动物疫病监测诊断规范化工作程序1

四川省动物疫病预防控制中心李春四川省动物疫病预防控制中心2011年10月动物疫病监测诊断规范化程序及兽医系统实验室考核准备工作四川省动物疫病预防控制中心第一部分、动物疫病监测诊断规范化程序监测任务制定样品采集与送检实验室检测样品流转检测记录检测报告统计分析四川省动物疫病预防控制中心一、监测任务的制定国家、省、市、县逐级制定监测计划并组织实施《2011年四川省动物疫病监测计划》《2011年四川省口蹄疫等主要动物疫病流行病学调查方案》监测原则——“五结合”省级监测与地方监测相结合定点监测与全面监测相结合日常监测与集中监测相结合抗体监测与病原学监测相结合疫病监测与流行病学调查相结合监测模式——“四定”模式定点、定期、定量、定性四川省动物疫病预防控制中心二、样品采集与送检动物疫病采样技术规范DB51/T949—2009动物疫病实验室检验采样方法NY/T541-2002采样原则：适时、典型、无菌、适量和生物统计根据不同的检测要求采集不同样品（血液、组织器官、内容物、分泌物、排泄物或其他材料）无法估计病因时，可进行系统全面的样品采集进行流调、抗体监测、健康评估或环境卫生检测时，样品数量应满足生物统计学的要求死亡畜禽，采集样品夏天不得超过6h，冬天不超过24h疑似炭疽，禁止解剖；一般采耳静脉或割耳尖四川省动物疫病预防控制中心2.1样品的采集2.1.1血样的采集根据动物种类确定采血部位。选用真空管、无菌注射器、无菌采血瓶、毛细管的采血，采血量须满足试验需要若需抗凝血，则视实验要求选择抗凝剂。如需血清，则待血凝固后无菌分离血清并分装于灭菌瓶（管）中。3.8%柠檬酸钠溶10%EDTA溶液0.1%肝素钠动物采血部位动物采血部位猪耳静脉、前腔静脉鸡翅静脉、心脏牛耳静脉、颈静脉、尾静脉鸭鹅翅静脉、脚蹼静脉、心脏羊耳静脉、颈静脉兔耳静脉、心脏四川省动物疫病预防控制中心2.1样品的采集􀂄2.1.2家禽咽喉、泄殖腔拭子采集棉签插入后捻转2-3圈，两个拭子一并置入盛0.8mL左右的生理盐水或0.01MPBS（含双抗）的1.5mLEP管中。其它动物拭子采集类似。2.1.3实质脏器的采集肺脏、肝脏、脾脏、扁桃体、淋巴结、脊髓。无菌采集脏器组织块放入无菌容器内。每块组织应单独放在无菌容器中，注明采样动物名称、日期、组织。注意防止组织间互相污染。四川省动物疫病预防控制中心2.1样品的采集2.1.4其它样品采集皮肤、奶样、精液、胚胎、肠内容物、粪样、尿液、脑、脊髓等2.1.5注意事项个人防护（炭疽等人畜共患病）采样后的无害化处理畜禽及其产品无害化处理采样废弃物无害化处理环境消毒采样器械消毒样品外包装消毒四川省动物疫病预防控制中心2.2样品包装液体：离心管封口瓶有形病料：塑料自封袋，大袋套小袋，分病例包装《高致病性动物病原微生物菌（毒）种或者样本运输包装规范》四川省动物疫病预防控制中心2.3样品标识管上、瓶上、袋上都要标识清楚，用防脱色记号笔样品编号要与“采样单”对应，惟一性、可追溯性采样单一式三份（被采样单位、采样/送检单位、检测单位）采样单记录内容包括：动物场（厂）地址、动物种类、群体规模、发病日期、临床症状、治疗用药、样品编号、采样人、采样日期等。四川省动物疫病预防控制中心2.4样品保存抗凝血：4-8℃冷藏，不超过1w。血清：短时间可4-8℃冷藏冷藏，否则须-20℃以下保存病毒检测样品：短时间可冷藏，否则须-20℃以下保存，无条件的可置灭菌50%甘油-PBS液中冷藏，不宜反复冻融。细菌检测病料：冷藏，不宜冷冻，可置灭菌液体石蜡或30%甘油-PBS液/盐水中冷藏。