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紫外-可见分光光度计是由光源，单色器，样品室和光测量部分组成，可根据使用的波长范围，光路的构造，单色器的构造，扫描的机构分为不同的类型。其基本原理是测定样品溶液或加一定试剂显色的样品溶液的吸光度。根据朗伯-比尔定律，样品溶液的吸光度与其浓度的关系如下式。It=I0·10-εcl式中：It---透过液层后的光强度；I0----入射光强度；C----待测物浓度；l---液层厚度；ε--------摩尔吸光系数，即在一定波长下，当C为1mol/L、l为10mm时的吸光度值It/I0=t为透光度。透光度的百分数，即t*100%=T,为百分透光度或透光率。比色皿的校正1.比色皿的选择比色液吸收波长在370纳米以上时可选用玻璃或石英比色皿，在370纳米以下时必须使用石英比色皿。比色皿有不同光程长度，通常多用10.0毫米的比色皿。选择比色皿的光程长度应视所测溶液的吸光度而定，以使其吸光度在0.1~0.7之间为宜。2.比色皿的校正（1）比色皿有方向性。有些比色皿上印有方向标志，使用时必须注意。校正无方向标志的比色皿时，要先确定方向并作好标志，以减少测定误差。（2）同一组比色皿相互间的差异应小于测定误差。测定同一溶液时，同组比色皿之间吸光度相差应小于0.005，否则需对差值进行校正。（3）有两种比色皿误差可影响测定结果的正确性。一种是比色皿对入射光的吸收（其中包括散射和反射）不一致。另一种是比色皿的光程长度不一致。由于吸光度与光程长度成正比，因此，吸光度的相对误差也与光程长度的相对误差成正比。此外，比色皿壁薄厚不均，皿面的内外反射也都存在微小差异。为此，应从多个同型比色皿中严格检查、挑选，编号后配套使用。（4）校正比色皿时，应将纯净的蒸馏水注入皿中，以其中吸收最小的比色皿的吸光度为零，测定其他比色皿的吸光度。测定比色液时，应将其吸光度减去比色皿的吸光度。由于比色皿本身的吸光度很小，应以反复多次测得的吸光度求出平均值作为比色皿的吸光度。（5）校正比色皿光程长度时，可将吸光度约为0.4的溶液注入皿中，测定其吸光度，以具有准确光程长度的比色皿的吸光度与之比较，以标准比色皿的吸光度为1.00，分别求出其与各待校正比色皿的吸光度测定值的比值。测定比色液时，可将所测得的吸光度乘以各该比值。玻璃仪器玻璃的化学性质稳定，抗腐蚀能力强，易于洗涤，因此，水质监测实验室最基本的仪器多用玻璃制作。容器类：玻璃容器主要指实验室中用一贮存和运送物料、以及容纳物质在其中进行化学反应的各种玻璃器皿。量器类：水质实验室的玻璃量器基本是指用于计量（量入量出）液体体积的一类器皿，它们常用被称为“白料”的软质玻璃制成，不宜在或哂纳感直接加热。A.量筒和量杯：用于量取要求并不精确的液体体积，例如配制百分浓度、体积比浓度等的溶液。量筒类的容量允许误差大致相当于它的最小分度值。B.量瓶：全称单标线容量瓶，用于配制标准溶液和定容实验，是精确的量入用量器。量瓶是细长颈薄壁的平底容器，瓶颈上刻有一条环形标线。瓶壁标有容积及其检定时的温度。棕色量瓶用于制备需避光保存的溶液。C.吸管：又称移液管，是做精确量出用的量器，有分度吸管和单标线吸管两种。D.滴定管：有常量和微量两个等级。在使用要求上滴定管分为酸式（具塞）和碱式（不具塞）两大类。酸式滴定管下部具有良好密合的磨口玻璃活塞，用于盛装酸性滴定液、氧化还原性溶液和盐类稀溶液。碱式滴定管下端装配一段具尖嘴玻璃管的胶皮管，胶皮管中放一粒直径稍大于胶皮管内径的玻璃珠以阻止液体流出。当用手指挤捏玻璃珠附近的胶皮管时，玻璃珠旁既形成一条窄细小缝，液体沿这条小缝流出成为小滴。其他：1.冷凝管：用于与其他仪器配套组装，在蒸馏或回流中起冷凝作用。冷凝管的规格按有效冷凝长度区分，最常用的为300mm和400mm两种。水冷式冷凝管按其内管形状可分为球形、蛇形和直形。蛇形的冷凝面积最大，适用于将沸点较低的物质由蒸气冷凝成液体；直形的冷凝面积最小，适用于冷凝沸点较高的物质；球形的则两种情况下均可选择使用，更经常用于回流的实验操作。