凝胶成像系统软件操作指南2

Bio-RadQuantityOne软件应用讲义3-1QuantityOne应用讲义本讲义介绍QuantityOne的两个重要分析功能：定量分析和分子量确定。QuantityOne软件HelpQuickGuide快捷指南提示如何实现一个功能，如定量分析(VolumesQuickGuide)，电泳条带分析(BandAnalysis)，差显分析(DifferentialDisplayAnalysis)，克隆计数(ColonyCountingAnalysis)等。快捷指南下有1，2，3…步骤，根据提示完成。二．条带分析功能BandAnalysis介绍用此功能对泳道内的所有条带进行分子量确定，相对浓度分析1，2，3同上4，5，6确定泳道lane,并可对泳道进行各种调整（实际实验中泳道往往不是垂直的而出现各种变形。在软件的工具栏中有一LaneTool图标，包含有更多泳道编辑工具。7．LaneBackground去除泳道背景，建议不做LaneTool泳道编辑工具包BandTool条带编辑工具包Bio-RadQuantityOne软件应用讲义3-28．DetectBand，检测泳道内的条带，打开出现如下窗口，一般可通过调节sensitivity灵敏度来调节检测出的条带，或通过人工编辑来增加/减少条带。打开工具栏中BandTool条带编辑工具包可看到更多编辑工具（如上图）10.Standard输入分子量标准，软件自带有许多Bio-Rad的分子量标准，如你用的是自己的标准，进入NewStandard建立新的分子量标准，软件可以选择标准单位是MW（蛋白质）还是BP（核酸）等（左下图）。在Protein-Standard对话框中输入分子量数值，完成后单击赋值图标（右下图），回到图象文件上单击标准样品的泳道，软件自动将所输的分子量数值和泳道内的条带一一对应。10.BandAttribute条带属性，在完成第9步以后，软件已自动计算出了其他未知条带的分子量,打开bandattribute选择要报告的参数，这里我们选择MolecularWeight，图象上可以看到所有条带的分子量（红颜色标记），标准分子量为蓝色标记。赋值图标：告诉软件哪条是分子量标准样品的泳道输入分子量数值Bio-RadQuantityOne软件应用讲义3-311.Match，跳过不做12.PrintImage打印图象13.AllLaneReport所有泳道条带结果报告。打开窗口，选择要报告的参数，如Mol.Wt.（分子量，如左下图），软件将报告结果（右下图），在报告的右下脚有一报告输出工具，点击可将报告结果输出成TXT文本格式或输出至剪贴板，你可把它粘贴到EXCEL，WORD等文件下。报告结果输出工具