千扬水对当归补血汤治疗血虚证功效的影响[摘要]目的:研究千扬水对当归补血汤治疗血虚证功效的影响。方法:以乙酰苯肼结合环磷酰胺的方法制备血虚小鼠模型,分为空白对照组、模型组及两个治疗组(分别用蒸馏水和千扬水配置当归补血汤进行治疗),并采用断尾采血的方法测定四组小鼠实验前1天、实验第5、8、11、14天外周血象,观察RBC、WBC、HGB等各项指标的变化。结果:千扬水所配置的当归补血汤与蒸馏水所配置的当归补血汤功效差异不显著,不具备统计学意义。结论:千扬水不能提高当归补血汤治疗血虚证的功效。[关键词]千扬水;当归补血汤;血虚证;功效。血虚证是中医常见证型。近年来,对当归补血汤配伍比例及其有效成分等方面的研究非常重视。许多学者通过实验研究探索不同配比与其物质基础及效用之间的内在联系,以提高当归补血汤的功效。随着现代科学技术的发展,有研究发现汉代医家张仲景提出的千扬水可以使水中的氧气含量提高,同时使水分子之间的电荷更加有序,对中药汤剂有提高药效的可能。从中医角度来讲,扬过千遍的水可以增加水的阳性,如果用于制当归补血汤,则可增加制剂的阳性,符合中医“血不自生,须得生阳气之药,血自旺矣”的理论,从而具有提高当归补血汤功效的可能。本实验依据文献复制复合性贫血的血虚证小鼠模型,观察蒸馏水所配置的当归补血汤和千扬水所配置的当归补血汤对血虚证小鼠模型不同时间点外周血象的影响,验证千扬水是否能够提高当归补血汤治疗血虚证的功效。1材料与方法1.1实验动物小白鼠,昆明种,体重18~22g,清洁级。由山东中医药大学动物中心提供,合格证号SCXK-2014-0007。1.2试剂与药物环磷酰胺(CY),上海源叶生物科技有限公司产品,批号20140422365。乙酰苯肼(APH),上海源叶生物科技有限公司产品,批号20140201258。黄芪250g,当归50g,均购于济南漱玉平民大药房有限公司,批号20141109。1.3方法取黄芪250g,当归50g,分为两份,每份中黄芪125g,当归25g。药剂①:加蒸馏水浸泡1小时,然后加1000mL和500mL蒸馏水煮沸2次,每次1小时,合并水煎液,浓缩至水煎液浓度1.0g生药/mL,给药时用蒸馏水配成所需浓度;药剂②:加千扬水浸泡1小时,然后加1000mL和500mL千扬水煮沸2次,每次1小时,合并水煎液,浓缩至水煎液浓度1.0g生药/mL,给药时用千扬水配成所需浓度。取40只小白鼠,随机分为4组,每组10只,雌雄各半,分为空白对照组、模型组、用药组①(模型+当归补血汤+蒸馏水组)、用药组②(模型+当归补血汤+千扬水组)。空白对照组:于实验开始第1天、第4天皮下注射生理盐水,从第4天起,每日腹腔注射生理盐水,连续4天,同时于实验第1天开始灌服生理盐水,连续灌服10天;模型组:于实验开始第1天、第4天皮下注射乙酰苯肼20mg/kg、40mg/kg,从第4天起,每日腹腔注射环磷酰胺25mg/kg,连续4天,同时于实验第1天开始灌服生理盐水,连续灌服10天;用药组①:于实验开始第1天、第4天皮下注射乙酰苯肼20mg/kg、40mg/kg,从第4天起,每日腹腔注射环磷酰胺25mg/kg,连续4天,同时于实验第1天开始灌服蒸馏水当归补血汤,给药量为10g生药/kg,连续灌服10天;用药组②:于实验开始第1天、第4天皮下注射乙酰苯肼20mg/kg、40mg/kg,从第4天起,每日腹腔注射环磷酰胺25mg/kg,连续4天,同时于实验第1天开始灌服千扬水当归补血汤,给药量为10g生药/kg,连续灌服10天。