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分子生物学研究技术061M5011H学期：2015-2016学年秋|课程属性：|任课教师：柴团耀等课程安排课程大纲课程编号：061M5011H课时：40学分：3.0课程属性：主讲教师：柴团耀等英文名称：MolecularBiologyTechniques教学目的、要求本课程为生化与分子生物学专业研究生的学科普及课，同时也可作为其它相关学科研究生的选修课。分子生物学已经渗透到现代生物学的各个学科分支，其实验技术已被广泛应用于生命科学各个二级学科的基础研究。本课程重点讲授现代分子生物学研究实验技术的方法及其基本原理，发展背景、技术关键、操作要领、结果分析。介绍新技术，新方法及发展动态。为研究生今后从事科研工作实践，设计研究课题的技术路线和方案奠定基础。要求学生具有生物化学、遗传学和分子生物学基础。预修课程生物化学，细胞生物学，微生物学，遗传学教材生命科学学院主要内容前言（2学时教师：柴团耀）1.1分子生物学的基本含义1.2分子生物学的主要研究内容1.3分子生物学研究简史1.4课程内容安排及要求第一章分子克隆的工具酶和载体（4学时教师：柴团耀）2.1常用工具酶介绍2.1.1限制性内切酶2.1.2其它工具酶2.2常用载体介绍2.3GATEWAY载体2.4pCAMBIA载体第二章目的基因的获得（基因克隆技术）（6学时教师：柴团耀）3.1基因克隆常用的方法技术3.1.1同源基因的克隆技术3.1.1根据功能蛋白分离目的基因3.1.2根据mRNA的特异性分离目的基因3.1.3DNA插入作用分离目的基因3.1.4基因的图位克隆3.2差异表达基因的克隆3.3数量性状基因的克隆3.4噬菌体展示表面技术第三章基因表达调控的研究（6学时教师：柴团耀）4.1基因的结构分析4.2启动子分离4.3启动子活性分析4.4顺式作用元件确定4.5基因重组及转化技术4.6内外源基因的相互作用4.6转基因沉默的预防和利用4.7RNAi技术第四章分子杂交技术（4学时教师：柴团耀）5.1Southern杂交5.2Northern杂交5.3Western杂交5.4原位杂交（in-situhybridization）5.5FISH(Fluorescentinsituhybridization)第五章分子文库技术（2学时教师：柴团耀）6.1cDNA和基因组文库的构建6.2文库的扩增和目的基因的筛选第六章外源基因表达技术（2学时教师：柴团耀）7.1原核表达系统7.2真核表达系统7.3生物反应器第七章DNA和蛋白质的相互作用研究（2学时教师：柴团耀）8.1凝胶滞后实验8.2干扰实验（甲基化，尿嘧啶）8.3DNAaseI足迹分析8.4Southwestern杂交第八章蛋白质和蛋白质的相互作用研究（4学时教师：柴团耀）9.1蛋白质配体结合结构域筛选9.2细菌双杂合系统9.3酵母双杂交系统9.4酵母单杂交及三杂交系统9.5免疫共沉淀技术第九章DNA突变技术，基因组定向编辑技术（ZFN/TALEN/CRISPR-Cas）,分子标记及基因组关联分析(GWAS)（6学时教师：王红）第十章基因芯片技术，蛋白质组技术及生物信息学技术介绍（2学时教师：郎明林）教学方式:课堂讲授为主考试方式:课堂开卷参考文献参考书：MolecularBiologyoftheGene（7thEdition）2013,JamesD.Watson,TaniaA.Baker,StephenP.Bell,BenjaminCummingsPublishingCompany.授课时间：星期二,第1、2节授课地点：教2-204授课周次：2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13授课时间：星期四,第1、2节授课地点：教2-204授课周次：2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13