减数分裂观察.

减数分裂的观察实验目的学习并掌握动植物减数分裂玻片标本的制作方法。了解动植物减数分裂的过程，观察减数分裂中染色体的动态变化。（二）减数分裂实验原理第一次分裂前期I（prophaseI）第一次减数分裂的前期特别长，包括细线期、偶线期、粗线期、双线期、终变期。细线期leptotene染色体细长如丝，首尾难分，彼此缠绕在一起偶线期zygotene同源染色体开始彼此靠拢联会配对粗线期pachytene二价体凝缩变短变粗呈粗线状可发生非姊妹染色单体的交换。粗线期：染色体继续缩短变粗，两条同源染色体配对完毕。因此原来是2n条染色体，经配对后形成n组染色体，每一组合有2条同源染色体，这种配对的染色体叫做双价体(二价体)。双线期diplotene染色体继续变短变粗，同源染色体开始排斥，有交叉结出现，呈麻花状。双线期：双价体中的两条同源染色体开始分开，但分开不完全，并不形成两个独立的单价体，而是在两个同源染色体之间仍有若干处发生交叉而相互连接。交叉的地方实际上是染色单体发生了交换的结果终变期diakinesis交叉节端化，染色体更粗短，二价体分散在核区内靠近核膜，可计数。终变期：两条同源染色体仍有交叉联系着，所以仍为n个双价体。染色体变得更为粗短，螺旋化达到最高度，双价体开始向赤道面移动，分裂进入中期I。(2)中期I：各个双价体排列在赤道面上，两个同源染色体上的着丝粒逐渐远离，双价体开始分离，但仍有交叉联系着。核仁核膜消失，纺锤丝形成，二价体着丝粒相对排列在赤道面上，同源染色体两个成员随机朝向一极。(3)后期I：双价体中的两条同源染色体分开，分别向两极移动，每一染色体有两个染色单体，在着丝粒区相连(相当于有丝分裂前期的一条染色体)。这样，每一极得到n条染色体，即在后期I时染色体数目减半。双价体中哪一条染色体移向哪一极是完全随机的。(4)末期I：核膜重建，核仁重新形成，接着进行胞质分裂，成为两个子细胞。注意：末期I的染色体只有n个，但每个染色体具有两条染色单体；而有丝分裂末期的染色体数为2n个，每个染色体只有一条染色单体。染色体到达两极，解螺旋，核膜核仁逐渐形成，胞质分裂形成二分体。(5)减数间期：在第一次分裂之末，两个子细胞进入间期，这时细胞核的形态与有丝分裂间期相似，但有许多生物没有间期，后期染色体直接进入第二次减数分裂的晚前期，染色体仍旧保持原来的浓缩状态。不过不论有没有间期，在两次减数分裂之间都没有DNA的合成及染色体的复制。(6)前期II、中期II、后期II和末期II前期II、中期II、后期II和末期II的情况和有丝分裂过程完全一样，也是每一染色体具有两条染色单体，所不同的是染色体在第一次分裂过程中已经减数，只有n个染色体了。第二次分裂前期IIprophaseⅡ每条染色体有两个单体，共一个着丝点，常呈X状。子细胞染色体数目为n。中期IImetophaseⅡ核膜核仁消失，纺锤丝出现。每条染色体以着丝粒排列在赤道面上。后期IIanaphaseⅡ每条染色体的着丝粒分裂为二，每条单体在纺锤丝作用下分别移向两极。末期IItelophaseⅡ到达两极的染色体解螺旋，核膜核仁相继出现，胞质分裂四分体thetetrad由原来的一个母细胞经过两次连续的分裂产生四个子细胞，称为四分子。实验原理在植物的花粉形成过程中，花药内的一些细胞分化为小孢子母细胞（2n），每个小孢子母细胞经减数分裂产生4个小孢子（n）。在适当的时期采集植物的花药，经固定、染色、压片等操作程序后，就可以在显微镜下看到细胞减数分裂过程中染色体的动态变化。实验原理在动物的有性生殖过程中，精巢首先分化为精母细胞（2n），经第一和第二次分裂，形成4个精子（n）。在适当的时间给动物注射秋水仙素，并取动物的精巢，经低渗、固定等处理后，可观察到减数分裂不同时期染色体的变化。实验用品蝗虫（Oxyaintricatastal），其染色体数为：雌虫（2n=2x=24,XX）；雄虫（2n=2x=23，XO）。雌虫比雄虫个体长，腹部末端为产卵器，呈分叉状。雄虫腹部末端为交配器，形似船尾。性成熟的雄性小白鼠（Musmusculus，2n=2x=40）。玉米(Zeamays,2n=2x=20)、蚕豆(Viciafaba,2n=2x=12)、显微镜、离心机、培养皿、小手术剪、解剖针、小弯镊、离心管、吸管、载玻片、镊子、大培养皿、染缸、酒精灯、吸水纸等。甲醇、冰乙酸、0.075N氯化钾、0.1%秋水仙素、Giemsa染色液、、醋酸洋红、改良品红、二甲苯、加拿大树胶、正丁醇等。实验步骤压片法制备蝗虫精巢减数分裂装片（1）取材剪去翅膀，在翅基部后方的背端，仔细剪开体壁，可见上方两侧（第4～7背板之间）各有一团黄色团状块（精巢）。（2）固定卡诺氏固定液固定2～4小时，经95%酒精洗2～3次后，转入70%酒精保存。（3）染色夹取一小枚管状精巢，放置于载玻片上，滴加适量醋酸洋红（或改良品红液）染色10～20min。（4）压片用解剖针挑取少量材料（一条精小管）到一张新载片上，加1滴新鲜染料或45%醋酸，拔碎，加盖玻片，复吸水纸压片。（5）镜检。压片法制备植物减数分裂装片1）取材获得处于适当减数分裂期的材料是制片成败的关键因素，而最适的时期又因实验主要目的不同而异。(2)固定最常用的固定液是卡诺氏固定液。经过固定处理的材料更易于染色、分色和保存。(3)涂抹用镊子直接从固定液或保存液中取出材料(花蕾、花序、幼穗等)，用洁净的刀片或镊子压在小孢子囊或花药上向一端轻轻抹去，将花粉母细胞压挤出来，注意勿使花药太过破碎；将挤出花粉母细胞(呈半透明胶状)小范围内涂成薄层。(4)染色在涂好的载玻片上滴加一滴或半滴染液，稍后用镊子把所有可见花药壁残渣清除干净。(5)初检与压片染色后置于低倍显微镜下初步检查，若花粉母细胞正处于分裂期，即可压片。(6)镜检观察在低倍镜下寻找适当视野，并正确区分处于减数分裂各个时期的花粉母细胞、二分体、四分体以及花粉粒、花药壁残留组织与细胞。作业与思考绘出观察到的减数分裂典型时期的分裂图。在观察减数分裂时如何区分第一次分裂和第二次分裂。