断尾采血,测定各组小鼠实验前1天、实验第5、8、11、14天外周血象值,观察RBC、WBC、HGB等各项指标的变化。2结果2.1动物的一般体征模型组小鼠在注射药物后第4日即出现行动迟缓,团缩弓腰,面眼耳尾苍白而凉,毛枯而少光泽,血色淡。两组用药组的小鼠行动敏捷,眼睛明亮,鼻唇洁净潮润呈淡粉红色,尾圆色粉红,毛色正常,与正常组小鼠无明显区别。2.2蒸馏水所配置的当归补血汤和千扬水所配置的当归补血汤对血虚证模型小鼠的作用结果见表1、2、3。经统计,模型组与空白对照组相比,在实验第8﹑11﹑14天时,两组在RBC﹑HGB的数值上有显著差异,在实验第5﹑11天时,两组在WBC的数值上有显著差异,证明造模成功;用药组①﹑用药组②分别与模型组相比,皆于实验第11﹑14天时,在RBC﹑HGB的数值上出现显著差异,并于实验第8﹑11﹑14天时,在WBC的数值上出现显著差异,证明治疗见效;用药组①与用药组②相比,实验前1天,实验第5﹑8﹑11﹑14天,RBC﹑HGB﹑WBC的数值都不具有显著差异,即P>0.05,证明两用药组治疗效果没有明显差异。3讨论当归补血汤是金元时代李东垣所创造的益气补血方剂,由黄芪和当归两味药以5∶1比分组成的,具有益气生血功效,临床上广为应用于治疗血虚证。据《伤寒论》中记载,千扬水又称为甘澜水,其制法为:取水二斗,置大盆内,以杓扬之,水上有珠子五六千颗相逐,取用之。李时珍《本草纲目》有云:“观浊水流水之鱼,与清水止水之鱼,性色迥别;淬剑染帛,色各不同;煮粥烹茶,味亦有异。则其入药,岂可无辨乎。”由此推测,千扬水所制汤剂与普通水所制汤剂的疗效定有差别,《本草纲目》又载千扬水主治:病后虚弱,扬之万遍,煮药禁神最验。又载:“盖水性本咸而体重,劳之则甘而轻,”“甘烂水甘温而性柔”而甘者,能补能和,轻者,即具有轻扬之性,与温性同属阳性。因此推测如果用于制当归补血汤,则可增加制剂的阳性,符合中医“血不自生,须得生阳气之药,血自旺矣。”的理论,同时增强补益的功效,从而具有提高当归补血汤功效的可能。本实验以乙酰苯肼结合环磷酰胺的方法制备血虚动物模型,该模型使造模动物的病理、生理变化不再局限于某一方面,采用此方法造模,模型动物存活率较高,血虚状态的持续时间相对较长,有利于中药药效的表达,有利于检验本次实验中千扬水组与蒸馏水组药效的差异。此外,该模型不需要特殊设备,制备简单易行,模型较为稳定,重复性好。因此,本实验采取此种方法造模。研究表明,当归补血汤能显著增加血虚模型小鼠的红细胞、白细胞数,增加血红蛋白含量,因此通过检测各组实验动物血象的RBC、WBC、HGB三项指标,比较各组同一指标的变化情况,分析千扬水组与蒸馏水组哪组疗效明显,从而验证千扬水是否能增强当归补血汤的功效。根据以上依据设计本实验,实验结果显示,千扬水组小白鼠的RBC、WBC、HGB升高效果与蒸馏水组无显著差异,说明千扬水所配置的当归补血汤与蒸馏水所配置的当归补血汤疗效并无明显差异,由此说明千扬水不能提高当归补血汤治疗血虚证的功效。[参考文献][1]熊曼琪.伤寒论[M].中国版本.北京:人民卫生出版社,2000:161-162.[2]刘惠菊.本草纲目[M].中国版本.呼和浩特:内蒙古人民出版社,2006:231-232.[3]郭平.血虚证动物模型研究概况[J].山东中医药大学学报,2006,30(1):83.网址大全