动脉粥样硬化模型大鼠主动脉Rho激酶及相关细胞因子表达与益气活血方的干预

中国组织工程研究第20卷第18期2016–04–29出版ChineseJournalofTissueEngineeringResearchApril29,2016Vol.20,No.18ISSN2095-4344CN21-1581/RCODEN:ZLKHAH2703·研究原著·张红珍，女，1968年生，汉族，2005年山西医科大学毕业，硕士，教授，主要从事中西医结合防治动脉粥样硬化基础及临床研究。通讯作者：郭春兰，硕士，讲师，山西中医学院中西医结合临床学院，山西省太原市030619中图分类号:R318文献标识码:B文章编号:2095-4344(2016)18-02703-08稿件接受：2016-03-13，焦瑞2，李丽2，张英2，钱艳2，郭春兰1(1山西中医学院中西医结合临床学院，山西省太原市030619；2山西医科大学，山西省太原市030001)引用本文：张红珍，焦瑞，李丽，张英，钱艳，郭春兰.动脉粥样硬化模型大鼠主动脉Rho激酶及相关细胞因子表达与益气活血方的干预[J].中国组织工程研究，2016，20(18):2703-2710.DOI:10.3969/j.issn.2095-4344.2016.18.018ORCID:0000-0002-1461-210X(张红珍)文章快速阅读：文题释义：Rho激酶：是一种丝/苏氨酸蛋白激酶，是最早发现的Rho效应物，也是目前研究最清楚的一个RhoA下游效应分子，可通过调节组织因子、基质金属蛋白酶等细胞因子的合成与表达，促进动脉粥样硬化的发生、发展，由日本和新加坡先后鉴别，国内外研究已确认Rho激酶对于动脉硬化的形成、发生、发展具有非常重要的作用。基质金属蛋白酶：从初始内膜增厚到最终斑块破裂相等动脉粥样斑块病变各时期中都扮演了重要角色，不同亚型基质金属蛋白酶在动脉粥样硬化病变有不同作用。基质金属蛋白酶2和基质金属蛋白酶9在血管壁对内膜损伤的反应和动脉粥样硬化形成过程中起关键作用，并通过与血管平滑肌细胞作用干预血管的重构，影响动脉粥样硬化病程的发展及并发症的产生。摘要背景：益气活血的代表方剂补阳还五汤能够改善微循环，改善组织缺氧；降低纤维蛋白原、抗血小板聚集；降低血脂；扩张血管；抗血栓形成，减少新生斑块的破裂，具有多靶点、多途径抗动脉粥样硬化作用。目的：观察益气活血法的代表方剂补阳还五汤对动脉粥样硬化大鼠模型主动脉Rho激酶、组织因子及基质金属蛋白酶2、基质金属蛋白酶9mRNA表达的影响，探讨补阳还五汤抗动脉粥样硬化的作用机制。方法：维生素D3加高脂饮食诱导大鼠动脉粥样硬化模型。60只大鼠随机分为正常对照组、模型组、补阳还五汤10g/kg组、补阳还五汤20g/kg组、辛伐他汀对照组及补阳还五汤预防组，每组10只。造模成功后干预28d，检测主动脉Rho激酶、组织因子及基质金属蛋白酶2、基质金属蛋白酶9mRNA益气活血方对动脉粥样硬化模型大鼠主动脉Rho激酶及相关细胞因子表达的影响SD大鼠给予维生素D3+高脂饲料，造模成功后大鼠随机分组正常对照组(生理盐水灌胃)腹主动脉取血取主动脉组织补阳还五汤10g/kg组(补阳还五汤10g/kg灌胃)辛伐他汀对照组(辛伐他汀灌胃)SD大鼠模型组(生理盐水灌胃)1次/d，连续4周补阳还五汤20g/kg组(补阳还五汤20g/kg灌胃)补阳还五汤预防组(补阳还五汤10g/kg预防性灌胃)造模同时给药检测血脂总胆固醇、三酰甘油、低密度脂蛋白胆固醇和高密度脂蛋白胆固醇和氧化型低密度脂蛋白水平RT-PCR：Rho激酶、细胞因子、基质金属蛋白酶2、基质金属蛋白酶9的mRNA表达形态学观察：苏木精-伊红染色，光镜、电镜观察主动脉组织动脉粥样硬化的病理变化张红珍，等.动脉粥样硬化模型大鼠主动脉Rho激酶及相关细胞因子表达与益气活血方的干预P.O.Box10002,Shenyang110180:GuoChun-lan,Master,Lecturer,ClinicalSchoolofIntegratedTraditionalChineseandWesternMedicine,ShanxiUniversityofTraditionalChineseMedicine,Taiyuan030619,ShanxiProvince,China表达及血脂水平。结果与结论：①高脂饮食加维生素D3可诱导大鼠形成动脉粥样硬化模型，模型组有动脉粥样硬化斑块形成；②Rho激酶、组织因子及基质金属蛋白酶2、基质金属蛋白酶9mRNA表达量及血脂水平：正常对照组、补阳还五汤20g/kg组、辛伐他汀对照组、补阳还五汤预防组均显著低于模型组，差异有非常显著性意义(P0.01)；补阳还五汤10g/kg组也显著低于模型组，差异有显著性意义(P0.05)；补阳还五汤预防组、补阳还五汤20g/kg组、辛伐他汀对照组各组间差异无显著性意义(P0.05)；③结果提示益气活血方剂补阳还五汤具有抗动脉粥样硬化作用，降低Rho激酶、组织因子及基质金属蛋白酶2、基质金属蛋白酶9mRNA水平可能是其作用机制之一。