农业植物病理学

1园艺植物病害防治学实验指导书黄云、龚国淑、秦芸主编四川农业大学植保系二00五年十月2前言为配合学生学习《园艺植物病虫害防治学》，我们新编写了《园艺植物病虫害防治学实验指导书》。园艺植物病虫害防治学实验指导书是园艺植物病虫害防治学重要组成部份。该实验指导书共有9个实验及课程教学实习的综合性实验。实验1～9的内容为课堂教学内容的实验。以印证，直观感受植物病害的症状和病原的形态特征，为诊断病害打下基础为目的；综合性实验以系统应用所学知识及补充植物病理学基本实验技能，使学生能较多地掌握本学科的系统知识，为本学科的研究工作打下基础为目的。由于编者水平有限，虽尽力而为但也难以尽如人意，不对之处，望批评指正。编者二00五年十月3园艺植物病害防治学实验室守则一、实验室须知1．实验前须充分预习实验指导书的内容，明确本次实验的目的要求、做到心中有数。2.实验操作要细心谨慎，认真进行观察，独立完成实验作业。3．实验室内保持安静，不能随意走动、高声喧哗，如有问题需举手请教。4．使用显微镜及其他贵重仪器时要按要求操作。取、放显微镜时应一手握住镜背，一手托住底座，使显微镜保持直立，防止镜头滑落地面而损坏；玻片标本看后需放回盒内。5.如损坏、丢失实验仪器及其它物品，须酌情赔偿。6．实验完毕应将仪器放回原处，擦净桌面，收拾整齐。离开实验时前注意关闭门、窗、水、电等。二、实验室安全知识在实验室中，经常与毒性强、有腐蚀性、易燃烧和具有爆炸性的化学药品直接接触，常使用易碎的玻璃和瓷质的器皿，以及在水、电等高温电热设备的环境下进行操作。因此，必须十分重视实验室安全。1.进入实验室开始工作前，应了解水阀门及电闸所在处。2．使用电器设备(如烘箱、恒温水浴、离心机、电炉等)时，严防触电；绝不可用湿手开、关电器开关。3．使用可燃物，特别是易燃物(乙醇等)时，应特别小心。4.如果不慎倾出了相当量的易燃液体，立即关闭室内所有的火源和电加热器；用毛巾或抹布擦拭撒出的液体与清除。5．实验后的废弃物不得倒水槽中，应收集在指定的容器内。6．可能造成环境污染的废液、废物应密封塑料袋中，集中处理。三、实验室急救在实验过程中不慎发生受伤事故：应立即采取适当的急救措施。1．受玻璃、刀片割伤及其他机械损伤。首先必须检查伤口内有无玻璃或金属等4物的碎片，然后用硼酸水洗净，再涂擦碘酒或红汞水，必要时用纱布包扎。若伤口较大或过深而大量出血，应迅速在伤口上部和下部扎紧血管止血，立即到医院诊治。2．烫伤一般用浓的(90%～95%)酒精消毒后，涂上红花油，防止感染。3．灼伤强碱（如氢氧化钠，氢氧化钾)、金属钠、钾等其他碱性化学药品触及皮肤而引起灼伤时，要先用大量自来水冲洗，再用5％硼酸溶液或2％乙酸溶液涂洗。强酸、溴、氯、磷或其他酸性化学药品触及皮肤而致灼伤时，应立即用大量自来水冲洗，再以5%碳酸氢钠溶液或5%氢氧化铵溶液洗涤。如酚触及皮肤引起灼伤，可用酒精洗涤。4．触电立即切断电路。①关闭电源；②用于木棍使导线与被害者分开；③使被害者和地面分离。急救者必须做好防止触电的安全措施，手和脚必须绝缘。园艺植物病害防治学实验指南园艺植物病害防治学实验是园艺植物病虫害防治学课程的重要组成部分，是植物病理学基本概念、基础理论、基本原理的深化理解、实验应证、增强感性认识和衔接补充，是理论与实践相结合的具体体现。对学好农业植物病理学具有重要意义。园艺植物病害防治学实验的目的是以植物病理学和其它关学科知识为基础，追溯引起植物病害发生的原因及过程，认识不同病原所致病害的症状特点及病原形态特征。掌握植物病害实验及研究的基本技能及方法，注重学生观察、思考、分析、解决实际问题的能力培养，为将来的研究工作打下一定的基础。园艺植物病害防治学实验要求学生在实验之前预习实验指导，明确实验的目的意义，复习实验相关理论知识，了解实验的方法、步骤及重难点；认真、客观、正确地、观察、记录实验内容和显微绘图，整理、归纳，分析实验数据和结果，认真完成实验报告，总结成功的经验及找出不足的原因，培养科学态度。