空气冷凝管是一支单层的长形玻璃管，用于冷凝沸点在150℃以上的液体的蒸气。冷凝管所用冷却水的走向应自低端走向高端。如果将进水和出水口颠倒安装，易因内外管受热不均而引起脱落或炸裂。长期使用时，冷凝管夹层中能积滞黄色铁锈，可用10%稀盐酸或草酸洗去。2.干燥器：既可用以冷却和存放已烘干的样品、试药和称量瓶等，又可用于保存需要防潮的小型贵重仪器。是一个可严密封盖的厚壁玻璃圆缸。内部用带孔瓷板分隔成上下两层，上层存物，下层放置干燥剂（一种强吸湿性物质）。常用的干燥剂有无水氯化钙、硅胶、无水过氯酸镁以及浓硫酸等。玻璃盖与器体接触的磨砂平面上涂以凡士林以保证其密封性。搬动干燥器时要护住器盖以防滑跌。长期不用或室温低时，常发生打不开盖的现象，是因凡士林凝固所致，可用湿热毛巾温热盖沿，或将干燥器放在暖处，待凡士林软熔，再用一手抱住干燥器，一手轻轻推开盖子。为避免吸收空气中的水分，要及时盖好干燥器盖。为保持干燥剂经常确实有效，应定时更换或烘干干燥剂。3.漏斗：普通的主要用作过滤介质的支持，使固相和液相物质分开。漏斗由圆锥形漏斗体和管状漏斗颈组成。良好漏斗的锥形角度以60°为标准。漏斗的规格按上口的直径区分，最小的2~3厘米，最大20~30厘米。4.分液漏斗：用于两种不相混溶的液体分层分离。5.酒精灯：供实验室简单加热使用。酒精灯具有磨口玻璃帽罩，平时可防止酒精挥发，用毕时加帽灭火，不得用嘴吹气灭灯。灯内添加酒精以满2/3为宜。点灯时可用火柴或打火机引燃，不得将两灯相触点火，以免喷出酒精酿成火灾。灯芯要求松紧适当，过紧时灯火不旺，过松则灯芯易掉入灯中。玻璃仪器的洗涤玻璃仪器清洁与否能直接影响实验结果的准确性与精密度，因此，必须十分重视玻璃仪器的洗涤。实验室中常用肥皂、洗涤剂、洗衣粉、去污粉、洗液和有机溶剂等清洗玻璃仪器。肥皂、洗涤剂等用于清洗形状简单、能用刷子直接刷洗的玻璃仪器，如吸管、容量瓶、比色管、凯氏定氮仪等。此外，也可用洗液洗涤长久不用的玻璃仪器以及刷子刷不下的污垢，利用它与污物起化学反应，氧化破坏有机物而除去污垢。一、洗涤液的配制和使用（一）强酸性氧化剂洗液这是一种化学实验室的传统常规洗液，由重铬酸钾与酸硫配制而成。前者在酸性溶液中形成多重铬酸钾，有很强的氧化能力。这种洗液对玻璃的侵蚀作用小，洗涤效果好，但六价铬能污染水质，应注意废液的处理。铬酸洗液的配制：称20克工业品重铬酸钾置于40毫升水中加热使溶，放冷。缓缓加入360毫升工业浓硫酸（注意不能将重铬酸钾溶液加入硫酸中），边加边用玻璃棒搅拌。因二者混合时大量放热，故硫酸不可加得太快，注意防止因激烈放热而发生意外。配好后放冷，装入有盖的玻璃器皿中备用。新配的洗液呈暗红色，氧化能力很强。贮存洗液应随时盖好器皿的盖子，以免吸收空气中水分而逐渐析出CrO3,降低洗涤效果，使用温热的洗液可提高洗涤效率，但也能加快洗液变质的速度。洗液经长期使用或吸收过多水分时即变成墨绿色，表明已经失效，不宜再用。（二）碱性高锰酸钾洗液：作用缓慢温和，可洗涤有油污的器皿。配制方法：将4克高锰酸钾溶于少量水中，加入10%氢氧化钠至100毫升。另一种配制法是取4克高锰酸钾溶于80毫升水中，再加50%氢氧化钠至100毫升。后者更有利于高锰酸钾的快速溶解。使用这种洗液后如果玻璃器壁沾有褐色氧化锰，可用盐酸或草酸洗液洗除。碱性高锰酸钾洗液不应在所洗的器皿中长期存留。（三）纯酸洗液：根据污垢的性质，如水垢或盐类结垢，可直接用1+1盐酸或1+1硫酸、10%以下的硝酸、1+1硝酸浸泡或浸煮器皿，但加热的温度不宜太高，以免浓酸挥发或分解。（四）纯碱洗液：纯碱洗液多为10%以上的浓氢氧化钠、氢氧化钾或碳酸钠，用于浸泡或浸煮玻璃仪器，煮沸可以加强洗涤效果。但在被洗的容器中存留不得超过20分钟，以免腐蚀玻璃。（五）有机溶剂：沾有较多油脂性污物的玻璃仪器，尤其是难以使用毛刷洗刷的小件或形状复杂的玻璃仪器，如活塞内孔，吸管和滴定管的尖头，滴管等，可用汽油、甲苯、二甲苯、丙酮、酒精、氯仿等有机溶剂浸泡或擦洗。