四川省动物疫病预防控制中心动物疫病检测用样品一般存放条件样品名称检测项目贮存温度保存时间其它事项血清血清学检测4℃5天血清解冻时，先放4℃冰箱解冻，再放室温。禁止反复冻融-20℃以下三个月奶样品血清学检测4℃5天细菌学检测4℃5天病毒学检测24h内送检分泌物、排泄物细菌学检测4℃5天病毒学检测4℃尽快送检粪便鼻咽拭子细菌学检测4℃5天病毒学检测-30℃以下24h内送检加含抗生素PBS病毒保存液组织样品病理组织学4℃或室温放入10％福尔马林溶液中固定细菌学检测4℃或0℃以下5天病毒学检测-30℃以下-70℃以下24h内送检-70℃下可长期保存可加30～50％甘油生理盐水或PBS病毒保存液四川省动物疫病预防控制中心2.6样品送检2.6.1样品运输密封、无泄漏、冷藏保存运输，2.6.2样品送检“送检单”或“委托检测书”一式两份（送检单位、检测单位）要有详细的“采样单”《高致病性动物病原微生物菌（毒）种或者样本运输包装规范》四川省动物疫病预防控制中心三、实验室检测检测记录检测操作任务下达收样检测报告四川省动物疫病预防控制中心三、实验室检测3.1.1样品的接收按送检方出具的“抽样登记表”或“检测委托书”等送检凭证检查样品状态，清点数量，核实无误后，办理接收手续,填写“送检样品登记表”3.1.2样品的编号、登记样品包装外贴XX-XXX编号，并注明样品类别、样品数、要求检测项目的总标签；该样品编号作为唯一性标识，直至检测工作结束。3.1样品流转四川省动物疫病预防控制中心四川省动物疫病预防控制中心3.1样品流转3.1.3样品的发放按程序要求填写检测任务书，送相应检测室检测主检人员领取样品，进行样品交接签字，再次对样品进行核实凡委托检测或仲裁检测样品应有备份四川省动物疫病预防控制中心3.1样品流转3.1.4样品的检测检测方法选择：1.国家或行业标准规定的技术方法2.行业主管部门规定的技术方法3.国际通用的技术方法4.经确认可靠并经用户认可的新研究方法5.有标准或合格证书的诊断试剂四川省动物疫病预防控制中心3.1样品流转3.1.5样品的保管应根据不同样品的生物学特性及检测项目要求，对样品妥善保管。待检样品、在检样品、己检样品的存放应有明确标识。样品出入库清楚，帐物相符。四川省动物疫病预防控制中心3.1.6检测后样品的处理检测室完成检测工作后，将已检样品放回样品保管室保存。检完样品的保存期为三个月。超过保存期的样品，由实验室负责人批准后作无害化处理。3.1样品流转四川省动物疫病预防控制中心3.2检测记录使用的实验室记录要求规范统一，符合质量管理要求原始记录所包含的信息要求完整，内容真实实施检测、校核二级签字审核制度四川省动物疫病预防控制中心3.3检测报告检测报告应供尽可能祥实的信息(1)样品名称、数量；(2)样品惟一性标识；(3)样品送检时间及来源；(4)检测方法和依据；(5)出具报告兽医实验室标识；(6)出具报告日期和时间；(7)出具报告单位、地址、电话；(8)清晰准确的检测结果或结论；(9)编制人、审核人、批准人签字四川省动物疫病预防控制中心3.3检测报告及时出具检测报告报告要准确、客观格式要规范符合质量管理要求四川省动物疫病预防控制中心3.3检测报告严格实施批准人、审核人、制表人三级审核制度检测结论要加盖检验专用印章，并骑缝加盖检验专用章四川省动物疫病预防控制中心四、统计分析检测数据的统计分析从所收集的众多检测数据中，选择合理的统计学指标，采用相应的统计分析方法，从中得出有价值的结论。分析方法：主要包括：描述性分析、趋势性分析、干预性分析、统计推断分析四川省动物疫病预防控制中心四、统计分析结果上报及时性：周报、月报准确性：按标准核实、真实报送信息适用性：针对不同对象提供不同的信息全面性：提供适用、详尽的信息上报原则四川省动物疫病预防控制中心四、统计分析上报的形式1.