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神木中学2014届高三年级生物复习导学案班级姓名小组星期月日课题动物细胞培养编制人杜春梅复习目标1.说出动物细胞工程常用的技术有哪些2.概述动物细胞培养的过程3.指出动物细胞培养的条件重点1.概述动物细胞培养的过程2.指出动物细胞培养的条件难点动物细胞培养与植物组织培养的区别基础●自主●梳理基础梳理动物细胞工程常用的技术手段有__________________、____________________、_____________________、_____________________等，期中_____________________是其他动物细胞过程技术的基础。一.动物细胞培养1、概念：从动物机体中取出相关的组织，将它分散成，然后，放在适宜的培养基中，让这些细胞的过程。2、原理：。3、过程：①从健康动物体内取出组织块，剪碎，用处理动物组织块，这样组织块就会分散成单个细胞，进而获得分散的单个细胞；②用培养液将分散的细胞稀释制成，置于适宜环境中培养；③悬液中分散的细胞很快就会在瓶壁上，称为，培养贴附性细胞时，细胞要能够贴附于底物上才能生长增殖，这就要求培养瓶或培养皿的内表面光滑、无毒，易于贴附，以后细胞进行有丝分裂，数量不断增多；④当贴壁细胞分裂生长到表面时，细胞就会停止分裂增殖，这种现象称为细胞的；⑤贴满瓶壁的细胞需要重用等处理，然后分装到多个培养瓶中继续分瓶培养；⑥传代培养的细胞一般传至以后就不易传下去了，一般来说，细胞在传至10-50代左右时，增殖会逐渐缓慢，以至于完全停止，这时部分细胞的细胞核型可能会发生变化。当继续传代培养时，少部分细胞会克服细胞寿命的自然极限，获得不死性，这些细胞已经发生了突变，正在朝着等同于癌细胞的方向发展，目前使用的或冷冻保存的正常细胞通常为10代以内，以保证细胞正常的二倍体核型。4、结果：。5、条件：①的环境：a、对培养液和所有用具进行；b、通常还要在培养液中加入一定量的，以防培养过程中的污染；c、定期，以便清除代谢产物，防止细胞代谢产物积累对细胞自身造成危害；②：糖、氨基酸、促生长因子、无机盐、微量元素、等；③：温度为_______________，PH为_________________；④：主要有，氧气是所必需的，二氧化碳的主要作用是。一般培养箱中的混合气体是。6、应用：①生产_________制品，如：____________________________________；②______________________中的受体细胞；③检测___________，判断某种物质的毒性；④科学家培养正常或各种病变的细胞，用于生理、______________等基础研究，如用于筛选抗癌药物等，为治疗和预防癌症及其他疾病提供理论依据。基础自测1.动物细胞工程技术的基础是（）A.动物细胞融合B.核移植C.动物细胞培养D.单克隆抗体的制备2.一般来说，动物细胞体外培养需要满足以下条件()①无毒的环境②无菌的环境③合成培养基需加血清④温度与动物体温相近⑤需要O2不需要CO2⑥CO2能调节培养液PHA.①②③④⑤⑥B.①②③④C.①③④⑤⑥D.①②③④⑥要点●归纳●探究要点一：动物细胞培养的过程问题1、流程图展示动物细胞培养的过程：2、动物细胞培养的取材要求：___________________________________________3、两次使用胰蛋白酶的作用：____________________________________________4、原代培养与传代培养的临界点是：______________________________________1.关于动物细胞培养的叙述，不正确的是（）A.用于培养的细胞大都取自胚胎或幼龄动物的器官或组织针对训练B.将所取的组织先用胰蛋白酶等处理使其分散成单个细胞C.在培养瓶中要定期用胰蛋白酶使细胞从瓶壁上脱离，制成悬浮液D.动物细胞培养只能传代50代左右，所培养的细胞会衰老死亡2.下列关于动物细胞培养的叙述正确的是（）A.动物细胞培养的目的就是为获得细胞分泌蛋白B.动物细胞培养前要用胰蛋白酶处理使细胞分开C.动物细胞培养不会出现接触抑制现象D.可以通过细胞培养技术获得完整的动物个体要点二：动物细胞培养与植物组织培养的比较问题项目植物组织培养动物细胞培养理论培养基类型成分取材结果应用相同点针对训练用动植物成体的体细胞进行离体培养，下列叙述正确的是（）A.都需用CO2培养箱B.都需用液体培养基C.都要在无菌条件下进行D.都可体现细胞的全能型课后●提升●训练1.回答下列有关动物细胞培养的问题：⑴在动物细胞培养过程中。当贴壁细胞分裂生长到细胞表面时，细胞会停止分裂增殖，这种现象称为细胞的。此时，瓶壁上形成的细胞层数是。要使贴壁的细胞从瓶壁上分离下来，需要用酶处理，可用的酶是。⑵随着细胞传代次数的增多，绝大部分细胞分裂停止，进而出现现象；但极少数细胞可以连续增殖，其中有些细胞会因遗传物质发生改变而变成细胞，该种细胞的黏着性，细胞膜表面蛋白质（糖蛋白）的量。⑶现用某种大分子染料，对细胞进行染色时，观察到死细胞被染色，而活细胞不染色，原因是。⑷检查某种毒物是否能改变细胞染色体的数目，最好选用分裂期的细胞用显微镜进行观察。⑸在细胞培养过程中，通常在条件下保存细胞。因为在这种条件下，细胞中的活性降低，细胞的速率降低。⑹给患者移植经细胞培养形成的皮肤组织后，发生了排斥现象，这是因为机体把移植的皮肤组织当作进行攻击。2.动物器官的体外培养技术对于研究器官的生理、病理过程及其机制意义重大。下图是一个新生小鼠的肝脏小块培养装置示意图。请回答下列问题。(1)肝脏切成小薄片，这有利于肝脏细胞_____________________________________________。(2)气室中充入5%CO2气体的主要作用是______________。(3)培养液中添加抗生素是为了抑制细菌生长，但要注意选择抗生素的________________，以保证抗生素对肝脏无害。(4)有机物X有毒性，可诱发染色体断裂。利用上图所示装置和提供的下列材料用具，探究肝脏小块对有机物X是否具有解毒作用。材料用具：肝脏小块，外周血淋巴细胞，淋巴细胞培养液，植物凝集素(刺激淋巴细胞分裂)；显微镜，载玻片，盖玻片，玻璃皿，滴管；吉姆萨染液(使染色体着色)，有机物X溶液等。实验过程：①在淋巴细胞培养液中加入植物凝集素培养淋巴细胞，取4等份，备用。②利用甲、乙、丙、丁4组上图所示装置，按下表步骤操作(“√”表示已完成的步骤)。甲乙丙丁步骤一：加入肝脏培养液√√√√步骤二：加入有机物X溶液√√步骤三：放置肝脏小块√上表中还需进行的操作是__________________________________________________。③培养一段时间后，取4组装置中的等量培养液，分别添加到4份备用的淋巴细胞培养液中继续培养。④一段时间后取淋巴细胞分别染色、制片。在显微镜下观察________________________，并对比分析。若丙组淋巴细胞出现异常，而甲组的淋巴细胞正常，则说明____________________________________________________________________。