实验1～重点要求学生认知和掌握主要果树和蔬菜病害的症状和病原物的形态特点、学习显微绘图、制片技术；综合性实验要求学生学习和掌握从植物病害的调查、标本的采集、鉴定到灭菌、消毒、培养基制作及病原物的分离和培养等实验技能。该实验指导书对症状和病原形态特征进行了描述，通过提示对重点观察内容与阐明并对实验技能进行了简述。作业与思考题，主要是实验内容的课堂作业及复习时的参考。5第一部分园艺植物病害防治学实验实验一、园艺植物病害症状一、目的要求本实验通过对园艺植物病害标本的观察，明确植物病害的概念，认识和掌握植物病害的症状和病状、病征及其类型；学习植物病害症状描述和记载方法以及症状在病害诊断中的作用。二、材料和用具各种类型的病害标本、挂图、放大镜等。三、内容和方法（一）症状：感病植物的外观病态表现，可分为病状和病征两部分。病状及其类型：病状指植物生病后本身表现出来的不正常状态。分为以下五种类型：1．变色：植物受害后局部或全株失去正常的绿色、但植物细胞未死亡。1.1褪绿和黄化：是由于叶绿素合成受到抑制使叶片颜色变浅或褪绿变黄。如：豌豆黄顶病（黄化）、大白菜病毒病（沿叶脉褪绿）。1.2花叶与斑驳：部分叶绿素受到破坏，叶片黄绿相间或深绿和浅绿相间。如：苹果花叶病、萝卜花叶病、南瓜花叶病等。2．坏死：是寄主被害后其细胞和组织死亡，仍保留着原有的形状。2.1斑点：根据病斑颜色不同，有褐斑、灰斑、黑斑、白斑等。根据病斑形状不同：有圆形、椭圆形、梭形、不规则形，有的受叶脉所限成为角斑，有的沿叶脉发展形成条纹或条斑。如：豇豆褐纹病、黄瓜霜霉病、柑桔溃疡病、葡萄褐斑病、苹果灰斑病等。2.2穿孔：病斑部分组织脱落，形成穿孔。如：核果类穿孔病。2.3枯焦：早期发生斑点，随后迅速扩大或愈合成片，最后使局部或全部组织或器官死亡称为枯焦。如：马铃薯晚疫病和早疫病。2.4猝倒：幼苗茎基部坏死腐烂，缢缩呈线状、倒伏。如：茄科蔬菜幼苗猝倒病。2.5立枯：幼苗的根或茎基部与地面接触处腐烂，全株枯死，病苗不倒伏。如：茄科蔬菜苗期立枯病。3．腐烂：是较大面积植物组织受病原物的破坏分解，细胞崩溃解体。干腐——组织本身含水量较低，腐烂后水份很快散失。如：油菜菌核干腐病。6湿腐——组织本身含水较多，水份不易散发。如：瓜、果腐烂、大白菜的软腐病。4．萎蔫：植物根茎的维管束受病原物侵害后，大量菌体堵塞导管，或是产生毒素，影响水份运输，使其枝叶萎蔫下垂。（1）青枯：病株全株或局部迅速萎蔫，而叶片仍保持绿色。如：辣椒青枯病。（2）枯萎与黄萎：病状与青枯相似，但叶片多先从距地面较近处开始色泽变黄，病情发展较慢，不迅速枯死。如：番茄枯萎病和黄萎病。5．畸形：植物受害后，发生增生性病变或抑制性病变，分以下几种类型。5.1卷叶：叶片两侧沿叶脉向上卷曲，叶片较厚，硬而脆，严重时卷成筒状。如：桃缩叶病。5.2蕨叶：病组织发育不均衡，叶片变成线状或蕨叶状。如：蕃茄蕨叶病。5.3丛枝：受病后茎节缩短，枝条过度分枝，密集丛生。如：枣疯病。5.4瘤瘿：受病组织局部细胞增生，形成不定型的畸形肿大。如：柑桔根结线虫病、十字花科根肿病。病征及其类型病征是病原物在寄主的受病部位表现出来的特征。可分为以下类型：（1）霉状物：在受病部位产生的各种霉层，霉层具有一定的厚度。如：莴苣的霜霉病，葡萄霜霉病。（2）粉状物：在受病部位产生的各种粉状物。如：瓜类的白粉病、梨白粉病等。（3）粒状物：在受病部位产生的各种颗粒状物，形状、大小不定。如：十字花科蔬菜菌核病、瓜类的白粉病（闭囊壳）、苹果腐烂病、炭疽病。（3）锈状物：锈病的病征。如豇豆锈病、枣锈病。（4）脓状物：这是细菌病害独具的特殊病征。如：十字花科蔬菜软腐病、菜豆细菌性疫病、柑桔溃疡病。四、作业1.根据所观察的植物病害标本，按下表内容记载观察结果，应包括病状、病征的各种类型，至少记载10种。表病害症状记载表序号病害名称症状类型病害类型发病部位病状病征123475五、思考题：1．症状在病害诊断上有什么作用？2．