二、玻璃仪器洗涤法（一）例行洗涤法：常法洗涤。洗涤玻璃仪器之前，应先用肥皂洗净双手。一般玻璃仪器经自来水洗刷去灰尘后，用毛刷蘸热肥皂液（洗涤剂等）仔细刷净内外表面，尤其应注意容器的磨砂部分和器口边缘处，边用水冲边刷洗至无肥皂液，再用自来水冲洗3～5次，用蒸馏水充分荡洗3次。洗净的清洁玻璃仪器壁上应能被水均匀湿润（不挂水珠）。玻璃仪器经蒸馏水冲净后，残留的水分用指示剂检查应为中性。洗涤中应按少量多次的原则用水冲洗，每次充分振荡后倾倒干净。凡能使用刷子刷洗的玻璃仪器，都应尽量用刷子蘸肥皂液洗刷。（二）不便刷洗的玻璃仪器洗涤法：可根据污垢的性质选择不同的洗涤液浸泡或共煮，再按常法用水冲净。（三）水蒸气洗涤法：有些玻璃仪器，主要是成套的组合仪器，除按上述要求洗涤之外，使用前还要安装起来用水蒸气洗涤一定的时间。例如，凯氏微量定氮仪每次使用前应将整个装置连同接收瓶用热蒸汽处理5分钟，以便去除装置中的空气和前次实验所遗留的沾污物，从而减少实验误差。（四）特殊的清洁要求：如分光光度计的比色皿用于测定有机物之后，应以有机溶剂洗涤，必要时可用硝酸清洗，但要避免用重铬酸钾洗液洗涤，以免铬酸盐损伤玻璃。比色皿经酸浸后，先用水冲净再用乙醇或丙酮洗涤，干燥。参比池应作同样的处理，对洗好的比色皿进行几次吸光度或透光度检查，读数均应相等。对测定微量金属用的玻璃仪器，应以1+1硝酸洗涤，或用10%硝酸浸泡8小时以上。对用于测磷酸盐的玻璃仪器，不得使用含磷的洗涤剂。对测氨和凯氏总氮的玻璃仪器，应以无氨水洗涤。测定水中微量有机物如有机氯杀虫剂时，玻璃仪器需用铬酸洗液等浸泡15分钟以上，再依次用水、蒸馏水洗净。用于有机物分析的采样瓶，应用铬酸洗液、自来水、去离子水依次洗净，最后以重蒸的丙酮、乙烷或氯仿洗涤数次，瓶盖也用同样的方法处理。做增塑剂类分析测定用的玻璃仪器，经过刷洗并用自来水冲净以后，还应使用热水、丙酮、乙烷等浸泡和冲刷，然后再用蒸馏水冲净。用以萃取环境样品中增塑剂的索氏脂肪提取器，应先用乙烷和乙醚分别回流提取3～4小时方可使用。三、玻璃仪器的干燥每次实验都应使用清洁干燥的玻璃仪器，所以，玻璃仪器用后应立即洗净并干燥。（一）控干：洗净的玻璃仪器倒置于滴水架上或专用柜内控水晾干。倒置还有防尘作用。（二）烘干：最常用的干燥方法是烘干。将洗净的玻璃仪器置于110～120℃的清洁烘箱内烘烤1小时左右，有的烘箱还可以利用鼓风驱除湿气。烘干的玻璃仪器一般都在空气中冷却，但称量瓶等用于精确称量的玻璃仪器则应在干燥器中冷却保存。任何量器均不得用烘干法干燥。（三）吹干：急待使用或不便于烘干的玻璃仪器，可用电吹风机吹干。电吹风机可吹冷风和热风，使用方便。各种比色管、离心管、试管、三角烧瓶、烧杯等均可用这种方法迅速吹干。一些不宜高温烘烤的玻璃仪器如移液管、滴定管、比重瓶等也可用电吹风进行干燥。如果玻璃仪器带水量大，可先用丙酮、乙醇刷洗一下，必要时再用乙醚刷洗便可快速吹干。（四）少量小件玻璃仪器也可用酒精灯或红外线灯加热烤干。烤干时，应从仪器底部烤起，逐渐将水分赶到出口处挥发掉，注意防止瓶口的水滴滴回烤热的底部引起玻璃炸裂。反复上述动作2.3次即可烤干。烤干法只适用于硬质玻璃仪器，有些玻璃仪器如比色皿、比色管、称量瓶、试剂瓶等不宜用此法干燥。四、玻璃仪器的保存将干净的玻璃仪器倒置于专用柜内，柜的隔板上衬垫清洁滤纸，关紧柜门防止落尘。不可在玻璃仪器上覆盖纱布。要根据各种不同玻璃仪器的特点、用途、实验要求等进行分别保管。例如：1.移液管可置于有盖的搪瓷盘、盒中，垫以清洁滤纸；2.滴定管可倒置欲滴定价上，或盛满蒸馏水，上口加套指形管或小烧杯。使用中的滴定管（内盛试液）在操作暂停期间也应加套以防沾污。3.清洁的比色皿、比色管、离心管要收在专用盒内，或倒置在铺垫滤纸的专用架上。4.具有磨口塞的清洁玻璃仪器如量瓶、称量瓶，碘量瓶、试剂瓶等要衬纸加塞保存。5.凡有配套塞，盖的玻璃仪器，如比重瓶，称量瓶，量瓶、分