值高。④生理副作用常有发生可能具免疫原性或产生过敏反应。(2)理化特性:①生物材料中有效成分浓度低，杂质种类多且含量相对较高②生物活性物质组成结构复杂、稳定性差③生物材料易染菌、腐败④生物药物制剂的特殊要求：缓释、控释。4、生物药物分类及每类药物的准确范畴（1）基因工程药物:应用基因工程和蛋白质工程技术制造的重组活性多肽、蛋白质及其修饰物。（2）基因药物:以基因物质（RNA或DNA及其衍生物）作为治疗的物质基础，包括基因治疗用的重组目的DNA片段、重组疫苗、反义药物和核酶等（3）天然生物药物:①微生物药物：是一类特异的天然有机化合物，包括微生物的初级代谢产物、次级代谢产物和微生物结构物质，还包括借助微生物转化产生的药物或中间体。如：抗生素、酶抑制剂、免疫抑制剂。②生化药物：指从生物体（动物、植物、和微生物)中获得的天然存在的生化活性物质（或者合成、半合成的天然物质类似物），其有效成分和化学本质多数比较清楚，通常按其化学本质和药理作用分类命名。（4）医学生物制品：用微生物（包括细菌、噬菌体、立克次体、病毒等）、微生物代谢产物、动物毒素、人或动物的血液或组织等加工制成的预防、治疗和诊断特定传染病或其它有关疾病的免疫制剂，主要指菌苗、疫苗、毒素、应变原与血液制品等。1、生物活性物质的来源及生物材料选择的质量准则来源：①动物脏器：胰脏、脑、胃粘膜、肝脏、脾脏等②血液、分泌物和其他代谢物：血液、分泌物③海洋生物：海藻、腔肠动物节肢动物等④植物⑤微生物：细菌、放线菌、真菌、酵母生物原料选择的质量准则：①有效成分的含量②杂质情况③来源2、常用的活性物质提取的方法有哪些？①酸、碱、盐水溶液提取方法②表面活性剂提取方法与反胶束提取方法③有机溶剂提取④双水相萃取法⑤超临界萃取法3、盐溶作用的原理？在稀盐溶液中，盐离子作用于生物大分子表面，增加了表面电荷，使之极性增加，水合作用增强，促进形成稳定的双电层，对生物大分子起到助溶作用。4、活性物质提取时的保护性措施哪些？活性物质的保护措施：（1）缓冲盐系统：防止pH大幅度变化（2）保护剂：还原剂、酶的底物、金属鳌合剂4（3）抑制水解酶的作用加EDTA除去重金属抑制酶活性选择热变性,使蛋白酶变性添加酶抑制剂（4）其它保护措施（防过冷、过热、酸、碱、紫外线、搅拌、高频振荡等）5、常用的浓缩方法有哪些？①盐析浓缩②有机溶剂沉淀浓缩③用葡聚糖凝胶（Sephadex）浓缩④用聚乙二醇透析浓缩⑤超滤浓缩⑥真空减压浓缩与薄膜浓缩6.简述生物活性物质分离纯化的主要原理。生物大分子分离纯化的主要原理是：1）根据分子形状和大小不同进行分离，如差速离心与超离心、膜分离、凝胶过滤等；2）根据分子电离性质（带电性）差异进行分离，如离子交换法、电泳法、等电聚焦法；3）根据分子极性大小及溶解度不同进行分离，如溶剂提取法、盐析法、等电点沉淀及有机溶剂分级沉淀等；4）根据物质吸附性质的不同进行分离，如选择性吸附与吸附层析等；5）根据配体特异性进行分离，如亲和层析法等。7.诱变育种的方法。（1）出发菌株的选择①稳定性②具备某种优良性状的菌株③对诱变剂敏感④生理状态及生长时间（2）诱变处理①化学诱变；②物理诱变;③生物诱变（3）筛选：①随机筛选；②半理性化筛选8.菌种的保藏方法。①斜面低温保存②液体石蜡封藏法③甘油冷冻法④冷冻干燥法⑤液氮保藏法9.目的基因的获得的方法。①cDNA文库②PCR法（变性，退火，延伸）③化学合成法10.酶的固定化方法。①吸附法：可分为物理吸附法和离子吸附法。离子吸附法常用的载体有阴离子交换剂和阳离子交换剂。②包埋法：将酶或细胞定位于凝胶高聚物网络中，如卡拉胶，海藻胶，聚丙烯酰胺③共价结合法：酶分子与载体分子，通过化学偶联使酶与载体共价结合。④交联法：是使用双功能或多功能试剂与酶分子之间进行分子间的交联反应的固定化方法。由于酶蛋白的功能基团，如氨基、酚基、巯基和咪唑基等参与交联反应，因此可能影响酶的活性中心结构，而使酶活力显著失活11.中试放大的方法。①经验放大法②相似放大法③数学模拟放大法1、凝聚作用和絮凝作用的原理各是什么？凝聚作用：指在某些电解质作用下，使胶体粒子的扩散双电层的排斥电位降低，破坏了胶体系统的分散状态，而使胶体粒子聚集的过程。絮凝作用：当往胶体悬浮液中加入絮凝剂时，胶粒可强烈吸附在絮凝剂表面的功能团上，而且一个高分子聚合物的许多链节分别吸附在不同的颗粒的表面上，形成架桥联接，形成粗大的絮凝团沉淀出来，有助于过滤。2.常用的细胞破碎方法有哪些？1）机械法：匀浆法、珠磨法、超声波2）物理法：干燥、冻融、渗透压冲击3）化学法：化学试剂处理、制成丙酮粉4）生物法：酶解法、自溶3、固液分离方法有哪些？1）过滤：常规和错流2）离心：过滤式离心和沉降式离心51.掌握萃取与反萃取，分配系数与分配比，萃取比和萃取率，分离因素的概念。（1）萃取：料液与萃取剂接触后，料液中的溶质向萃取剂转移的过程（2）反萃取：将萃取液与反萃取剂（含无机酸或碱的水溶液或水）相接触，使某种被萃入有机相的溶质转入水相的过程。（3）分配定律：一定温度、一定压力下，某一溶质在互不相溶的两种溶剂间分配时，达到平衡后；在两相中的活度之比为一常数，如果是稀溶液，可以用浓度代替活度，即：K称为分配系数。（4）在萃取过程中，溶质在两相的分子形式常常并不相同，仍然采用类似分配定律的公式