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第1页2.2.2动物细胞融合与单克隆抗体泰兴市第二高级中学朱燕【教学目标】1、动物细胞融合的过程2、单克隆抗体制备的过程【教学重点和难点】1、教学重点（1）动物细胞融合（2）单克隆抗体的制备过程2、教学难点单克隆抗体的制备过程【课时】1课时【导入新课】“神舟”四号飞船上进行了包括曾被广泛关注的细胞“太空婚礼”——动物细胞和植物细胞两项空间细胞融合试验：B淋巴细胞和骨髓瘤细胞的融合、黄花烟草原生质体和“革新”一号烟草原生质体的融合两个科学实验，在电融合仪内经过160分钟后，终于获得成功。那动物细胞是如何进行融合的呢？细胞融合有什么样的用途呢？动物细胞融合的过程是怎样的呢？请同学们自主学习一、动物细胞的融合【自主学习】（阅读课本52页完成相关内容）（1）概念：指一个或多个动物细胞结合形成一个细胞的过程，也称为细胞杂交。（2）原理:______细胞膜的流动性_________(3)诱导动物细胞融合的方法有三种：生物方法（灭活的病毒）、化学方法（PEG）、物理方法（电激等）。从细胞融合的方式中，请同学们思考：1、A、B两两细胞融合的种类有__3_________种,分别是__AA、BB、AB________变试训练:ABC三种细胞两两融合的种类有___6________种ABCD四种细胞两两融合的种类有___10_____________种泰兴市青优课比赛第2页（4）意义：细胞融合技术突破了有性杂交方法的局限，使远缘杂交成为可能（5）应用：细胞融合技术已经成为研究细胞遗传、肿瘤和生物新品种培育等的重要手段，而杂交瘤技术，为制备单克隆抗体开辟了新途径。下面我们一起探讨细胞融合的过程，（强调融合完成的标志：杂交细胞进行有丝分裂），请同学们讨论动物细胞融合和植物体细胞杂交的比较思考与讨论:2、动物细胞融合和植物体细胞杂交的比较二、单克隆抗体【探究学习】1、单克隆抗体的概念：化学性质单一、特异性强的抗体2、单克隆抗体的生产过程：结合课件中的图，逐步思考：①产生特定抗体的B淋巴细胞，我们怎样才能得到呢？学生回答：对小鼠进行注射特定的抗原蛋白，使小鼠产生免疫反应。②两种细胞融合以后，请同学们看我们这里的图片，仔细观察看看，还有哪些细胞没有显示出来呢？学生回答：还有自自融合的细胞没有出现。③制备过程中的两次筛选的结果是什么？第一次：筛选出杂交瘤细胞第二次：筛选出能产生我们需要的特定抗体的杂交瘤细胞④单克隆抗体制备过程中应用哪些细胞工程技术手段？动物细胞融合植物体细胞杂交原理细胞膜的流动性细胞膜的流动性植物细胞全能性融合前使细胞分散后进行融合去除细胞壁诱导融合物理法，化学法，生物法物理法,化学法用途制备单克隆抗体解决远缘杂交不亲和的问题获得杂种植株第3页细胞融合，细胞培养通过细胞融合技术生产的单克隆抗体有什么样的优点呢？请同学们结合课本比较单克隆抗体和常规抗体的不同点3、单克隆抗体和常规抗体的比较单克隆抗体常规抗体分泌杂交瘤细胞各B淋巴细胞特点特异性强，灵敏度高特异性差，灵敏度低生产产量高，易分离产量低,分离困难试试身手：某同学根据杂交瘤技术的方法，设计了一个生产破伤风杆菌抗体的实验方案。据图回答：（１）该方案能达到预期效果吗？为什么？（２）图中②为过程，常用作为诱导剂。该细胞继承了因此不仅能分泌，还有的本领。体外培养杂交瘤细胞小鼠体内培养灭活的病毒给小鼠注射特定的抗原蛋白质从脾中分离出B淋巴细胞培养的骨髓瘤细胞未融合的细胞融合的具有同核细胞融合的杂种细胞选择培养基克隆化培养专一抗体检验阳性能产生抗体的杂交瘤细胞单克隆抗体第4页总结：两个过程：动物细胞融合过程单克隆抗体制备过程三个“一”：一个诱导细胞融合的新方法———灭活的病毒一个新细胞————————杂交瘤细胞一个优势—————————单克隆抗体特异性强、灵敏度高的优势课后思考：任何新技术的诞生，总会让人们争论不休，支持者当然可以举出无数理由，反对者也能历数此项技术的种种不足，对于“试管婴儿”和“克隆技术”，你是持支持还是反对态度，并分别举出你支持或反对的理由。巩固练习：1、关于灭活病毒的表述中正确的是（A）A.保留抗原性，可诱导细胞融合B.不能感染细胞，免疫系统不能再识别C.可用DNA探针检测病毒是否被灭活D.因不再具备完整的基因结构，不能再复制2、用动物细胞工程技术获取单克隆抗体，下列实验步骤中错误的是（B）A．将抗原注入小鼠体内，获得能产生抗体的B淋巴细胞B．用纤维素酶处理B淋巴细胞与小鼠骨髓瘤细胞C．用聚乙二醇作诱导剂，促使能产生抗体的B淋巴细胞与小鼠骨髓瘤细胞融合D．筛选杂交瘤细胞，并从中选出能产生所需抗体的细胞群，培养后提取单克隆抗体3、下面是单克隆抗体的制备示意图，请分析回答：小白鼠细胞A+瘤细胞B杂交瘤细胞单克隆抗体（1）细胞融合在生物工程中属于动物细胞工程的范围，用这种方法所得的杂交瘤细胞具有的主要特征是①能产生特定的抗体；②能无限增殖。（2）杂交瘤细胞通过细胞融合、细胞培养过程合成大量的单克隆抗体。（3）过程②进行的诱导方式，与植物原生质体的融合相比特有的方法是（A）A．灭活的仙台病毒B．骨髓瘤细胞C．离心D．聚乙二醇（4）在动物细胞培养过程中，要不停的使用的一种工具酶是胰蛋白酶，目的是使细胞分散开。（5）瘤细胞B具有癌变的特点，细胞A确切的说应该是一种浆细胞。①③②