古钩藤醇提液镇痛抗炎药理论文:古钩藤醇提液镇痛抗炎药理作用的实验研究【摘要】目的研究古钩藤醇提液的镇痛抗炎药理作用。方法采用小鼠热板法和扭体法镇痛实验,观察古钩藤醇提液的镇痛作用,观察小鼠腹腔毛细血管通透性和二甲苯至小鼠耳廓肿胀的影响,观察其抗炎作用。结果古钩藤醇提液具明显的镇痛作用,大剂量能降低毛细血管通透性,抑制由二甲苯所致的炎症反应,可减轻小鼠耳廓肿胀的作用。结论古钩藤醇提液有明显的镇痛和一定的抗炎作用。【关键词】古钩藤;镇痛抗炎;药理作用古钩藤又名海上霸王、白叶藤、牛角藤、大暗消等等,为萝藦科植物古钩藤CryptolepisbuchananiiRoem.etSchult的地上部分。多生于阳坡,攀援于其他树上,分布于广东、广西、云南、贵州等地,具有舒筋活络、消肿止痛、解毒等功效,用于治疗腰痛、腹痛、跌打损伤、骨折、痈疮、癣等疾病[1]。目前,镇痛抗炎作用的药物多为西药,且副作用多,而中草药古钩藤民间使用也有这方面的作用,是值得研究、开发的镇痛抗炎药。前期我们已经做过古钩藤根、茎水煎液大、小剂量组镇痛抗炎药理作用的研究,证明水煎液具备一定的镇痛抗炎作用,或有这种作用的趋势,其镇痛抗炎作用不稳定[2]。本科研小组现在对古钩藤醇提液镇痛抗炎作用进行实验研究,旨在对其进一步开发和临床应用提供一定的理论依据。1材料1.1动物小鼠,雌雄兼用,体质量(20±2)g,均由广西中医学院实验动物中心提供,动物证号1104,根据实验性质和性别分笼喂养,自由采食饮水。1.2仪器台式离心机XZB-2B型自控温度热板仪,山东省医学科学院设备供应维修站制造,设备号为:3-109-1-7-6;722型光栅分光光度计,上海第三分析仪器厂,设备号为:3-109-4-4-93。1.3药品与试剂干燥古钩藤全草,采自广西中医学院药用植物园;硫酸罗通定注射液,广东省博罗先锋药业集团有限公司生产,批号020902;醋酸地塞米松,天津药业集团新郑股份有限公司生产,批号070823;醋酸,上海试一化学试剂有限公司。伊文思蓝,上海化学试剂公司进口分装,批号F-9800。二甲苯,齐鲁石化公司研究院试剂公司;生理盐水,济南永宁制药厂。1.4制备古钩藤水煎剂古钩藤全草300g,加8倍水浸泡1h,煎煮40min,煎煮2次,合并药液过滤浓缩至200ml(1.00g/ml),后再加同等剂量的浓度为95%的酒精放置24h后醇提,按所需要的剂量配成溶液大剂量为30g/kg,小剂量为15g/kg,以备用。2方法和结果2.1小鼠热板法镇痛实验[3]取雌性小鼠,放入(55±0.5)℃热板测痛仪中,以舔后足作为疼痛反应指标,预测小鼠药前痛阈值。以痛阈值小于30s视为合格小鼠,将痛阈值合格的40只小鼠随机分为4组,每组10只。分别是古钩藤大剂量组,剂量为30g/kg;古钩藤小剂量组,剂量为15g/kg;阳性对照药罗通定组,剂量30mg/kg;生理盐水对照组,剂量为20ml/kg。灌胃给药两次,时间间隔为4h。末次给药后30,60,90,120min分别测定痛阈值。在测定中,如60s内无痛反应,应立即取出,并以60s计算。各给药组与对照组比较,统计数据以±s表示,统计方法用t检验法。结果见表1。表1古钩藤醇提液对热板法致痛小鼠的镇痛作用(略)痛阈值提高百分率(%)=[(药后痛阈值-药前痛阈值)/药前痛阈值]×100%。表1结果表明,古钩藤醇提液大剂量组在药后60,90,120min能明显提高小鼠痛阈值,而古钩藤醇提液小剂量组在药后30,60,90,120min也能明显提高小鼠痛阈值,从本实验结果中可以看出古钩藤醇提液有镇痛作用。