报表：月报、季报、半年报、年报2.专题报告：3.简报、通信、专刊（辑）4.会议交流5.咨询通过“全国动物疫病监测与疫情信息系统”月报四川省动物疫病预防控制中心四、统计分析存在的问题监测结果和疫情信息上报不及时存在瞒报和漏报等现象检测方法和试剂不统一，上报监测结果的准确性差异大监测结果统计分析不够，未能实际指导防疫工作。建立有效地机制有利于监测工作的推进将监测工作开展的真实性、及时性以及监测工作的质量纳入目标考核加强技术培训、规范检测程序四川省动物疫病预防控制中心第二部分、兽医系统实验室考核准备工作四川省兽医系统实验室考核工作实施方案（川畜食函【2010】128号）省畜牧食品局负责全省各市（州）级和县（市、区）级兽医系统实验室的考核工作省动物疫病预防控制中心具体承担考核工作指导思想：以考促建、规范管理、提升能力四川省动物疫病预防控制中心一、考核工作目标实现兽医实验室科学化建设制度化管理规范化运行安全化操作工作目标分级实施、全面推进原则上在2011年底前通过考核、延期考核需提交申请。四川省动物疫病预防控制中心二、考核准备工作对照考核细则和建设标准完善设施条件制定管理制度加强人员培训规范检测活动准备申请考核材料各级兽医实验室四川省动物疫病预防控制中心三、考核的主要内容实验室设施1仪器设备2工作人员3实验室管理4检测工作5档案管理6现场检测操作7共现场考核84项市级关键项25个县级关键项22个四川省动物疫病预防控制中心四、现场考核易出现的不符合项4.1实验室设施功能室的设置和布局（7+2）功能分区和仪器摆放重要实验室设洗眼设施、自动水开关、空调门窗密封、有效防蚊蝇和老鼠警示标识四川省动物疫病预防控制中心常用警示标识紧急疏散标志实验室入口处贵重精密仪器有毒有害物品高温高速设备菌毒种保存处标识注意安全四川省动物疫病预防控制中心4.2仪器设备生物安全柜（不能用超净工作台）、通风橱、移动紫外灯（23+10）重要仪器设备专人管理（文件任命）有的仪器处于工作状态重要仪器有使用记录四川省动物疫病预防控制中心4.3工作人员专业技术人员比例80%培训计划和内容完整、有档案记录制定实验室所有人员培训计划制定运输和清洁员等人员培训计划严格执行培训计划包括对新员工的指导培训计划包括对有经验员工的周期性再培训培训计划主要内容四川省动物疫病预防控制中心4.4实验室管理质量管理体系要简单，易严格遵照执行专人进行标准查新和查新记录专人进行剧毒、危险物品和器材等管理，并要采取监督措施（双人双锁等）对实验废弃物无害化处理要有关证明记录所有需要专人管理的都需要文件任命四川省动物疫病预防控制中心4.5检测工作样品编号要规范（没有做到唯一性标识）对样品的流向及检验进度要进行有效监控原始记录信息要完整，记录规范原始记要实施检测、校核二级签字审核制度检测报告要严格实施批准人、审核人、制表人三级审核制度四川省动物疫病预防控制中心4.6档案管理检测报告原始记录仪器设备工作总结工作人员标准物质和试剂考核内容所建档案要规范、齐全，要专人管理四川省动物疫病预防控制中心4.7现场考核理论考试操作考核全部人员参加；个人满分为100分，总平均成绩达75分以上为合格。高致病性禽流感等14个防治技术规范至少抽检3项HI、IHA、ELISA单项满分100分，总平均成绩达75分以上为合格四川省动物疫病预防控制中心五、评审合计一票否决不超10%均为Y合格关键项非关键项评审意见四川省动物疫病预防控制中心谢谢！疫情信息管理科：李春联系方式：028-85061656电子邮箱：[e-mail]