学习病害症状的描述。实验二植物病害病原形态观察一、实验目的1.病原真菌认识真菌营养体:菌丝体——无隔菌丝、有隔菌丝的形态；真菌的菌丝体的变态结构——吸器、假根的形态；真菌的菌组织及菌组织体——疏丝组织、拟薄壁组织；菌核、子座、菌索的形态。认识真菌繁殖体的类型，真菌各种类型的孢子，学习常规的制片技术。2.病原细菌、病毒、线虫寄生性种子植物形态细菌病害、病毒病害、线虫病害、寄生性种子植物的病原形态。二、材料和用具真菌营养体、繁殖体和其它病原物的各种玻片标本和新鲜材料，徒手切片常规用具及显微镜。三、内容与方法（一）真菌的营养体其是真菌的主要营养器官，具有丝状并分枝的管状体，每一根丝状物叫菌丝，多数菌丝团聚在一起称菌丝体，根据菌丝有无隔膜，将菌丝分为无隔菌丝（低等真菌的菌丝）和有隔菌丝（高等真菌的菌丝）。1.菌丝观察无隔菌丝，有隔菌丝玻片标本，注意菌丝形态、有无隔膜、分枝处有无缢缩。2.真菌营养体的变态结构：真菌的营养体为了抵抗不良的环境条件和适应寄生生活而形成的一些特殊的结构。2.1吸器：由菌丝特化而成的伸入寄生细胞内吸收营养的结构。有球状、蟹状、根状等。观察小麦白粉病菌吸器玻片、注意在叶片的表皮细胞内，染成红色的蟹状吸器。2.2假根：是由菌丝分化的根状分枝。3.真菌的菌组织：真菌的菌丝体可密集形成菌组织，观察菌核切片玻片标本，菌核外层有2—4层褐色近圆形或多角形，排列紧密的细胞即拟薄壁组织，向内颜色较浅的为疏丝组织，可见菌丝体的长形细胞、组织排列疏松。84.真菌的菌组织体：真菌的菌组织还可以进一步形成菌组织体。4.1菌核：观察油菜菌核病玻盒标本，茎杆内的黑色颗粒状物即菌核，它是由菌丝紧密缠绕而成的坚硬的休眠体。4.2子座：观察子座玻片标本：子座是由拟薄壁组织和疏丝组织或由菌丝体与部份寄主组织结合而成的一种垫状结构，子座上形成产孢组织。4.3菌索：肉眼观察竹菌索玻盒标本，镜检菌索玻片标本，可见菌索是由若干菌丝平行排列形成的。（二）真菌的繁殖1．真菌的繁殖有两种类型：即无性繁殖和有性生殖。真菌的无性繁殖：是指不经过两个性细胞或性器官的结合而进行繁殖产生新个体，无性繁殖以营养繁殖为特征，形成各种类型的无性孢子，常见的无性孢子有：1.1游动孢子：鞭毛菌亚门的无性孢子。它是产生于孢子囊中的内生孢子，无孢壁、圆形、洋梨形或肾形，具1～2根鞭毛的内生游动孢子。游动孢子借助鞭毛在水中能游动，随后鞭毛收缩产生细胞壁、休止，然后萌发形成新个体。用挑片方法挑取少量十字花科白锈病疱斑内粉沫于载玻片上水滴中进行保湿培养，避光3～4小时后观察十字花科蔬菜的白锈菌（Albugocadida）孢子囊萌发生产的游动孢子在水中的游动情况。观察鞭毛玻片标本，注意有几根鞭毛。1.2孢囊孢子：接合菌亚门的无性孢子。它形成于孢子囊内，有孢壁、无鞭毛、长筒形、圆球形、梨形的内生不能游动的孢子。成熟后孢子囊破裂放出孢囊孢子。观察根霉菌（Rhizopusspp），注意孢囊梗顶端黑色圆形的孢子囊和它破裂后散出的孢囊孢子。孢囊梗2—3根着生在一起，下面有假根。1.3分生孢子：子囊菌亚门和半知菌亚门的无性孢子。它产生于菌丝分化而有形状差异的孢子梗上，具有各种形态的外生孢子。由于孢子成熟时从孢子梗上分生脱落故称分生孢子。一些分生孢子产生在特异的分生孢子盘、分生孢子器、分生孢子座和孢梗束上。观察辣椒炭疸病菌（Colletotrichumspp.），注意观察：分生孢子梗、刚毛和分生孢子形态。1.4厚垣孢子：各类真菌均可形成的无性孢子，它由菌丝体的个别细胞原生质浓缩，壁加厚形成的一种休眠孢子，观察厚垣孢子玻片，注意形状，壁是否加厚。2．真菌的有性生殖：是指通过两个性细胞或性器官的结合而进行生殖的一种形式。有性生殖所产生的孢子称为有性孢子。有性生殖进程以细胞核结合为特征。有性生殖一般包括三个阶段：质配（N+N）→[双核期（N+N）]→核配（2N）→减数分裂（N）。有性孢子分以下几种：2.1卵孢子：鞭毛菌亚门的有性孢子，由两个异型配子囊交配接触所形