2.2小鼠扭体法镇痛实验[3]取体质量18~22g健康小鼠40只,雌雄各半,随机分为4组,分组及给药方法同“2.1”项。末次给药后30min腹腔注射0.6%冰醋酸0.2ml/只,同时用秒表计时,记录小鼠15min内出现的扭体次数。各给药组与对照组比较,统计数据以±s表示,统计方法用t检验法。结果见表2。表2古钩藤醇提液对冰醋酸致痛小鼠的镇痛作用(略)药物镇痛百分率(%)=[(对照组扭体次数-给药组扭体次数)/对照组扭体次数]×100%。表2结果表明,古钩藤醇提液大、小剂量组对冰醋酸致痛小鼠能显著减少小鼠的扭体次数,具有明显的镇痛作用。但从各剂量组的镇痛百分率来看,镇痛百分率提高不明显。2.3小鼠二甲苯耳肿胀实验[3]取体质量18~22g健康雄性小鼠48只,阳性对照组药物改地塞米松,剂量为4.5mg/kg,其他分组与给药均同“2.1”项。第8天每只小鼠右耳廓前后均匀涂擦当日配制的二甲苯0.1ml/只,致炎15min后将小鼠脱颈椎处死,剪下小鼠左右耳,用打孔器(直径6mm)分别在左、右耳同一部位打下等大的圆形耳片,分别在电子天平上称重后,计算耳肿胀度。各给药组与对照组比较,统计数据以±s表示,统计方法用t检验法。耳肿胀度=右耳重量-左耳重量;肿胀抑制率(%)=[(对照组肿胀度-给药组肿胀度)/对照组肿胀度]×100%。结果见表3。表3古钩藤醇提液对小鼠耳廓肿胀的影响(略)表3结果表明,古钩藤醇提液大剂量组能明显抑制由二甲苯引起的小鼠耳廓肿胀,而小剂量组对此作用则无明显抑制作用。从抑制率看,大剂量组具有一定抑制耳廓肿胀的趋势,而古钩藤根小剂量组的抑制率为最差。2.4对小鼠毛细血管通透性影响的实验[3]取体质量18~22g健康小鼠48只,雌雄各半,分组及给药方法同“2.3”项。第8天,每只小鼠尾静脉注射2.5%伊文思蓝0.1ml/10g(体重),并同时腹腔注射0.6%冰醋酸0.2ml/只,15min后用6ml生理盐水腹腔注射,轻柔小鼠腹部,然后断头处死小鼠,剪开腹腔,用吸管吸取腹腔洗出液约5~6ml,3000r/min离心5min,取上清液3ml在722分光光度计590nm处测定吸收度(OD值)。各给药组与对照组比较,统计数据以±s表示,统计方法用t检验法。结果见表4。表4古钩藤醇提液对小鼠毛细血管通透性的影响(略)表4结果表明,古钩藤醇提液大剂量组能降低小鼠毛细血管通透性,减少腹腔液体的渗出,具有明显的抗炎作用。而古钩藤小剂量组效果不明显。3讨论上述实验结果显示,古钩藤醇提液大、小剂量组都具有一定的镇痛作用,并从中也看到其镇痛作用较好;而抗炎作用只在大剂量组存在,小剂量组抗炎作用不明显,但至少可以看出古钩藤醇提液或有这种作用的趋势,这点以后再做进一步的深入研究,其镇痛和抗炎作用机制有待进一步研究,以后在研究中应该对其进行药物提纯再做研究。古钩藤是瑶族人民民间长期使用的药材,有舒筋活络、消肿止痛等功效,主要用于治疗腰腿痛、风湿痛、痛经、软组织扭伤等,疗效显著,本实验结果与民间临床使用基本一致。本实验为古钩藤的进一步开发及临床应用提供了一定的理论依据。【参考文献】[1]全国中草药汇编编写组.全国中草药汇编,下册[M].北京:人民卫生出版社,1976:170.[2]张兴燊,周芳,廖日葵,等.古钩滕镇痛抗炎药理作用的实验研究[J].时珍国医国药,2007,18(7):1603.[3]陈奇,沈映君,刘青云,等.中药药理学实验,第1版[M].上海:上海科学技术出版社,2001:24.