关键词：实验动物；心肺损伤与修复动物模型；益气活血；补阳还五汤；动脉粥样硬化；Rho激酶；组织因子；基质金属蛋白酶；国家自然科学基金主题词：模型，动物；动脉粥样硬化；基质金属蛋白酶类；细胞因子类；组织工程基金资助：国家自然科学基金资助项目(81373532)EffectsofQi-BenefitingBlood-ActivatingChineseherbsonaortaRhokinaseandrelatedcytokineexpressioninaratmodelofatherosclerosisZhangHong-zhen1,JiaoRui2,LiLi2,ZhangYing2,QianYan2,GuoChun-lan1(1ClinicalSchoolofIntegratedTraditionalChineseandWesternMedicine,ShanxiUniversityofTraditionalChineseMedicine,Taiyuan030619,ShanxiProvince,China;2ShanxiMedicalUniversity,Taiyuan030001,ShanxiProvince,China)AbstractBACKGROUND:RepresentativeformulaeofQi-BenefitingandBlood-ActivatingChinesemedicinalherbsBuYangHuanWuTang(BYHWT)canimprovemicrocirculationandhypoxia,decreasefibrinogen,resistplateletaggregation,reducebloodlipid,dilatebloodvessel,resistthrombosis,andreduceneonatalplaquerupture,andhasamulti-target,multi-channelanti-atheroscleroticeffect.OBJECTIVE:ToobservetheinfluenceofrepresentativeformulaeofQi-BenefitingandBlood-ActivatingChinesemedicinalherbsBYHWTonaortaRhokinase,tissuefactor,matrixmetalloproteinase-2,matrixmetalloproteinase-9mRNAexpressioninatherosclerosismodels,andtoexploretheactionmechanismofBYHWTonanti-atherosclerosis.METHODS:VitaminD3andhighfatdietinducedatherosclerosisinrats.60ratswererandomlydividedintonormalcontrolgroup,modelgroup,10g/kgBYHWTtherapygroup,20g/kgBYHWTtherapygroup,simvastatincontrolgroupandBYHWTpreventiongroup(n=10).At28daysaftermodelestablishment,theexpressionlevelofRhokinase,tissuefactor,matrixmetalloproteinase-2,matrixmetalloproteinase-9mRNAexpressionandbloodlipidlevelweredetected.RESULTSANDCONCLUSION:(1)HighfatdietandvitaminD3couldinduceatherosclerosisinrats.Atheroscleroticplaqueformedinthemodelgroup.(2)Rhokinase,tissuefactor,matrixmetalloproteinase-2,matrixmetalloproteinase-9mRNAexpressionandbloodlipidweresignificantlylowerinthenormalcontrolgroup,20g/kgBYHWTtherapygroup,simvastatincontrolgroupandBYHWTpreventiongroupthaninthemodelgroup(P0.01).Aboveindexesweresignificantlylowerinthe10g/kgBYHWTtherapygroupthaninthemodelgroup(P0.05).NosignificantdifferenceinaboveindexeswasdetectedamongBYHWTpreventiongroup,20g/kgBYHWTtherapygroupandsimvastatincontrolgroup(P0.05).(3)ResultsindicatedthatQi-BenefitingandBlood-ActivatingBYHWTcanresistatherosclerosis,down-regulatetheexpressionofRhokinase,tissuefactor,matrixmetalloproteinase-2,andmatrixmetalloproteinase-9mRNAexpression,whichmaybeoneofthemechanismsofanti-atherosclerosis.Subjectheadings:Models,Animal;Atherosclerosis;MatrixMetalloproteinases;Cytokines;TissueEngineeringFunding:theNationalNaturalScienceFoundationofChina,No.81373532Citethisarticle:ZhangHZ,JiaoR,LiL,ZhangY,QianY,GuoC